الفحص المجهري الإلكتروني للإرسال لتحديد توزيع الجليكوجين في عضلات الهيكل العظمي البشري

الجليكوجين ، وهو بوليمر جلوكوز متفرع ، هو احتياطي طاقة في المقصورات العضلية تحت الخلايا ، والفيفي الداخلي ، وتحت الحمامي داخل العضلة الهيكلية البشرية.

لتحديد توزيع الجليكوجين تحت الخلوي باستخدام المجهر الإلكتروني للإرسال ، TEM ، احصل على أنسجة عضلية هيكلية بشرية معزولة. إصلاح مع الجلوتارالديهايد للحفاظ على بنية الأنسجة. بعد تثبيت الأنسجة في محلول رابع أكسيد الأوزميوم ومحلول فيروسيانيد البوتاسيوم.

يرتبط مركب الأوزميوم والفيروسيانيد المنخفض بمجموعات الهيدروكسيل في الجليكوجين ، مما يحسن تباين جزيئات الجليكوجين في العضلات. بالإضافة إلى ذلك، تلطخ الأغشية والشبكة الساركوبلازمية — وهي عضية مرتبطة بالغشاء —

تجفيف الأنسجة في زيادة تركيزات الإيثانول. تضمينه في الراتنج ، وتشكيل كتلة صلبة. الحصول على أقسام رقيقة جدا مع ألياف عضلية طولية المنحى. نقل إلى شبكات TEM.

اغمر الشبكات في أسيتات اليورانيل ، محلول المعادن الثقيلة. ترتبط أيونات اليورانيل بالدهون والبروتينات سالبة الشحنة ، مما يجعلها كثيفة الإلكترون. وصمة عار بمحلول سترات الرصاص.

ترتبط أيونات الرصاص بالمناطق الملطخة بالأوزميوم بما في ذلك جزيئات الجليكوجين ، مما يعزز التباين. كما أنها ترتبط بالمناطق المتفاعلة مع أسيتات اليورانيل ، مما يزيد من عتامة الإلكترون.

أثناء التصوير TEM ، عندما تمر حزم الإلكترون عبر الأنسجة ، تشتت المناطق الملطخة كثي