慢性缩窄大鼠坐骨神经疼痛过敏测试

Summary

由于手术简单和健壮的行为结果，坐骨神经慢性缩窄是神经​​痛卓越的动物模型之一。手术后24小时内，疼痛过敏建立并可以使用冯弗雷触觉（机械测试）和足底的镇痛米（热试验）的定量测​​定。

Abstract

慢性神经性疼痛，从中央或周围神经系统的损害，是一种普遍的和虚弱的状态，影响7-18人口的^1,2％。症状包括自发性疼痛（刺痛，烧灼，电休克一样），感觉迟钝，感觉异常，痛觉异常（通常非疼痛刺激产生疼痛）和痛觉过敏（增加疼痛刺激的反应）。感觉症状与行为障碍，如失眠和抑郁，病态的合作。为了研究慢性神经痛几个模仿周围神经损伤的动物模型已开发，使用最广泛的是贝内特和谢的（1988）单方面坐骨神经慢性压迫性损伤^{（CCI）3（} 图1）。在这里，我们提出一个表演CCI和测试疼痛过敏的方法。

CCI是在麻醉下进行，一方面通过使暴露坐骨神经亲属的切口，并通过切割之间的臀肌浅和股二头肌肌肉结缔组织。四个铬肠道结扎坐骨神经周围松散地绑在1毫米的间隔，只是阻挡而不是逮捕epineural的血流量。关闭伤口缝合肌肉和皮肤中的主食。然后，动物被允许恢复从手术前24小时开始疼痛过敏测试。

行为测试，老鼠被放入测试设备，并允许习惯于测试过程。测试的区域是中旬的后肢跖面（ 图2），属于坐骨神经分布区域内。通过机械刺激使用电子动态足底冯弗雷触觉或手册·冯·弗雷毛发⁴受伤和未受伤的后爪机械痛阈值评估。机械撤出门槛是施加最大的压力（克），触发爪子撤出。热退缩潜伏期哈格里夫斯等人 （1988）首次描述，测量，后肢被暴露在辐射热束通过一个透明的玻璃表面，使用足底镇痛米^5,6。记录的时间为受伤和未受伤的后爪缩爪退缩潜伏期的热量刺激。继CCI的，机械的退出门槛，以及受伤的爪子热退缩潜伏期均明显减少，比基线测量和未受伤的爪子（ 图3）。周围神经损伤与疼痛过敏测试相结合的CCI模型提供了一个模型系统调查的潜在治疗药物的有效性，修改慢性神经性疼痛。在我们的实验室中，我们利用热和机械灵敏度的后爪一起CCI调查的发病机制的神经免疫相互作用的作用治疗神经性疼痛。

Protocol

1。慢性坐骨神经

无菌技术应该用于外科手术。外科工作表面用70％乙醇消毒和灭菌准备提前无菌文书（例如，罚款的剪刀，镊子，拉钩），纱布，订书钉和棉签。对于多次手术，清洁，并用70％乙醇或干大鼠之间的珠灭菌器resterilise文书。应戴口罩，头发的帽子和无菌手套。

收缩的神经，切成约3厘米长的小件浸泡在无菌生理盐水准备铬肠缝合，以防止干燥。关闭伤口，使用市售无菌丝线。

1. 在室使用在O ₂ 5％异氟醚诱导的大鼠麻醉，然后提供2％异氟醚在O _2，通过自定义作出口罩和监测在程序的anesthetised的动物。常见的替代麻醉药吸入氟烷或腹腔钠苯巴比妥。作为N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）受体拮抗剂，氯胺酮，应避免，因为这些受体在神经性疼痛的发展的重要。
2. 刮胡子的大鼠的左后腿。然后，放置到一个热调节的加热垫的动物在37℃，适用于润滑眼药膏的眼睛。
3. 三个70％的异丙醇和碘溶液备用应用消毒剃光面积。
4. 与老鼠躺在其胸部/胸部，提升左后腿和中与的femor位置保持在90°至脊椎上使用脚胶带。
5. 请在皮肤切口平行，但低于femor 3-4毫米，并从皮肤由通过结缔组织切割的切口周围的肌肉。
6. 使用钝的剪刀，切通过臀肌浅和二头肌之间的结缔组织，股四头肌肌肉。
7. 使用拉钩扩大两肌肉....

Discussion

CCI是一种广泛使用的外周神经损伤模型慢性神经痛。它是相对简单的执行，并产生损伤后一个月至少有一个强大和稳定的疼痛过敏。继CCI的，大鼠表现出受伤的后肢（一起举行的脚趾和足底弯曲，脚掌外翻），以及反复晃动，守卫和受伤的暗示在场的自发痛⁹后肢舔的姿势异常。除了 ​​感觉障碍，一些调查显示，CCI的唤起行为障碍，如扰乱社会互动，睡眠障碍，抑郁和焦虑样行为^10-13，但是这是在未能找到这样的行为障碍由他人^14,15。因此，CCI是常用调查的病理生理，和潜在的治疗药物，用于治疗神经性疼痛。

我们DESCR国际教育局单方面收缩左侧坐骨神经，但应注意到，许多实验者右侧坐骨神经CCI类似的疼痛和行为结果，。一些研究者可能会发现它更容易执行在一个特定的方面，由于霸道的手术，在实验中切换，而其他方面排除任何偏见。值得注意的是，已包括使用周围神经^16,17只有2结扎，缝合材料铬，如纯肠道和^{polyglactin（vicryl）18,19}在大鼠肠道以外的原程序的几个变化。 CCI模型，此外，也.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
试剂/设备名称	公司	目录编号	评论
艳色肠道	爱惜康	的G-211	4-0厚度
异氟醚	delvet Pty有限公司，七山，新南威尔士州	N / A
mersilk	爱惜康	的W-580	5-0厚度
autoclip	碧迪	427631	9毫米的不锈钢
riodine	猎户座	R1000802F	1％W / V碘
足底热镇痛仪	乌戈·巴西莱	37370
动态跖触觉的	乌戈·巴西尔é	37400