Einrichtung einer chirurgisch-induzierten Modell bei Mäusen, die Rolle der Schutz Progranulin in Osteoarthritis Untersuchen

Zusammenfassung

Wir beschreiben ein Protokoll für die Destabilisierung des medialen Meniskus (DMM)-Modell bei Mäusen, ein wirksames Instrument für Osteoarthritis (OA) Forschung. Darüber hinaus haben wir diesen Mangel an progranulincan übertreiben OA Entwicklung und Progression von mit diesem Modell gezeigt, das anzeigt, dass progranulin spielt eine schützende Rolle in der Pathogenese der OA.

Zusammenfassung

Destabilisierung des medialen Meniskus (DMM) Modell ist ein wichtiges Werkzeug für die Untersuchung der pathophysiologischen Rollen von zahlreichen Arthritis assoziierten Molekülen in der Pathogenese von Osteoarthritis (OA) in vivo. Allerdings ist die detaillierte, vor allem die visualisiert Protokoll für die Einrichtung dieses kompliziertes Modell bei Mäusen, ist nicht verfügbar. Dabei nutzten wir die Wildtyp-und progranulin (PGRN) - / - Mäuse als Beispiele ein Protokoll zur Induktion DMM Modell bei Mäusen, und verglichen das Auftreten von OA folgende Einrichtung dieser chirurgisch induzierten Modell einzuführen. Die an Mäusen durchgeführten Operationen waren entweder Schein-Operation, die gerade geöffnet Gelenkkapsel oder DMM-Operation, die die menisco-Schienbeinbandes geschnitten und verursachte Destabilisierung des medialen Meniskus. Schwere Arthrose wurde mit histologischen Test (z. B. Safranin-O-Färbung), Ausdrücke der OA-assoziierten Gene, Abbau von Knorpel extrazellulären Matrix-Moleküle und Osteophyten Form ausgewertetation. Mäuse, und der Verlust der PGNR Wachstumsfaktor führte zu einer schweren OA Phänotyp in dieser chirurgisch induzierten Modell - DMM Vorgang erfolgreich OA Initiierung und Progression sowohl in Wildtyp-und PGRN-/ induziert.

Einleitung

Osteoarthritis (OA), auch als degenerative Arthritis bekannt ist, betrifft 15% der Weltbevölkerung und mehr als 46 Millionen Menschen in den Vereinigten Staaten und wird von Synovitis, Knorpeldegeneration und Osteophytenbildung ¹ gekennzeichnet. Es kann ein Ergebnis eines komplexen Zusammenspiels von genetischen, metabolischen, biomechanischen und biochemischen Faktoren. Die zugrunde liegenden Mechanismen der OA auch weiterhin die wissenschaftliche Gemeinschaft zu entziehen. Derzeit gibt es zahlreiche Tiermodelle, die die Pathogenese der OA ^2,3 nachahmen kann. Es ist wichtig zu Tiermodellen bei Mäusen, weil sowohl die Verfügbarkeit von verschied....

Protokoll

Alle chirurgischen Verfahren in Bezug auf die Tiere sollten durch lokale Institution Tierpflege-und Ethik-Kommission, mit einer Anstrengung, um Schmerzen und Beschwerden durch die Operation zu minimieren genehmigt werden.

1. Vorbereitung

1. Wählen 8-12 Wochen alten männlichen C57BL / 6 Mäusen mit einem Körpergewicht von ca. 25 g für eine Operation.
2. Betäuben die Tiere durch intraperitoneale Injektion eines Cocktails, die sowohl Xylazin (5 mg / kg) und Ketamin (40 mg / kg).
3. Rasieren Sie die Knie mit Rasierer, dann chirurgisch drapieren das Tier sterilisieren und die Operationsstelle mit Betadine und Alkohol (3x) ....

Ergebnisse

DMM Modell wurde erfolgreich an Mäusen etabliert und Mangel an PGRN übertrieben chirurgisch-induzierten OA Entwicklung.

Mäuse - Sham und DMM-Operationen (Abbildung 1) wurden in WT-und PGRN / durchgeführt. 8 Wochen nach der Operation wurden die Mäuse getötet, und Safranin-O-Färbung wurde in den Kniegelenken von Abschnitten durchgeführt wird, gefolgt von einer statistischen Analyse der Arthritis-Score auf Basis der Histologie. Wie in 2A gezeig.......

Diskussion

Es wird berichtet, dass der Stamm von Mäusen ist sehr wichtig für DMM Modell Induktion, als verschiedene Stämme von Mäusen haben unterschiedliche Schwere der OA nach DMM, mit höchstem Niveau in der 129/SvEv Stamm, gefolgt von C57BL6, 129/SvInJ und dann FVB / n ^26. Mäuse, die wir in der vorliegenden Studie eingesetzt, die relativ anfällig für DMM sind - Ein großer Teil der Transgene in C57BL/6-Mäuse, wie PGRN-/ etabliert. Wenn das Transgen auf Stamm unempfindlich wie FVB / N-Mäusen basiert, ist es jedoch notwe.......

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien

Name	Unternehmen	Katalognummer	Kommentare
Nr. 10 Chirurgische Klingen	Feder	25-2976#10
6-0 Naht	Applied Dental	WG-N53133