Generierung organotypischer Vollhautrekonstruktionen: Ein Verfahren zur Erstellung eines 3D-Hautmodells anhand menschlicher Hautproben

Die Haut besteht hauptsächlich aus einer oberen Epidermisschicht und einer unteren Hautschicht. Die Epidermiszellen sind in mehrere Schichten geschichtet, die von den am wenigsten differenzierten Zellen an der Basis bis zu den hochdifferenzierten Zellen an der Peripherie reichen. Um ein Hautgewebe zu züchten, das die morphologischen und biochemischen Aspekte normaler Haut nachahmt, können wir ein organotypisches Hautmodell erstellen.

Nehmen Sie zunächst eine Multi-Well-Platte mit membranösem Einsatz. Fügen Sie dem Einsatz mit Kollagen gemischte dermale Fibroblasten hinzu. Inkubieren, um die Verfestigung der Kollagenmatrix zu erleichtern, die Fibroblasten einzubetten und das Hautkompartiment der Haut nachzuahmen.

Geben Sie anschließend eine Keratinozyten-Zellsuspension über die Hautschicht. Inkubieren Sie die Platte, damit die Keratinozyten am Hautkompartiment haften können. Ergänzen Sie die Kultur mit einem Epidermalisierungsmedium, um die Keratinozytenproliferation und die Bildung einer Epidermisschicht zu initiieren.

Übertragen Sie abschließend die Einsätze auf eine frische Multi-Well-Platte. Fügen Sie ein Schichtungsmedium hinzu, so dass es nur die Basis des Konstrukts bedeckt,