Protein Pull-Down with Antibodies and Beads

Immunoprecipitation uses antibodies and Protein A/G agarose beads to isolate a specific protein from a cell lysate. It is also called a pull-down assay. The term "immuno" refers to the antibody, and "precipitation" means pulling a substance out of solution.

The target protein ...

免疫沉淀（Immunoprecipitation，简称 IP）是一种广泛应用的技术，用于从细胞或组织裂解液或体液中分离目标蛋白，以进行蛋白质表征或研究蛋白质-蛋白质相互作用。

该过程首先使用一种对目标蛋白具有高亲和力和特异性的抗体。将此抗体与样品混合，使抗体-目标蛋白复合物得以形成。在此过程中，任何与目标蛋白结合的蛋白质也会间接地附着到抗体上。接下来，将溶液与连接了细菌蛋白的琼脂糖微珠共同孵育，该细菌蛋白对抗体的恒定区具有强亲和力。细菌蛋白与抗体结合，从而将抗体-目标蛋白复合物连接到微珠上。随后，通过离心使微珠沉淀，从而分离出包含结合抗体、目标蛋白及任何相互作用蛋白在内的完整复合物。最后，从微珠上洗脱结合的蛋白质，并使其彼此分离，用于后续如蛋白质印迹（Western blo...