אפיון המצב המטבולי ב אנושיות פרימטים עם מבחן העמסת סוכר תוך ורידי

המטרה הכוללת של בדיקת סבילות לגלוקוז תוך ורידית זו, או IVGTT, היא לאפיין את התקדמות המחלה המטבולית בקופי מקוק, ממצב בריא למצב היפרגליקמי דיסמטבולי. ניתן להשתמש בשיטה זו כדי לקבוע קבוצות של נבדקים המרובדים לפי מצבם המטבולי לצורך חקירה תזונתית או פרמקולוגית של היעילות הטיפולית של טיפולים בתנגודת לאינסולין בסוכרת. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא שהיא קלה לביצוע ביחס לטכניקות אחרות שגוזלות זמן רב ויקרות יותר.

14 עד 18 שעות לפני תחילת ההליך, הוציאו את המזון מכלוב המקוק כדי למנוע גיוון בערכים הגליקמיים לאחר הארוחה. למחרת בבוקר, שקלו את החיה המורדמת. לאחר מכן הניחו את הפרימט במצב שכיבה לרוחב על שולחן נוהל מחומם.

כל 15 עד 20 דקות, השתמש באוקסימטר דופק כדי למדוד את קצב הלב ואת ריווי החמצן הנימי ההיקפי. השתמש בשעון עצר כדי למדוד את קצב הנשימה, ובמדחום כדי למדוד את הטמפרטורה בפי הטבעת. ודא שהקרום הרירי סביב החניכיים והשפתיים לח וורוד בכל בדיקת פרמטרים במרפאה.

לאחר אישור הבריאות הבסיסית של בעל החיים, השתמש בקוצץ כדי לקצץ את השיער מהאזורים שבהם יוכנסו הצנתרים, ולאחר מכן עיקור של שני האזורים עם קרצוף לסירוגין של כלורהקסידין ו-70% אלכוהול. כאשר האתרים מוכנים, הכנס את הקטטר הראשון והצמד את הפיתוי לשטיפה של הפרין-מלח עם תא עצירה תלת-כיווני. זהו אתר הדגימה של לקיחת הדם.

הדביקו את תא העצירה כדי להדק אותו לרגל. מיקום הקטטר הוא קריטי לסבלנות וללקיחת דם סדרתית מדויקת. לכן, חשוב לשקול אזור מדיאלי ופרוקסימלי יותר של הווריד הספנוס כדי לאבטח ולתפעל בקלות את מערכת הנעילה של השטיפה ההפרינית.

לאחר מכן, הנח את הקטטר השני, והצמד פתח לעירוי הדקסטרוז, ואחריו מתן שטיפה של מיליליטר אחד של מי מלח הפריניים כדי לשמור על פטנט הצינורית עד לעירוי הדקסטרוז. הדביקו את היציאה לזרוע כדי לאבטח אותה. כאשר שני הצנתרים נמצאים במקומם, קבל דגימה בסיסית והשתמש בגלוקומטר כף יד כדי למדוד את רמת הגלוקוז בדם בצום.

אבטח דגימת סרום לניתוח הכימיה הסטנדרטי, כמו גם דגימת דם מלאה לספירת תאי דם מלאה כדי להעריך את הבריאות הכללית של בעל החיים. הפוך את כל דגימת הדם. לאחר כל לקיחת דם, ערבבו את הדגימות בצינורות EDTA עם מעכבי הפרוטאז.

לאחר השגת דגימות הבסיס, יש להחדיר את מינון הדקסטרוז של 50% במשך 30 שניות דרך יציאת העירוי של דקסטרוז. לאחר מכן, יש לשטוף עם חמישה מיליליטר של מי מלח הפריניזציה, כך שלא יישאר דקסטרוז בנמל. בתום העירוי, החלף כפפות, מכיוון ששאריות דקסטרוז מהעירוי עלולות לזהם את דגימות הדם הבאות.

נקודת הזמן הראשונה לאחר העירוי היא בכל פעם שלוש דקות מסוף עירוי הדקסטרוז, ואחריה דגימות ב-T חמש, שבע, 10, 15 ו-20 דקות, כאשר הדגימה האחרונה מתקבלת ב-T 30 דקות. צנטריפוגה את הדגימות לניתוח גלוקוז ואינסולין תוך 10 דקות מרגע האיסוף, ולאחר מכן מכניסים את הפלזמה לקריוביאליים להקפאה ואחסון בטמפרטורה שלילית של 80 מעלות צלזיוס, עד לניתוח במורד הזרם של הדגימות. ב-T שלוש דגימהampהגרלה, השתמש בגלוקומטר כף היד כדי לבדוק את רמת הגלוקוז בדם לאישור עירוי הדקסטרוז.

לאחר איסוף הדגימה האחרונה, הסר את הצינוריות, הפעל לחץ על האתרים המצנתרים להמוסטזיס, ועקוב אחר החיה עד להתאוששות מלאה. כאן מוצגות עקומות גלוקוז ואינסולין טיפוסיות מקוק סינומולגוס בוגרים, בריאים וסוכרתיים במהלך IVGTT של 30 דקות. ערכי הגלוקוז הבסיסיים בצום של קופי מקוק בריאים יכולים להיות נמוכים עד 50 עד 60 מיליגרם לדציליטר, עם עלייה ראשונית בגלוקוז בפלזמה שנצפתה בנקודת הזמן T של שלוש דקות.

זה נמוך באופן דרמטי מהעלייה הטיפוסית בגלוקוז בפלזמה שמציגים בעלי חיים סוכרתיים. במהלך ההליך, רמות הגלוקוז של בעלי חיים בריאים חוזרות לעתים קרובות לערכי הבסיס שלהן, בעוד שרמות בעלי חיים דיסמטבוליים וסוכרתיים לא. עקומת האינסולין הנלווית לבעל חיים בריא מציגה שני פסגות, המקבילות לירידה מהירה ראשונית בגלוקוז בדם המתווכת בחלק גדול מהרגיל על ידי ההשפעות ההיקפיות של אינסולין על הובלת הגלוקוז וספיגתו.

עוצמת ההשפעות ההיקפיות הללו, אפילו בשלב הראשון של תגובת האינסולין, אינה משתווה לתרומת הכבד להורדת הגלוקוז, אשר במהלך שיא האינסולין השני הקטן אך המתמשך יותר, יש לה את ההשפעה הגדולה ביותר על הרמות הגליקמיות באמצעות דיכוי ייצור הגלוקוז האנדוגני. ברגע שבעל חיים הפך לסוכרתי מדי, ייצור האינסולין בתגובה לבולוס דקסטרוז יורד באופן דרמטי. הרמות הגליקמיות יישארו גבוהות במהלך ההליך.

בדומה לגלוקוז, הפינוי מתרחש כעת כמעט לחלוטין על ידי מנגנונים שאינם תלויים באינסולין. לאחר הליך זה, ניתן לבצע שיטות אחרות כמו עירוי גלוקוז מדורג, או מהדק היפר-אינסולינמי אוגליקמי כדי לענות על שאלות נוספות לגבי רגישות לאינסולין. אל תשכח שעבודה עם מחטים החשופות לדם מקוק עלולה להיות מסוכנת ביותר, בשל פוטנציאל החשיפה לנגיף הרפס B.

יש להקפיד תמיד על אמצעי זהירות, כגון לבישת ציוד המגן האישי המתאים, והקפדה יתרה בעת טיפול בחפצים חדים בעת ביצוע הליך זה.