Das Ziel dieses Protokolls ist es, die dynamische kontrastverstärkte Magnetresonanztomographie (DCE-MRT) für orthotope Xenotransplantate von Pankreastumoren bei Mäusen anzuwenden. Die DCE-MRT ist eine nicht-invasive Methode zur Analyse der Mikrogefäße in einem Zielgewebe und nützlich zur Beurteilung der Gefäßreaktion in einem Tumor nach einer neuartigen Therapie.
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Methodenartikel
Dynamic Contrast Verbesserte Spintomographie von einem orthotopen Mausmodell Bauchspeicheldrüsenkrebs
In diesem Artikel
Zusammenfassung
Zusammenfassung
Die dynamische kontrastverstärkte Magnetresonanztomographie (DCE-MRT) wurde aufgrund eines schweren Atembewegungsartefakts im Bauchbereich nur begrenzt für orthotope Pankreastumor-Xenotransplantate verwendet. Orthotope Tumormodelle bieten Vorteile gegenüber subkutanen, da diese die primäre Tumormikroumgebung widerspiegeln können, die die Blutversorgung, die Neovaskularisation und die Tumorzellinvasion beeinflusst. Wir haben kürzlich ein Protokoll für die DCE-MRT von orthotopen Xenotransplantaten von Pankreastumoren in Mausmodellen etabliert, indem wir Tumore mit einer orthogonal gebogenen Kunststoffplatte gesichert haben, um eine Bewegungsübertragung aus der Brustregion während der Bildgebung zu verhindern. Der Druck durch dieses Brett war auf den Bauchbereich begrenzt und führte nicht zu Atembeschwerden bei den Tieren. Dieser Artikel zeigt das detaillierte Vorgehen der orthotopen Pankreastumormodellierung mit Hilfe von Kleintieren und DCE-MRT der Tumor-Xenotransplantate. Es wird auch die Quantifizierungsmethode der pharmakokinetischen Parameter in der DCE-MRT vorgestellt. Das in diesem Artikel beschriebene Verfahren wird den Forschern helfen, die DCE-MRT für orthotope gastrointestinale Krebs-Mausmodelle anzuwenden.
Einleitung
Das übergeordnete Ziel dieser Methode ist es, dynamische kontrastverstärkten Magnetresonanztomographie (DCE-MRI) für orthotopen Pankreastumor-Xenografts bei Mäusen anzuwenden. DCE-MRI ist eine nicht-invasive Methode zur Mikrovaskulatur in einem Zielgewebe durch Überwachung der Änderung des MR Kontrast über einen bestimmten Zeitraum nach der Injektion beurteilt. DCE-MRI wurde verwendet, um bösartige Tumore zu diagnostizieren und Tumor-Antwort auf verschiedene Therapien 1-4 zu beurteilen. Quantitative DCE-MRI hat hohe Reproduzierbarkeit 5 vorgestellt. Pharmakokinetischen Parameter eines MR-Kontrastmittels in ein Zielgewebe quantifizieren, müssen a....
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Protokoll
Alle Verfahren wurden von der Institutional Animal Care und Verwenden Committee an der Universität von Alabama in Birmingham angenommen.
1. orthotopen Pankreastumormausling
- Kultur Standard menschlichen Pankreas-Krebszelllinien in Dulbeccos modifiziertem Eagle-Medium (DMEM) mit 10% fötalem Rinderserum. Behalten Sie alle Kulturen bei 37 ° C in feuchter Atmosphäre mit 5% CO 2.
- Verwenden Sie 8-10 Wochen alte weibliche schwere kombinierte immundefizienten Mäusen. Platzieren Tierkäfigen bei 12 Stunden Licht und 12 Stunden Dunkelheit-Zyklus bei RT (21 ± 2 ° C) und 60% Luftfeuchtigkeit.
- Anesthetize alle T....
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Ergebnisse
Menschliche Pankreastumorzellen erfolgreich wachsen in Mauspankreas Schaffung eines soliden Tumors. 1 zeigt Fotografien von (a) einem normalen Pankreas wo Tumorzelllösung eingespritzt wird, und (B) ein Vertreter der Maus trägt eine orthotope Pankreas Tumorxenotransplantates (MIA PaCa-2 ). Tumor im linken oberen Quadranten des Abdomens, neben der Milz. Es dauert normalerweise 2-4 Wochen, die Tumoren zu 5 aufwachsen - 7 mm Durchmesser nach Zellimplantation.
Bewegung orthotopen.......
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Diskussion
Wir haben die detaillierten Methoden der orthotopen Pankreastumor Modellierung mit immundefizienten Mäusen, DCE-MRI von Bauch Tumoren in Mäusen, und die Quantifizierung ihrer kinetischen Parameter eingeführt. Im orthotopen Pankreastumor-Modellierung, müssen Sie beim Einsetzen einer Nadel in den Schwanz der Bauchspeicheldrüse entnommen werden. Wenn dies gelingt, werden Zellen auf den Kopf der Bauchspeicheldrüse Schaffung einer kleinen Blase übertragen werden. Bei der Anwendung eines orthogonal gebogenen Kunststoffplatte,.......
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Offenlegungen
Die Autoren haben keine Interessenkonflikte anzugeben.
Danksagungen
Autoren danken Jeffrey Sellers für die Unterstützung bei der Modellierung von orthotopen Bauchspeicheldrüsenkrebs-Mäusen. Diese Arbeit wurde durch die Forschungsinitiative Pilot Awards der Abteilung für Radiologie der UAB und die NIH-Zuschüsse 2P30CA013148 und P50CA101955 unterstützt.
....Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.
Materialien
| Name | Unternehmen | Katalognummer | Kommentare |
|---|---|---|---|
| DMEM | Invitrogen | 11965-118 | |
| Fötales Rinderserum | Harlan Laboratories | BT-9501 | |
| Betadine | Purdue Produkte | 67618-153-01 | |
| 5-0 Prolene Nähte | Ethicon | 8720H | |
| 9.4T MRT Scanner | Bruker Biospin Corporation | BioSpec 94/20 USR | |
| Gadoteridol | Bracco Diagnostics Inc | NDC 0270-1111-03 | |
| Mikro-Polyethylen-Röhrchen | Strategic Applications, Inc | #PE-10-25 | |
| 30 G Nadel mit stumpfer Spitze | Strategic Applications, Inc | 89134-194 | |
| Überwachungs- und Gating-System | SA instruments, Inc | Modell 1030 | Dies ist ein MR-kompatibles System zur gleichzeitigen Messung der Wertschätzung und der Körpertemperatur von Kleintieren. |
| Spritzenpumpe | New Era Pump Systems, Inc. | NE-1600 |
Referenzen
- Ergul, N., et al. Assessment of multifocality and axillary nodal involvement in early-stage breast cancer patients using 18F-FDG PET/CT compared to contrast-enhanced and diffusion-weighted magnetic resonance imaging and sentinel node biopsy. Acta Radiol. , (2014).
- Park, J. J., et al.
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Nachdrucke und Genehmigungen
