Method Article

Chronische Verengung des Ischiasnerv und Schmerzen Überempfindlichkeit Testing in Ratten

DOI:

10.3791/3393

March 13th, 2012

In This Article

Summary

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Aufgrund der Einfachheit des chirurgischen Eingriffs und der robusten Verhaltensauffälligkeiten, ist eine chronische Verengung der Ischiasnerv eines der herausragenden Tiermodellen des neuropathischen Schmerzes. Innerhalb von 24 Stunden nach der Operation wird Schmerzen Überempfindlichkeit gegründet und kann quantitativ gemessen werden mit Hilfe eines von Frey Aesthesiometer (mechanische Prüfung) und plantar Analgesie Meter (Thermal-Test).

Abstract

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Chronischen neuropathischen Schmerzen, die sich aus Schäden des zentralen oder peripheren Nervensystems, ist eine weit verbreitete und schwächenden Krankheit, die 18.7% der Bevölkerung 1,2. Die Symptome umfassen spontane (Kribbeln, Brennen, Elektroschock-wie-) Schmerzen, Gefühlsstörungen, Parästhesien, Allodynie (Schmerzen infolge von normalerweise nicht-schmerzhafte Reize) und Hyperalgesie (erhöhte Reaktion auf schmerzhafte Reize). Die sensorischen Symptome sind komorbiden Verhaltensstörungen mit Behinderungen, wie Schlaflosigkeit und Depressionen. Um chronischen neuropathischen Schmerzen untersuchen mehreren Tiermodellen imitiert peripheren Nervenverletzungen entwickelt worden sind, ist eine der am weitesten verbreitete Bennett und Xie (1988) einseitige Ischiasnerv chronischen Verengung Verletzungen (CCI) 3 (Abbildung 1). Hier präsentieren wir ein Verfahren zur Durchführung und Prüfung CCI Schmerzen Überempfindlichkeit.

CCI wird unter Narkose durchgeführt, mit dem Ischiasnerv auf der einen Seite, indem sie als ausgesetztkin Einschnitt, und Durchtrennen des Bindegewebes zwischen den gluteus superficialis und M. biceps femoris. Vier Chromsäure Darm Ligaturen sind locker um den Ischiasnerv bei 1 mm Abständen gebunden, um nur verschließen, aber nicht verhaften epineurale Blutfluss. Die Wunde wird mit Nähten in der Muskel-und Heftklammern in der Haut geschlossen. Das Tier wird dann erlaubt, sich von der Operation für 24 Stunden erholen, bevor Schmerzen Überempfindlichkeit Test beginnt.

Für Verhaltenstests werden Ratten in das Gerät gestellt und Tests dürfen, um das Testverfahren zu gewöhnen. Das Gebiet getestet ist die Mitte der Fußsohle der Hinterpfote (Abbildung 2), die innerhalb der Ischiasnerv Verteilung fällt. Mechanische Rücknahmeschwelle wird durch mechanisch stimuliert beide verletzten und unverletzten Hinterpfoten mit Hilfe eines elektronischen dynamische plantare von Frey Aesthesiometer oder manuell von Frey Haaren 4 bewertet. Die mechanische Rücknahmeschwelle ist der maximale Druck ausgeübt(In Gramm) löst das Zurückziehen der Pfote. Für die Messung der thermischen Wegziehlatenz, zuerst von Hargreaves et al (1988) beschrieben, wird die Hinterpfote zu einem Strahl von Strahlungswärme durch eine transparente Glasoberfläche unter Verwendung einer plantaren Analgesie m 5,6 ausgesetzt. Der Rückzug auf die Latenz Hitzereiz wird als die Zeit für Zurückziehen der Pfote in beiden verletzten und unverletzten Hinterpfoten aufgezeichnet. Nach CCI, mechanische Rücknahmeschwelle, sowie thermische Wegziehlatenz im verletzten Pfote sind beide deutlich reduziert, im Vergleich zum Baseline-Messungen und der unverletzten Pfote (Abbildung 3). Die CCI-Modell von peripheren Nervenverletzungen mit Schmerzen Überempfindlichkeit Tests kombiniert wird, liefert ein Modellsystem, um die Wirksamkeit potenzieller Therapeutika untersuchen zu chronischen neuropathischen Schmerzen zu modifizieren. In unserem Labor setzen wir neben CCI thermische und mechanische Empfindlichkeit der Hinterpfoten, die Rolle der neuro-immunologische Interaktionen in der Pathogenese zu untersuchenund Behandlung von neuropathischen Schmerzen.

Protocol

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1. Ischiasnerv chronische Verengung

Aseptische Techniken sollten für den chirurgischen Eingriff verwendet werden. Desinfizieren Sie die chirurgische Arbeitsfläche mit 70% Ethanol und bereiten im Voraus sterilen Instrumenten (z. B. feine Scheren, Pinzetten und Haken), Gaze, Klammern und Abstrichen durch Autoklavieren. Bei mehreren Operationen, zu reinigen und erneut sterilisieren Instrumente mit 70% Ethanol oder einem trockenen Kügelchen Sterilisator zwischen Ratten. Eine chirurgische Maske, Haar Motorhaube und sterile Handschuhe getragen werden sollten.

Für Einengung des Nervs, bereiten Sie die Chromsäure Darmna....

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Discussion

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CCI ist ein weit verbreitetes peripheren Nervenverletzungen Modell der chronischen neuropathischen Schmerzen. Es ist relativ einfach durchzuführen, und produziert robuste und stabile Schmerzen Überempfindlichkeit für mindestens einen Monat nach der Verletzung. Nach CCI, Ratten zeigen abnorme Haltung des verletzten Hinterpfote (Zehen zusammen und hielt plantar-flektierten und Pfote umgestülpt), sowie mehrmaliges Schütteln, Bewachung und Lecken der verletzten Hinterpfote auf das Vorliegen von spontanen Schmerz 9.

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Disclosures

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Tierversuche wurden von der Animal Care und Ethikkommission der Universität von New South Wales, Australien genehmigt und Richtlinien der Internationalen Gesellschaft zum Studium des Schmerzes ausgestellt.

Acknowledgements

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Die Autoren möchten, um die ursprüngliche Beschreibung des CCI-Modell von Bennett und Xie (1988) zu bestätigen.

Diese Arbeit wurde teilweise durch Zuschüsse aus dem National Health and Medical Research Council of Australia (ID # 568637) und dem NSW Amt für Wissenschaft und medizinische Forschung zu GMT unterstützt.

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Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Name des Reagenz / Ausrüstung Firma Katalog-Nummer Kommentare
Chromic Darm Ethicon G-211 4-0 Dicke
Isofluran Delvet Pty Ltd, Seven Hills, NSW n / a
Mersilk Ethicon W-580 5-0 Dicke
Autoclip Becton Dickinson 427631 9 mm Edelstahl
Riodine Orion R1000802F 1% w / v Iod
Thermische plantare Analgesie Instrument Ugo Basile 37370
Dynamische plantare Aesthesiometer Ugo Basile 37400

References

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  1. Bouhassira, D., Lanteri-Minet, M., Attal, N., Laurent, B., Touboul, C. Prevalence of chronic pain with neuropathic characteristics in the general population. Pain. 136, 380-387 (2008).
  2. Toth, C., Lander, J., Wiebe, S. The prevalence and impact of ....

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Sciatic Nerve InjuryChronic Constriction InjuryPain Hypersensitivity TestingMechanical Withdrawal ThresholdThermal Withdrawal LatencyVon Frey HairsPlantar Analgesia MeterChromic Gut LigaturesHind Paw StimulationNeuropathic Pain Model

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