6.10: 正确使用高压釜

1. 穿戴适当的个人防护设备 (PPE)

在灭菌期间遇到的高压和温度操作条件会造成潜在的热烧伤或爆炸风险。适当的 PPE 包括实验室大衣、安全眼镜、耐热手套和闭趾鞋;在从高压釜装卸物料时, 必须佩戴这些材料。当处理液体样品时, 戴上围裙和面罩作为额外的 PPE.

2. 准备要加载的材料

1. 识别高压釜相容材料和高压釜不相容材料
   虽然灭菌代表了一种用于净化的常用和经济方法, 但并非所有材料适用于灭菌由于高压和温度的工作条件。一般而言, 所有在 high-pressurized 蒸汽下蒸发或融化的材料都不符合灭菌。这些材料包括有机溶剂、耐热性较差的塑料, 如聚苯乙烯、聚乙烯和不含不锈钢的金属。切勿高压易燃、易腐蚀、有毒、无反应或放射性化学品。适合灭菌的材料包括 Pyrex 或 I 型硼硅酸盐玻璃、聚丙烯、聚碳酸酯、手套、不锈钢、吸管贴士、纸 (放在高压釜袋内) 和介质解决方案.
2. 包装材料
   在确定了与高压釜相容的材料后, 适当的包装也很重要, 因为它确保安全和高效的灭菌。以下是包装材料的基本原理:
   1. 总是使用由聚丙烯或不锈钢制成的二次容器.
   2. 对于液体样品, 请将瓶子装满并 #189; 完全松开瓶盖或使用通风关闭。永远不要填满满2/3 的容器, 盖子完全拧紧.
   3. 检查玻璃容器以确保没有裂缝。如果发现裂缝, 在适当的容器中处理玻璃器皿。 从不 高压釜一种已知的破碎玻璃容器.
   4. 始终使用高压釜兼容袋来包装废料。袋子应该有指示胶带对此, 并且在装货之前应该在末端打开, 以便允许蒸汽在袋子之内.
   5. 切勿将袋子或容器超载, 以允许足够的蒸汽流进行完全灭菌。在项目之间留出空间.
   6. 不 #39; 不要混合不兼容的材料.
   7. 切勿在垃圾袋中放置锋利的物品.

3。加载材料

1. 检查高压釜和 #39 的内部, 以确保前一个用户没有潜在的危险.
2. 在加载物料之前清洗排水管, 以便进行良好的循环.
3. 确保袋子不要碰到高压釜的内壁, 以免熔化.
4. 液体和干物料需要不同的循环, 需要分别进行蒸压.
5. 牢固地关闭门.

4。高压釜操作

1. 只有训练有素的人员才应允许操作高压釜。如果需要, 请参阅设备手册, 因为不同的高压灭菌器之间的操作协议有所不同.
2. 确保高压釜门牢固关闭后, 将灭菌温度设置为121和 #176; C 并保持至少 15 psi 的压力.
3. 要设置高压釜的时间和周期, 需要考虑以下因素:
   1. 制造商和 #39 手册中的设备建议.
   2. 内装物料的类型: 干燥或液体.
   3. 加载的材料数量.
   4. 所用容器的形状和大小.
   5. 容器和材料的导热性.
   6. 净化的目的.

5。卸载蒸压材料 (s)

1. 按照上面的说明穿戴适当的 PPE.
2. 确保高压釜的温度和压力恢复到安全范围.
3. 站在门后, 小心地打开门, 将蒸压釜内的任何残余蒸汽放进房间.
4. 允许高压釜内的材料站立10分钟, 释放被困在材料内的任何蒸汽或热气.
5. 将液体材料从高压釜中取出时不要摇动。如有必要, 请将材料标签为热的, 以避免对可能不知道材料最近被蒸压的个人造成热灼伤.
6. 在实验室内或实验室外运输之前, 请等待物料冷却至室温。在这两种情况下, 一定要使用适当的容器来运输.
7. 记录用户和 #39 的日志中的材料和灭菌条件的详细信息.

高压灭菌是实验室中最常用的去污方法之一。

许多科学家，尤其是那些处理生物样品的科学家，需要消毒的设备和介质，而高压灭菌器提供了一种快速且经济的材料净化方法。它们使用高温高压下的蒸汽来杀死微生物。但是，由于这些极端条件，必须谨慎使用它们。

该视频将说明高压灭菌器的工作原理以及如何正确使用它们。

在高压釜中，材料在至少 15 p.s.i 的压力下用蒸汽加热到 121 摄氏度的温度。至少 30 分钟后，这些情况会使细胞脱水并杀死细胞。

高压灭菌器可以对液体和固体材料进行灭菌，但必须考虑不同的作设置。液体需要比固体更长的时间来排出蒸汽，以防止闪蒸。此外，大量液体材料需要更长的时间才能加热到正确的温度。

并非所有材料都能承受高压釜内的温度。因此，切勿对任何会熔化、燃烧、易爆或会蒸发的液体进行高压灭菌。此外，不要高压灭菌有毒或放射性化学品。

现在，我们将向您展示如何为高压蒸汽灭菌器制备样品以及如何作高压蒸汽灭菌器。

首先，选择您将进行高压灭菌的材料，并且仅使用兼容的容器和仪器。耐热玻璃、硼硅酸盐玻璃、不锈钢、聚丙烯和聚碳酸酯可用于高压灭菌。

其他常见的实验室材料，如移液器吸头和盒子，也兼容。纸张可以在兼容高压灭菌器的袋子中高压灭菌。

固体废物也可以用合适的袋子进行高压灭菌。在这个袋子里留出空间，让蒸汽循环并系住两端。最后，在高压灭菌之前，确保在袋子上开一个小口，让蒸汽进入。

对于水性介质和其他兼容的液体样品，请使用没有任何裂纹的完整容器。将容器装满大约一半，不要超过三分之二。

要从液体容器中排出气体，请松开盖子。如果没有盖子，请用铝箔松散地盖住，以防止高压灭菌材料受到污染。

将所有材料放入聚丙烯或不锈钢制成的辅助容器中。将要高压灭菌的固体和液体材料分开。在材料之间留出空间，不要将容器装得太满。

最后，在所有材料上贴上一条高压灭菌胶带。该胶带具有温度敏感指示器，如果达到足够的温度，该指示器将变为黑色。

使用高压灭菌器时，请佩戴适当的个人防护设备，以防止高温和高压风险。这包括标准的 PPE 安全眼镜、实验室外套、露趾鞋和耐热手套。处理液体样品时，请使用围裙和面罩。

在高压灭菌器上，首先打开门并检查内部是否有任何危险。分别加载液体和干燥材料，因为它们需要不同的高压灭菌循环。

为防止熔化，请确保材料不要接触墙壁。通过在材料之间保持足够的间距来确保良好的热量流动。最后，关上并密封门。

不同的高压蒸汽灭菌器有不同的作说明。可以通过手动设置温度和时间或从预设列表中进行选择来设置循环。通常，请使用针对您要净化的材料类型的推荐循环。

固体和液体以及不同数量的材料和废液存在多种循环。当您运行循环时，请确保温度至少达到 121 摄氏度，压力至少为 15 p.s.i.

循环结束后，确保压力已恢复为零，并且高压灭菌器已冷却。小心地打开门，让剩余的蒸汽排出。然后，让材料静置 10 分钟以释放任何热气体。高压灭菌胶带现在应该有黑色条纹或上面写着高压灭菌，尽管这并不能保证已经进行了灭菌。

穿戴适当的个人防护装备，去除材料，确保不要摇晃任何液体样品。在日志中记下您的使用情况，包括物质类型和遇到的任何特殊情况。最后，将材料运输到安全区域或层流罩中冷却。

您刚刚观看了 JoVE 对高压灭菌器的介绍。您现在应该了解哪些材料可以高压灭菌、如何制备它们以及如何安全地使用仪器。感谢观看！