Dieser Artikel beschreibt ein Verfahren zur Induktion der orthotopen Biolumineszenz Lebertumore bei Mäusen, und die anschließende Analyse des Tumorwachstums beschränkt sich auf die Leber mit Live-Ganzkörper-Lumineszenz-Imaging.
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In diesem Artikel
Zusammenfassung
Zusammenfassung
Dieses Video beschreibt die Einrichtung von Lebermetastasen in einem Mausmodell, die anschließend durch Biolumineszenz Imaging analysiert werden können. Tumorzellen sind speziell auf die Leber, um eine lokalisierte Lebertumor induzieren, über die Mobilisierung der Milz und eine Aufspaltung in zwei, intakt gelassen den Gefäßstiel für jede Hälfte der Milz. Lewis Lungenkarzinom-Zellen, die konstitutiv das Luciferase-Gen (luc1) sind in einem Hemi-Milz, die dann reseziert wird 10 Minuten später geimpft. Die anderen Hemi-Milz ist intakt gelassen und kehrte auf den Bauch. Liver Tumorwachstum kann durch Biolumineszenz-Bildgebung mit dem IVIS Ganzkörperbildgebungssysteme System überwacht werden. Quantitative Bildgebung des Tumorwachstums mit IVIS bietet eine präzise Quantifizierung der vitalen Tumorzellen. Tumor Zelltod und Nekrose durch medikamentöse Behandlung ist eine frühzeitige durch eine Reduktion der Biolumineszenz-Signal angezeigt. Dieses Mausmodell ermöglicht die Untersuchung der zugrunde liegenden Mechanismen metastasierten Tumor-Zell-Überleben und Wachstum und kann für die Evaluierung von Therapeutika von Lebermetastasen eingesetzt werden.
Protokoll
Einführung
Die Leber ist oft der erste Ort der Metastasen und kann der einzige Ort der Ausbreitung in nicht weniger als 30 40% der Patienten mit fortgeschrittener Erkrankung sein. Allerdings Optionen zur Behandlung von metastasierenden Tumoren der Leber sind nur wenige mit einer Minderheit der Patienten für Resektion und nur 23% größeren Responder Chemotherapeutika. Präklinische Forschung in diesem Bereich durch das Fehlen eines geeigneten Mausmodell zu isolieren Lebererkrankung Studie beschränkt. Wir beschreiben eine Split-Milz-Ansatz, mit dem zuverlässig einheitliche, diffuse Lebermetastasen werden kann. Resektion von dieser Hälfte der Mi....
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Diskussion
Die Entwicklung von In-vivo-Modelle für die Untersuchung von Lebermetastasen wird immer steigt mit dem Aufkommen von neuen therapeutischen Strategien wichtig. Für die genaue Untersuchung von neuen Strategien, Tiermodelle sollte relativ einfach durchzuführen, bilden eine bedeutende Anzahl von Metastasen, beinhalten alle Schritte der metastatischen Kaskade und ein Reporter-System, das Erfassen und Zählen von einer begrenzten Anzahl von metastatischen Zellen ermöglicht. Die Split-Milz-Ansatz wie beschrieben über e.......
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Offenlegungen
Keine Interessenskonflikte erklärt.
Danksagungen
Diese Arbeit wurde durch die Cork South Infirmary Victoria University Hospital Breast Fonds, die Irish Cancer Society (CRI07TAN) und Cork Krebsforschungszentrum finanziert. Lewis Lungenkrebs-Zelllinie stabil exprimieren Luciferase war eine Art Geschenk von Dr. Karin Jooss, Cell Genesys, Inc., San Francisco, USA.
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Materialien
| Name | Unternehmen | Katalognummer | Kommentare |
|---|---|---|---|
| DMEM | Sigma-Aldrich | D6429 | |
| PBS | Sigma-Aldrich | D8537 | |
| Ketamin | Vétoquinol | ||
| Xylazin | Vétoquinol | ||
| Carprofen | Vétoquinol | ||
| Videne | Ecolab | ||
| Vicryl 4-0 Nahtmaterial | Ethicon Inc. | ||
| PDS 4-0 Nahtmaterial | Ethicon Inc. | ||
| Prolene 4-0 Nahtmaterial | Ethicon Inc. | ||
| Firefly-Luciferin | Biosynth International, Inc |
Referenzen
- Kasuya, H. Mouse models of subcutaneous spleen reservoir for multiple portal venous injections to treat liver malignancies. Cancer Res. 65, 3823-3827 (2005).
- Liu, Q. Z., Tuo, C. W., Wang, B., Wu, B. Q., Zhang, Y. H.
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Nachdrucke und Genehmigungen
