非等离子体键合PDMS用于低成本微流控器件的制备

常规进行光刻和软光刻的实验室通常配备一种称为等离子清洗仪的设备。等离子清洗仪内部含有一个电感线圈，可产生部分电离的气体，其中包含电子、离子、中性原子和分子。等离子体可在玻璃和器件表面产生活性物质，当两者接触时，即可形成永久性键合。

等离子体还可使装置表面具有亲水性，从而有利于液体的添加。然而在某些情况下，永久性不可逆结合并不理想。此外，许多实验室无法获得等离子清洗仪。

为了解决这一问题，今天将演示神经元器件与盖玻片之间通过可逆的非等离子体键合方法进行连接。PDMS 与玻璃之间的静电作用力形成一种防水密封的键合，适用于细胞培养。接下来，让我向大家介绍 Kiana Lee，她将为大家进行今天的演示。

使用水浴超声清洗康宁编号1的24毫米×40毫米盖玻片。将盖玻片放入不锈钢架中，然后将支架置于装有去离子水的玻璃容器内，再将该玻璃容器放入水浴超声仪中。

将玻片放入超声仪中处理30分钟。超声结束后，将玻璃容器中的去离子水倒出，加入70%乙醇浸泡玻片，随后将容器移入标准生物安全柜中，以保持玻片无菌状态。

用70%乙醇冲洗后，将不锈钢架从玻璃容器中取出，并将玻璃载玻片置于其上，静置数小时或过夜使其完全干燥。接下来，在生物安全柜内，通过将玻璃载玻片浸入盛有PLL溶液的容器中，使其表面包被PLL。玻璃载玻片需在PLL溶液中浸泡至少三小时或过夜。

PLL 包被后，从培养皿中移除 PLL 液体，然后用去离子水彻底冲洗玻片。将 PLL 包被的玻片用水多次冲洗后，向培养皿中加满水，使玻片在水中浸泡数小时。在去离子水中浸泡数小时后，用抽吸法将培养皿中的水吸除。

将快速冲洗玻片，然后将玻片从培养皿中取出，放入不锈钢架中，并在生物安全柜中过夜晾干。在生物安全柜中，将神经元装置放入柜内，并用70%乙醇彻底冲洗以进行消毒。随后吸除装置上多余的乙醇，并将装置留在生物安全柜中过夜干燥，次日使用。

将这种无菌神经元装置直接放置在洁净、无菌且经多聚赖氨酸（PLL）处理的玻璃表面。聚二甲基硅氧烷（PDMS）会与玻璃形成可逆的密封腔室，具有良好的液体密封性。通过轻轻按压使装置与玻璃结合后，可立即向装置内加入细胞或培养基。

在装置组装完成后等待过长时间再添加培养基或细胞，可能会使液体更难进入装置。需要注意的是，未经等离子体处理的装置中液体进入速度明显慢于经过等离子体处理的装置。经过等离子体处理的装置在处理后初始阶段具有亲水性，液体可迅速流入该亲水性装置；而未经等离子体处理的装置中液体流动则缓慢得多。

在某些情况下，可能需要使用移液器将液体强制注入装置中。在本视频中，我们向您展示了如何将神经元装置与盖玻片进行非等离子体键合。这是一种可逆地将PDMS与玻璃表面键合的高效且经济的方法。

希望您觉得本视频内容翔实且富有帮助。以上就是 John 实验室的全部内容。感谢观看。