Orthotope homotransplantierte Tumortransplantation: Eine Technik zur Generierung von Mausmodellen für Pankreastumoren

- Bei der orthotopen homotransplantierten Tumortransplantation werden Tumorzellen oder Tumorfragmente eines krebsartigen Spenders in einen Empfänger derselben Spezies an einem Organ oder einer Stelle transplantiert, die dem Tumorhistotyp entspricht. Beginnen Sie mit der Entnahme einer anästhesierten Spendermaus, die einen Tumor trägt und Zellen pankreatischen Ursprungs enthält. Sterilisieren Sie den Bereich und entnehmen Sie den Tumor chirurgisch. Waschen Sie das Taschentuch, um das Blut zu entfernen, und hacken Sie es in Fragmente. Platzieren Sie anschließend eine betäubte Empfängermaus in einer rechten Seitenlage und sterilisieren Sie ihren Bauchbereich. Legen Sie die Milz chirurgisch frei.

Ziehen Sie dann vorsichtig einen Teil der Bauchspeicheldrüse unterhalb der Milz heraus. Platzieren Sie das Tumorfragment auf der Bauchspeicheldrüse und nähen Sie es zusammen. Schließen Sie den Bauch und lassen Sie die Maus in einem Käfig wieder auffrischen. Überwachen Sie die Empfängermaus täglich, um das Wachstum des orthotopen Pankreastumors zu beobachten. Im folgenden Protokoll zeigen wir die orthotope Transplantation eines duktalen Adenokarzinom-Homotransplantats der Bauchspeicheldrüse von einer C57 Black 6 Spendermaus in die Bauchspeicheldrüse einer C57 Black 6 Empfängermaus.

- Überwachen Sie das Körpergewicht von C57 black 6 Mäusen mit einer Waage. Überwachen Sie auch das Tumorvolumen von tumortragenden Spendermäusen durch Messschiebermessung. Nach der Euthanasie des Tieres in einer Haube mit biologischer Gefährdung gemäß Protokoll wird die Haut um den Tumor herum mit Jodophortupfern sterilisiert. Nach der chirurgischen Entfernung des Tumors, wie im Textprotokoll beschrieben, legen Sie den Tumor in eine Petrischale mit 20 Millilitern PBS, die auf vier Grad Celsius vorgekühlt wurde. Wenn kontaminierendes Blut vorhanden ist, übertragen Sie den Tumor in eine andere Petrischale und waschen Sie den Tumor mit PBS.

Schneiden Sie den Tumor in zwei Hälften. Entfernen Sie überschüssige Haut, Gefäße, Verkalkungen und/oder Nekrosen. Wählen Sie nur intakte Tumorstücke aus und geben Sie sie in ein steriles 50-Milliliter-Zentrifugenröhrchen. Fügen Sie 20 Milliliter PBS hinzu, bevor Sie das Röhrchen für pharmakologische Studien in einen separaten Tierraum transportieren. Zur Vorbereitung der orthotopen Implantation fixieren Sie die vollnarkostisierte Maus auf einer Experimentiertafel in der richtigen seitlichen Position. Desinfizieren Sie die Haut um die Milz mit Jod und entjoden Sie anschließend mit 75%igem Ethylalkohol.

Finde den mittleren Punkt der Milz und mache einen einen Zentimeter langen vertikalen Schnitt am Bauch, um die Milz freizulegen. Ziehen Sie vorsichtig einen Teil des Pankreasgewebes unter der Milz mit einer flachen Pinzette heraus und nähen Sie ein Maus-Homotransplantat-Tumorstück aus der Samenmaus mit einer resorbierbaren chirurgischen Naht 9-0 auf die Bauchspeicheldrüse der Empfängermaus. Verschließen Sie den Bauch mit einer 6-0 Seidennaht durch eine Doppelnaht. Erreichen Sie Homöostase durch Kompression.

Halten Sie die Tiere nach Beendigung der Tumorimplantation in einem warmen Käfig, solange keine Blutungen oder Tumorgewebeleckagen auftreten. Überwachen Sie das Tier, bis es wieder genügend Bewusstsein erlangt hat, um das Brustbein aufrecht zu erhalten. Bringen Sie das Tier nach vollständiger Genesung aus der Narkose in den Tierraum zurück. Überwachen Sie die tumortragenden Mäuse, indem Sie den Bauch in der Nähe der Milz abtasten und die Mäuse mit orthotopen Tumoren auswählen.

• Orthotopic Homograft Transplantation - Procedure of transplanting tumor cells from a donor to a same species recipient at a corresponding organ.
• Pancreatic Cancer Homograft Models - Scientific models used for studying pancreatic cancer by transplanting tumor homografts.
• Orthotopic - Refers to the transplantation of cells or tissues into their natural site of occurrence in the body.
• Tumor Homograft Models - Research models involving the transplantation of tumor tissues between same-species subjects.
• Mouse Cancer Models - Laboratory mice bred or genetically engineered for use in cancer research.

• Introduce Orthotopic Homograft Transplantation – This procedure involves transplanting tumor cells from a donor to a same species recipient (e.g., mouse tumor).
• Key Concepts – Pancreatic Cancer Homograft Models allow us to study pancreas cancer progression (e.g., tumor mouse models).
• Underlying Mechanisms – Transplantation is done at matching organ site for accurate reflection of cancer progression.
• Connect to Experiment – The procedure mentioned is used to establish a mouse model for studying pancreatic cancer progress.

• Practical Applications – Allows for accurate representation of cancer progression enhancing research (e.g., tumor mouse model).
• Industry Impact – Impact on medical and biotechnological sectors (e.g., healthcare).
• Societal Importance – Enhances understanding of cancer which could lead to better treatments (e.g., health).
• Link to Scientific Advancements – Establishes a platform for scientific research and innovations in cancer treatment.