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Mikrobiologie
0 Aufrufe • 3:14 Min. • September 26th, 2025
Nehmen Sie eine Monoschicht aus pulmonalen Endothelzellen der Ratte.
Waschen Sie die Zellen mit Puffer. Fügen Sie eine Suspension von Pseudomonas aeruginosa hinzu und inkubieren Sie.
Während der Inkubation nehmen die Bakterien Kontakt mit den Zellen auf und injizieren Effektorproteine in das Zytoplasma.
Diese Effektorproteine induzieren den Abbau von Mikrotubuli und die Störung des Zytoskeletts.
Die Störung des Zytoskeletts aktiviert zelluläre Stressreaktionen, was zur Bildung von fehlgefalteten, zytotoxischen Proteinaggregaten, Amyloid-Oligomeren, führt.
Die Effektorproteine bilden auch Poren in der Zellmembran, die die Freisetzung von Amyloid-Oligomeren in den extrazellulären Raum ermöglichen.
Darüber hinaus verändert die Störung des Zytoskeletts die zelluläre Morphologie, wodurch interzelluläre Lücken in der endothelialen Monoschicht entstehen.
Beobachten Sie anschließend die Monoschicht unter einem Lichtmikroskop. Sobald die interzellulären Lücken sichtbar werden, beenden Sie die Inkubation.
Sammeln Sie dann den Überstand, der zytotoxische Amyloide enthält, und zentrifugieren Sie, um die Trümmer zu pelletieren.
Sammeln Sie den Überstand und filtern Sie ihn, um verbleibende Bakterien zu
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