Method Article

Mess-replikative Lebensspanne in der Hefe

DOI:

10.3791/1209

⸱

June 25th, 2009

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1Department of Biochemistry, University of Washington, 2Department of Pathology, University of Washington

In This Article

Summary

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In diesem Artikel präsentieren wir ein allgemeines Protokoll zur Messung der replikativen Lebensspanne von Hefe Mutter-Zellen.

Abstract

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Altern ist ein degenerativer Prozess durch eine progressive Verschlechterung der zellulären Bestandteile und Organellen aufgrund der Mortalität gekennzeichnet. Die Bierhefe

Protocol

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Teil 1: Bereiten Stämme und Platten für replikativen Lebensspanne Analyse

Dieser Abschnitt beschreibt die Herstellung der festen YEPD Platten für den Einsatz in der replikativen Lebensspanne Experiment und die Vorbereitung der Hefezellen für Lebensdauer-Analyse.

  1. Mit geeigneten sterilen Technik vorzubereiten YEPD Agarplatten (1% Hefeextrakt, 2% Bacto-Pepton, 2% Agar, 2% Glucose), die für die Kultivierung Hefezellen und für replikativen Lebensspanne Analyse verwendet werden. Sie sollten mindestens 2 Platten für alle 4-5 Stämme in der Lebensspanne Experiment analysiert werden vorbereitet. Die Platten sollten bereit sein mindestens 2 Tage vor der Leben....

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Acknowledgements

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Diese Arbeit wurde durch einen Zuschuss zu MK und BKK von der Ellison Medical Foundation unterstützt. MK ist eine Ellison Medical Foundation New Scholar in Aging. Wir möchten Soumya Kotireddy für die Unterstützung danken, während der Dreharbeiten.

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Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Agar-ReagenzFisher ScientificDF0145-17-0 (214530)
Bacto-Pepton-ReagenzFisher ScientificDF0118-17-0 (211677)
Hefeextrakt-ReagenzFisher ScientificDF0886-17-0 (288620)
Glukose

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Kaeberlein, M., Burtner, C. R., Kennedy, B. K. Recent developments in yeast aging. PLoS Genet. 3, (2007).
  2. Kaeberlein, M. Handbook of models for human aging. Conn, P. M. , Elsevier Press. Boston. 109-120 (2006).
  3. Smith, E. D.

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Replicative Life SpanBudding YeastYeast Mother CellsMicromanipulator TechniqueVirgin Daughter CellsLifespan Data SheetYeast Strain PreparationAgar Plate IncubationCell Division TrackingSurvival Curve Analysis

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