Beurteilung der Motor Balance und Koordination in Mäuse mit dem Schwebebalken

Defizite in der Feinmotorik können mit dem Schwebebalken Test festgestellt werden. Leistung auf dem Balken wird durch die Geschwindigkeit, mit der der Strahl durchquert und die Anzahl, wie oft die Maus gleitet auf dem Balken quantifiziert.

Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens ist es, die motorische Koordination und das Gleichgewicht bei Mäusen zu beurteilen. Der erste Schritt besteht darin, einen Schwebebalken mit der Position des Bewegungsmelders zusammenzubauen, um die Latenz des Balkenkreuzens aufzuzeichnen, um mit dem Training des Maer zu beginnen, der auf dem Startpunkt des Schwebebalkens platziert und zu einer sicheren Plattform gebracht wird. Manchmal ist es notwendig, das Tier entlang des Balkens in Richtung Endpunkt zu treiben.

Nach einem Intervall von 10 Minuten zwischen den Versuchen trainierte maer dann mit einem schmaleren Strahl, um eine höhere Empfindlichkeit zu ermöglichen. Der letzte Schritt des Verfahrens besteht darin, die trainierten Tiere an unterschiedlich breiten Balken zu testen. Letztlich lassen sich Ergebnisse erzielen, die Defizite in der motorischen Koordination und im Gleichgewicht aufzeigen.

Hallo, ich bin Tim Luong und ich bin MD-Doktorand in der Abteilung für Biologie am California Institute of Technology. Ich bin Holly Carlisle und ich bin Postdoc am California Institute of Technology in der Abteilung für Biologie, und heute zeigen wir Ihnen, wie Sie das Gleichgewicht und die motorische Koordination bei Mäusen mit dem Schwebebalkentest beurteilen können. Der Hauptvorteil dieser Technik im Vergleich zu anderen Methoden wie der Rotorstange besteht darin, dass der Schwebebalkentest tendenziell empfindlicher auf selbst subtile Defizite in der motorischen Koordination reagiert.

Diese Methode kann helfen, zentrale Fragen im Verhaltensbereich zu beantworten, z.B. ob unsere motorische Koordination und unser Gleichgewicht in bestimmten neurologischen Krankheitsmodellen beeinflusst sind und ob unsere motorischen Defizite durch bestimmte Behandlungen gelindert werden. Der Zweck dieses Tests besteht darin, die Zeit zu messen, die eine Maus benötigt, um den Strahl zu überqueren, ohne anzuhalten oder abzuwürgen und ohne Aufforderung durch den Untersucher. Um am Testtag einen sauberen Lauf zu bekommen, trainieren wir vor dem Test zwei Tage lang.

visuelle Demonstration dieser Methode ist hilfreich, da die Art und Weise, wie die Mäuse gehandhabt und über den Strahl unterstützt werden, für diejenigen, die mit Verhaltenstests weniger vertraut sind, schwierig sein kann. Also lasst uns loslegen. Dieses Protokoll basiert auf denen von Southwell, etal und Carter etal.

Die Apparatur wird zusammengebaut, indem ein ein ein Meter langer Balken zwischen zwei 50 Zentimeter hohen Stangen aufgelegt wird. Die Balken haben eine ebene Fläche von sechs bzw. 12 Millimetern Breite. Strahlen mit größerer Breite können für größere Mäuse und solche, die die schmaleren Größen nicht überqueren können, verwendet werden.

Am Ende des Strahls wird eine Blackbox platziert und Nistmaterial wird in die Blackbox gelegt, um die Maus zum Endpunkt zu ermutigen, und den Startpunkt mit einer Lampe zu beleuchten, die als aversiver Reiz dient. Bewegungsmelder werden in einem Abstand von null und 80 Zentimetern platziert, um die Latenz des Strahlüberquerens aufzuzeichnen, eine Nylon-Hängematte unter den Balken und etwa 7,5 Zentimeter über die Tischplatte zu spannen, um Stürze abzufedern. Die Mäuse, die in diesem Verfahren verwendet werden, befinden sich in einem 12-stündigen Hell-Dunkel-Zyklus und wurden vor dem Test zwei Wochen lang akklimatisiert.

Führen Sie die Tiere etwa 10 Minuten vor Beginn des Versuchs in den Testraum ein und verwenden Sie eine Kohorte von mindestens 10 Mäusen pro Testbedingung, um die besten Ergebnisse zu erzielen. Um mit dem Training zu beginnen, platzieren Sie eine Maus auf der Startposition eines 12 Millimeter breiten Strahls. Der Timer startet, wenn die Nase der Maus in die Mitte von 80 Zentimetern eintritt und stoppt, wenn das Tier das Ende der 80 Zentimeter erreicht.

Mäuse sollten den Strahl mit einem minimalen Stopp oder Strömungsabriss überqueren. Wenn sich das Tier nicht mehr vorwärts bewegt, ermutigen Sie es zum Weitermachen, indem Sie es sanft von hinten anstupsen. Sobald das Tier den Balken erfolgreich durchlaufen hat, nehmen Sie es aus dem Safe und setzen Sie es für 10 Minuten zurück in den Heimkäfig, bevor Sie mit der nächsten Trainingseinheit beginnen.

Der Schwebebalken und die Box werden gereinigt und mit 70% Ethanol abgewischt, bevor die nächste Maus eingeführt wird. Jede Maus wird dreimal auf den 12 Millimeter breiten Strahl trainiert, gefolgt von einem Training auf dem sechs Millimeter breiten Strahl. Ein zusätzliches Training um das Dreifache kann das Auftreten von Stillstand erhöhen, wenn das Tier mit der Aufgabe und dem Gerät vertrauter wird.

Gelingt es Mäusen jedoch nicht, den gesamten Strahl nach zwei Tagen Training erfolgreich zu durchlaufen, kann zusätzliches Training erforderlich sein. Achten Sie darauf, die Ausgangswerte aufzuzeichnen, bevor die Tiere behandelt werden. Nachdem das Training für den Tag abgeschlossen ist, bringen Sie die Mäuse in ihre Heimkäfige in die Haltungseinrichtung zurück.

Bringen Sie die Tiere am Tag des Tests 10 Minuten vor Beginn des Experiments in den Raum, wie zuvor gezeigt, platzieren Sie eine Maus an der Startposition und notieren Sie die Latenz, die das Tier hat, um die Mitte von 80 Zentimetern des Strahls zu durchqueren. Die Daten werden als Durchschnitt von zwei erfolgreichen Versuchen angegeben, in denen die Maus ohne Unterbrechung und ohne Drängen des Untersuchers direkt bis zum Ende überquerte. Videoaufzeichnungen können für eine feinere Analyse von Schlupf und anderen beobachtbaren motorischen Defiziten verwendet werden.

In diesem Beispiel wurden neun bis elf Wochen alte C 57 black sechs Mäuse auf 12 Millimeter und sechs Millimeter breiten Strahlen getestet. Die durchschnittliche Zeit, um den 12 Millimeter breiten Strahl zu überqueren, betrug 4,6 plus oder minus 0,4 Sekunden für Männer und 3,3 plus oder minus 0,3 Sekunden für Frauen. Die Zeit auf dem sechs Balken betrug 6,8 plus oder minus 0,7 Sekunden für Männer und 5,9 plus oder minus 0,5 Sekunden. Für Hündinnen.

Die Leistung des Schwebebalkens kann je nach Alter und Stamm der Mäuse variieren. Bei den in diesem Beispiel verwendeten C 57 schwarzen sechs Mäusen handelt es sich typischerweise um aktive Tiere, bei denen einige wenige Ausrutscher, aber bei diesen Mäusen und genetisch oder pharmakologisch manipulierten Tieren keine Stürze beobachtet wurden, können Ausrutscher und Stürze häufiger auftreten und können quantifiziert werden. Beeinträchtigte Mäuse können sich an der Seite des Strahls festhalten, was ihre Zeit zum Überqueren verlängert.

Es ist wichtig, die Mäuse hartnäckig und konsequent dazu zu bringen, sich vorwärts zu bewegen, wenn sie stehen bleiben oder auf dem Balken abgelenkt werden. Nachdem Sie sich dieses Video angesehen haben, sollten Sie ein gutes Verständnis dafür haben, wie man Mäusen beibringt, den Schwebebalken zu überqueren und ihr Gleichgewicht und ihre Koordination zu beurteilen. Vielen Dank fürs Zuschauen und ich hoffe, Sie fanden das hilfreich.