Dieser Film und das Protokoll sollen helfen, das Lernen Kerntransfer.
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In diesem Artikel
Zusammenfassung
Zusammenfassung
Nuclear Transfer in eine unbefruchtete Eizelle kann Entwicklungspotenzial zu einer differenzierten Zelle wiederherzustellen. Dies zeigt, dass die zugrunde liegenden Prozesse Entwicklung, Differenzierung und Alterung epigenetische anstatt genetische Prozesse sind. Die Reversibilität dieser Prozesse eröffnet spannende Perspektiven in Grundlagenforschung und in der ferneren Zukunft, in der regenerativen Medizin. In der Maus können embryonale Stammzellen aus geklonten Embryonen Präimplantationsstadium abgeleitet werden. Solche embryonalen Stammzellen haben die Fähigkeit, sich zu allen Zelltypen des erwachsenen Organismus zu geben. Wichtig ist, dass diese Zellen genetisch identisch mit dem Spender. Wenn für Menschen, würde dies ermöglichen die Gewinnung von Stammzellen aus einem Patienten. Diese Zellen könnten dann in das betroffene Zelltyp des Patienten differenziert werden und studiert in vitro oder verwendet werden, um die beschädigte oder fehlende Zellen zu ersetzen. Das Studium der Kerntransfer bei der Maus bleibt wichtig, da sie uns über die Prinzipien der nuklearen Umprogrammierung informieren können. Dieser Film und die begleitenden Protokoll sollen helfen Lernen Kerntransfer bei der Maus, eine Methode, zunächst in der Arbeitsgruppe von Prof. Yanagimachi (Wakayama et al. 1998) entwickelt.
Protokoll
Vorbereitungen:
- Eine detaillierte Beschreibung der Superovulation und microdrop Embryokultur kann an anderer Stelle 2 zu entnehmen.
- Bereiten Sie eine Petrischale mit Mikrotropfen der Embryo Kulturmedium (zB KSOM, Chemicon). Deckel mit Mineralöl (Erdöl Chargen sollten für die Kompatibilität mit Embryokultur getestet werden). Äquilibrieren bei 37 ° C in Luft plus 5% CO 2. (In Thermo-Electron 3110 Wassermantel Inkubator oder gleichwertig)
- Bereiten Sie eine Schüssel für die Isolierung von Oozyten: Place Tropfen Hepes gepuffert CZB & Hyaluronidase (0,1% w / v, Sigma)....
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Diskussion
Viel Glück!
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Offenlegungen
Die Autoren haben keine Offenlegungen vorzunehmen.
Danksagungen
DE möchte Dr. ausblenden Akutsu für die gemeinsame Nutzung seiner NT Tricks und Dr. Stephen Sullivan und Garrett Birkhoff für die kritische Durchsicht des Protokolls zu danken.
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Materialien
Bitte überprüfen Sie die zusätzliche Puffer Kompositionen in das Protokoll teil.
Referenzen
- Eggan, K., Jaenisch, R. Mammalian and Avian Transgenesis- New Approaches. Pease, S., Lois, C. , Springer. (2006).
- Nagy, A., Gertsenstein, M., Vintersten, K., Behringer, R. Manipulating the mouse embryo. Press, C. S. H. L. , (2003).
- Wakayama, T., Perry, A. C., Zuccotti, M., Johnson, K. R., Yanagimachi, R.
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Nachdrucke und Genehmigungen
