Montage von adulten Drosophila-Gehirnen: Eine Methode zur Vorbereitung von Objektträgern für die konfokale Bildgebung

0 Aufrufe • 2:57 Min. • April 30th, 2023

- Kleben Sie auf einen positiv geladenen Objektträger zwei Deckgläser mit genügend Abstand zueinander, um Platz für die Montage der Drosophila-Gehirne zu schaffen. Pipettieren Sie unter dem Stereomikroskop die Gehirne in Eindeckmedium in diesen Raum. Die negative Ladung des Gewebes hilft dem Gehirn, an der positiven Ladung auf der Oberfläche des Objektträgers zu haften.

Entfernen Sie überschüssiges Eindeckmedium, um eine präzise Positionierung des Gehirns auf dem Objektträger in einem Gittermuster mit den Antennenlappen nach oben zu ermöglichen, und überbrücken Sie dann die beiden Deckgläser, indem Sie ein drittes Deckglas quer kleben, um das Gehirn abzudecken.

Um den Hohlraum zu füllen, geben Sie das Eindeckmittel tropfenweise in den Rand des Hohlraums und lassen Sie es durch Kapillarbewegung ausbreiten, so dass es das Gehirn nicht stört.

Versiegeln Sie den Hohlraum mit Nagellack und lagern Sie ihn bei minus 20 Grad Celsius im Dunkeln, um die Fluoreszenz von verschmutztem Gewebe zu erhalten.

Im Beispielprotokoll werden wir Drosophila-Gehirne für die konfokale Bildgebung von immungefärbten Neuronen mounten.

- Um das Gehirn zu besteigen, baue eine Brückenrutsche. Positionieren Sie z

Sehen Sie sich das vollständige Transkript an und erhalten Sie Zugang zu Tausenden wissenschaftlicher Videos

Anmelden

Weitere Videos entdecken

Montage des Drosophila-Gehirns