تقييم المواد الحيوية لتكبير المثانة باستخدام تحليلات Cystometric في نماذج القوارض مختلفة

تهدف هذه العملية إلى تقييم استخدام المواد الحيوية لزيادة سعة المثانة من خلال الحصول على بيانات وظيفية عن طريق قياس التدفق الخلوي. ويتم تحقيق ذلك أولاً عن طريق تثبيت السقالة في عيب تم إحداثه في المثانة. وتتمثل الخطوة الثانية من العملية في تمرير أنبوب فغر المثانة وصولاً إلى البطن.

تتمثل الخطوة الثالثة في وضع أنبوب فغر المثانة داخل المثانة المُعززة وتثبيته على ظهر الحيوان. أما الخطوة النهائية فهي إجراء قياس تدفق البول لتقييم المثانة المُعززة من منظور وظيفي. وفي النهاية، يمكن للنتائج أن تظهر تغيرات في سعة المثانة ومرونتها، وضغوط التبول، وأوقات دورة التغذية، وأحجام البول المتبقية بعد التبول من خلال قياس تدفق البول في حالة الوعي.

تمتد آثار هذه التقنية نحو علاج التشوهات الخلقية والمكتسبة في المثانة أو الإحليل التي تؤدي إلى ضعف سعة المثانة، وامتثالها، ووظيفتها العامة. وذلك نظراً للحاجة إلى تقييم المواد الحيوية المبتكرة المستخدمة في تضخيم المثانة وظيفياً. بعد تحضير الحيوان للجراحة البطنية، استخدم المشرط لإجراء شق في خط المنتصف السفلي عبر الجلد.

باستخدام ملقط مسنن، ارفع العضلة المستقيمة وقم بتشريح السطح الخلفي للعضلة باستخدام مقصات دقيقة ومقصات بلوم، ثم قم بقص ما تبقى من العضلة في الخط المتوسط على طول الشق الجلدي لإظهار المثانة من خلال الجرح الشقي. في ذلك اليوم، ضع غرزة جراحية عبر الجدار الخلفي للمثانة ثم عبر الجدار الأمامي للمثانة. ضع غرزًا إضافية جانبيًا على المثانة ولا تربط هذه الغرز.

عندما يتم شد الغرز، ستتخذ المثانة تكويناً مربعاً يبلغ قياسه حوالي سنتيمتر مربع واحد، وذلك طولياً عبر الجدار الأمامي للمثانة، أسفل قبة المثانة مباشرة على طول الخط المتوسط. يجب توخي الحذر من شد هذه الغرز بقوة مفرطة لأنها قد تنسحب بسهولة عبر أنسجة المثانة. بالنسبة لهذه الخطوة، يفضل استخدام تكبير الحلقة لإجراء المفاغمة للسقالة. وباستخدام مقص دقيق، يتم قص السقالة الحريرية لتناسب المساحة التقريبية لعيب المثانة.

ابدأ من إحدى زوايا السقالة وقم بخياطتها إلى المثانة بطريقة الخياطة المستمرة. ولإنشاء سدادة محكمة ضد الماء على طول محيط العيب، من المهم جداً للجراح إجراء مفاغرة محكمة ضد الماء وخالية من الشد بين السقالة والمثانة. سيضمن ذلك احتواء جميع البول داخل المثانة، حيث أن أي تسرب داخل البريتون سيؤدي على الأرجح إلى نفوق الحيوان.

كاختبار، استخدم إبرة تحت الجلد عيار 30 gauge لملء المثانة بالماء. في حال وجود تسرب، قم بإغلاقه باستخدام غرزة متقطعة إضافية. بعد ذلك، أعد المثانة المعاد بناؤها إلى التجويف البطني قبل إغلاق جدار البطن.

احقن العضلة المستقيمة والأنسجة تحت الجلد بـ bupivacaine للتخدير الموضعي ثم أغلق الشق الجراحي. بعد ذلك، استخدم غرزة جراحية مستمرة لتقريب العضلة المستقيمة مرة أخرى، وأغلق الجلد بغرزة جراحية مستمرة. بعد تنظيف الشق وتجفيفه، انقل الحيوان إلى قفص دافئ ونظيف للاستفاقة من التخدير.

قبل البدء، قم بعمل مثبت عند طرف أنبوب PE 50 بطول 10 centimeter حتى لا ينزلق خارج المثانة. يتم ذلك عن طريق توسيع طرف الأنبوب بتعرضه للهب بلطف. ثانيًا، تحقق من أن الأنبوب غير مسدود.

احقن الطرف غير المتسع بمحلول ملحي وتأكد من تدفقه. بعد تحضير الحيوان للجراحة، وقبل كشف المثانة، قم بعمل شق بطول واحد سنتيمتر على الظهر بين لوحي الكتف. وباستخدام مقصات ميتسون بالم، قم بتكوين مستوى فاصل بين الجلد والعضلة التي تقع تحته.

بعد ذلك، ضع طرفي المقص في المستوى وقم بفتحهما لإنشاء نفق تحت جلدي وصولاً إلى المنطقة البطنية البطنية. ثم، اقلب الحيوان، واكشف عن المثانة وأعدها إلى التجويف البطني.

بالعودة إلى الشق الظهري، ضع ملقطاً صغيراً داخل النفق الموجود تحت الجلد. استخدم أصابعك لحماية المحتويات الموجودة داخل التجويف البطني، ثم استخدم أطراف الملقط لاختراق جدار البطن. الآن، أمسك الطرف الأملس من الأنبوب المتسع بواسطة الملقط واسحبه للخلف عبر الشق الظهري.

لا تسحب الطرف المثبت المتوسع عبر جدار البطن بينما تظل الأنبوبة تمر عبر الشق. ضع غرزة كيسية (purse string stitch) عند قبة المثانة. ضع مشبكاً صغيراً على الطرف الحر من خيط الجراحة لضمان عدم سحبه عن طريق الخطأ عبر الغرزة.

كذلك، لا تشد خيط الجراحة بقوة. الآن، استخدم إبرة قياس EU 18 لثقب جدار المثانة في مركز غرزة كيس النقود (purse string suture) بحيث تكون داخل التجويف فقط. ثم ضع الملقط الدقيق في الفتحة وباعد بين طرفيه برفق لتوسيع الثقب.

أدخل الطرف المتسع من القسطرة في الفتحة الموجودة بالمثانة حتى تصبح داخل التجويف. ثم شد غرزة كيس النقود (purse string suture) حول القسطرة واربطها بإحكام. بعد ذلك، لف الطرف الحر من الغرزة حول القسطرة مرة واحدة واربطه.

الآن، قم باختبار المثانة عن طريق حقن المحلول الملحي ببطء فيها عبر الأنبوب. إذا كان هناك تدفق من الإحليل، فقم بشفط المحلول الملحي لتفريغ ضغط المثانة. وكرر هذه العملية. في حال اكتشاف تسريب، يجب إصلاحه عن طريق الخياطة الجراحية، حيث يمكن أن يؤدي تسريب البول إلى الوفاة.

أغلق الشق البطني كما تم توضيحه سابقاً. ثم انتقل إلى إغلاق الشق الظهري. تختلف إجراءات إغلاق الشق الظهري بين الجرذان والفئران.

بالنسبة للجرذان، استخدم مقصاً لقطع أنبوب القسطرة عند مستوى الجلد. ثم أدخل إبرة ذات طرف غير مدبب بقياس 22 gauge في الأنبوب. استخدم غرزاً جراحية مستمرة لإغلاق الجلد فوق الأنبوب، مع ترك محور الإبرة بارزاً للخارج.

قم الآن بوضع غطاء خط وريدي على الإبرة غير المدببة وثبّت طرف القسطرة بالجلد. بعد ذلك، نظف مكان الشق واترك الحيوان ليتعافى في بيئة دافئة. أما في الفئران، فيجب تثبيت القسطرة على النحو التالي: اترك القسطرة طويلة وأغلق طرفها عن طريق صهره بلهب.

قم بلف طرف الأنبوب واتركه في الجيب تحت الجلدي على ظهر الحيوان. أغلق الجلد فوق الأنبوب باستخدام غرز جراحية مستمرة. وقبل إجراء التحليل السيتري، اترك فترة تعافي بعد الجراحة لا تقل عن خمسة إلى سبعة أيام سواء للفئران الجرذان أو الفئران الصغيرة.

بعد التعافي في يوم قياس التدفق الخلوي. بالنسبة للفئران، من الضروري أولاً فتح الشق الظهري تحت التخدير وإزالة الأنابيب الملتفة من الجيب تحت الجلد. بعد إزالة الأنابيب، أغلق هذا الشق وانتظر حتى تستيقظ الفئران تماماً من التخدير قبل البدء في عملية قياس التدفق الخلوي، وذلك بوضع الحيوانات في أقفاص أيضية معلقة فوق موازين.

قم الآن بالوصول إلى قساطر فوق العانة باستخدام إبرة مقاس 27 gauge متصلة عبر أنبوب ttu بمحول الضغط ومضخة التسريب. ابدأ بتسريب المحلول الملح الفسيولوجي. اترك تخطيط نمط التبول حتى يستقر.

خلال الدقائق العشر إلى العشرين التالية، يرتفع ضغط المثانة أولاً، ويلي ذلك عملية تفريغ. ثم يتم تسجيل دورات التبول لمدة تتراوح من 15 إلى 120 دقيقة، أو ثلاث أو أربع دورات تفريغ على الأقل أثناء الإجراء. يجب مراقبة حدوث أي التواء في القسطرة أو أي مضاعفات أخرى.

يمكن بعد ذلك تحليل تتبعات الديناميكا البولية لاستخلاص معاملات مثل أحجام التبول، والامتثالية، وذروة ضغوط التبول أثناء الانقباض، والفاصل الزمني، ووقت دورة التبول، وأحجام البول المتبقية بعد التبول. بعد مشاهدة هذا الفيديو، يجب أن يتكون لديك فهم جيد لكيفية تعزيز المثانة باستخدام أي مادة حيوية. ستتعرف أيضاً على كيفية تقييم وظيفة مثانة أي قارض باستخدام قياس الخلايا الواعي وغير المقيد.