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DOI: 10.3791/2376-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
在精细动作协调的赤字可以平衡木测试与评估。在横梁上的表现是量化,由梁走过的速度和在横梁上滑动鼠标的次数。
该程序的总体目标是评估小鼠的运动协调和平衡。第一步是将平衡木与运动检测器的位置组装在一起,以记录光束交叉的延迟,以开始训练放置在平衡木起点上的运动者,并允许他们穿越到安全的平台。有时需要鼓励动物沿着光束向终点前进。
在 10 分钟的试验间隔后,maer 然后在较窄的光束上进行训练,以实现更高的灵敏度。该程序的最后一步是在不同宽度的光束上测试受过训练的动物。最终,可以获得显示运动协调和平衡缺陷的结果。
大家好,我是 Tim Luong,是加州理工学院生物系的医学博士候选人。我是 Holly Carlisle,是加州理工学院生物系的博士后,今天我们将向您展示如何使用平衡木测试评估小鼠的平衡和运动协调性。现在,与转子杆等其他方法相比,该技术的主要优点是平衡木测试往往对电机协调中的细微缺陷更加敏感。
这种方法可以帮助回答行为领域的关键问题,例如我们的运动协调和平衡是否在某些神经系统疾病模型中受到影响,以及我们的运动缺陷是否通过特定治疗得到缓解。该测试的目的是测量鼠标在不停止或停滞且没有调查员提示的情况下穿过光束所需的时间。为了在考试当天保持良好的运行状态,我们会在考试前训练两天。
这种方法的视觉演示很有帮助,因为对于那些不太熟悉行为测试的人来说,小鼠在光束上的处理和辅助方式可能很困难。那么让我们开始吧。该协议基于 Southwell 等人和 Carter 等人的协议。
该装置的组装方法是将一根 1 米长的光束放在两根 50 厘米高的杆子之间。横梁具有 6 或 12 毫米宽的平坦表面。较大宽度的光束可用于较大的小鼠和无法穿过较窄尺寸的小鼠。
在光束的末端放置一个黑匣子,并在黑匣子内放置嵌套材料,以鼓励鼠标向终点前进,用灯照亮起点,作为厌恶的刺激。运动探测器放置在 0 厘米和 80 厘米处,以记录光束穿越的延迟,在光束下方和桌面上方约 7.5 厘米处拉伸尼龙吊床,以缓冲任何跌落。该程序中使用的小鼠以 12 小时的明暗周期饲养,并在测试前适应两周。
在实验开始前大约 10 分钟将动物引入测试室,并在每个测试条件下使用至少 10 只小鼠的队列以获得最佳结果。要开始训练,请将鼠标放在 12 毫米宽光束的起始位置。当鼠标的鼻子进入中心 80 厘米时,计时器开始计时,当动物到达 80 厘米的终点时停止。
小鼠应以最少的停止或停滞来穿过光束。如果动物停止向前移动,请从后面轻轻刺激它们,鼓励它们继续。一旦动物成功穿过光束,将其从保险箱中取出,并将其放回家笼中 10 分钟,然后再开始下一次训练。
平衡木和盒子用 70% 乙醇清洁和擦拭,然后再引入下一只鼠标。每只小鼠在 12 毫米宽的光束上训练 3 次,然后在 6 毫米宽的光束上训练。随着动物对任务和设备更加熟悉,额外训练 3 次可能会增加失速的发生率。
另一方面,如果小鼠在训练两天后未能成功穿越整个光束,则可能需要额外的训练。在动物接受任何治疗之前,请务必记录基线测量值。当天的训练完成后,将小鼠放回它们的家笼中,进入饲养设施。
在测试当天,如前所述,在实验开始前 10 分钟将动物带入房间,将鼠标放在开始位置并记录动物穿过光束中心 80 厘米的延迟。数据报告为两次成功试验的平均值,其中小鼠直接越过终点,没有停止,也没有研究者的刺激。视频记录可用于更精细地分析滑倒和其他可观察到的运动缺陷。
在这个例子中,9 到 11 周龄的 C 57 black 6 小鼠在 12 毫米和 6 毫米宽的光束上进行了测试。穿过 12 毫米宽光束的平均男性时间为 4.6 正负 0.4 秒,女性为 3.3 正负 0.3 秒,在六根光束上,男性为 6.8 正负 0.7 秒,5.9 正负 0.5 秒。对于女性。
平衡木的性能可能因小鼠的年龄和应变而异。本例中使用的 C 57 黑色六只小鼠通常是活跃的动物,有一些滑倒,但没有观察到这些小鼠和遗传或药理学纵的动物的跌倒,滑倒和跌倒可能会变得更加频繁并且可以量化。受损的小鼠可能会依附在横梁的一侧,这会增加它们在尝试此过程时穿越的时间。
如果老鼠在横梁上停滞或分心,坚持不懈地刺激它们向前移动是很重要的。看完这个视频后,你应该对如何训练老鼠越过平衡木并评估它们的平衡和协调性有一个很好的了解。感谢您的观看,希望您觉得这有帮助。
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