Immunhistochemische Färbung von B7-H1 (PD-L1) auf Paraffin-embedded Slides der Pankreaskarzinom Tissue

Elaine Bigelow; Katherine M. Bever; Haiying Xu; Allison Yager; Annie Wu; Janis Taube; Lieping Chen; Elizabeth M. Jaffee; Robert A. Anders; Lei Zheng

doi:10.3791/4059

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Methodenartikel

Immunhistochemische Färbung von B7-H1 (PD-L1) auf Paraffin-embedded Slides der Pankreaskarzinom Tissue

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DOI:

10.3791/4059

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3. Januar 2013

Elaine Bigelow¹^,² , Katherine M. Bever¹^,² , Haiying Xu¹^,²^,³ , Allison Yager¹ , Annie Wu¹^,²^,⁴ , Janis Taube³^,⁵ , Lieping Chen⁶ , Elizabeth M. Jaffee¹^,²^,⁵^,⁷^,⁸ , Robert A. Anders¹^,²^,⁵^,⁸ , Lei Zheng¹^,²^,⁴^,⁵^,⁷

¹The Sidney Kimmel Comprehensive Cancer Center, The Johns Hopkins University School of Medicine, ²Department of Oncology, The Johns Hopkins University School of Medicine, ³Department of Dermatology, The Johns Hopkins University School of Medicine, ⁴Department of Surgery, Johns Hopkins University School of Medicine, ⁵The Sol Goldman Pancreatic Cancer Center, The Johns Hopkins University School of Medicine, ⁶Yale Cancer Center, Yale School of Medicine, ⁷The Skip Viragh Center for Pancreatic Cancer, The Johns Hopkins University School of Medicine, ⁸Department of Pathology, The Johns Hopkins University School of Medicine

In diesem Artikel

Zusammenfassung

B7-H1 (PD-L1) und seine Bindung an PD-1 einen großen tumorinduzierte immunsuppressiven Signal in Mikroumgebung des Tumors. Eine immunhistochemische Färbetechnik, die Expression und Lokalisation von B7-H1 in Pankreaskarzinom zu charakterisieren ist hier beschrieben.

Zusammenfassung

B7-H1/PD-L1, ein Mitglied der B7-Familie von immunregulatorische Zelloberflächenproteinen, spielt eine wichtige Rolle bei der negativen Regulation von zellvermittelten Immunantworten durch seine Wechselwirkung mit seinem Rezeptor, programmierten Zelltod-1 (PD -1) ^1,2. Überexpression von B7-H1 durch Tumorzellen wurde in einer Reihe von menschlichen Krebsarten, einschließlich Melanom, Glioblastom und Karzinomen der Lunge, Brust, Dickdarm, Eierstock und Nierenzellen bemerkt worden, und wurde gezeigt, dass anti-Tumor-T beeinträchtigen Zell-Immunität ^3-8.

Vor kurzem hat B7-H1 Expression von Pankreaskarzinom Geweben als potentieller prognostischer Marker ^9,10 identifiziert worden. Zusätzlich hat Blockade von B7-H1 in einem Mausmodell von Bauchspeicheldrüsenkrebs gezeigt worden, um eine Anti-Tumor-Antwort ^{11 zu} erzeugen. Diese Daten legen nahe, wie wichtig B7-H1 als ein potenzielles therapeutisches Ziel. Anti-B7-H1-Blockade Antikörper sind daher in klinischen Studien für die mul geprüfttiple humanen soliden Tumoren wie Melanomen und Karzinomen der Lunge, Dickdarm, Niere, Magen und Bauchspeicheldrüse ^12.

Um schließlich in der Lage sein, um die Patienten, die von B7-H1 Targeting-Therapien profitieren zu identifizieren, ist es wichtig, den Zusammenhang zwischen Expression und Lokalisation von B7-H1 und Ansprechen des Patienten auf die Behandlung mit B7-H1-Blockade Antikörper zu untersuchen. Untersuchen der Expression von B7-H1 in menschlichen Pankreaskarzinom Gewebe durch Immunhistochemie wird ein besseres Verständnis, wie diese mit-inhibitorische Signalmolekül trägt zur Unterdrückung der Antitumor-Immunität in Mikroumgebung des Tumors. Die Anti-B7-H1-Antikörper (Klon 5H1) von Chen und Mitarbeitern entwickelt wurde gezeigt, zuverlässig Färbeergebnisse in Kryoschnitten mehrerer Arten von menschlichen neoplastischen Geweben ^4,8 zu produzieren, aber auf Anfärben Paraffin eingebetteten Folien war eine Herausforderung, bis kürzlich ^13-18. Wir haben developed die B7-H1 Färbeprotokoll für Paraffin eingebettete Folien Pankreaskarzinom Gewebe. Die B7-H1 Färbeprotokoll hier beschriebenen konsistente membranöse und zytoplasmatische Färbung von B7-H1 mit wenig Hintergrund.