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Mikrobiologie
0 Aufrufe • 2:59 Min. • August 31st, 2026
Ein in vitro gezogenes Kartoffelpflänzchen entnehmen.
Als Nächstes verwenden Sie rekombinantes Agrobacterium, einen Pflanzenpathogen, der eine Transfer-DNA (T-DNA) enthält.
Die T-DNA trägt ein vollständiges Genom des Kartoffelvirus X, das so modifiziert wurde, dass es eine nicht-kodierende RNA exprimiert, um spezifische pflanzliche Mikro-RNAs zu binden.
Infiltrieren Sie die Blätter mit den Bakterien und ritzen Sie den Stängel mit einem mit Bakterien beschichteten Zahnstocher an.
An der Inokulationsstelle schneiden die Bakterien die T-DNA aus und übertragen sie als Einzelstrang-DNA in Pflanzenzellen.
Unter Nutzung der Wirtsmaschinerie produziert die T-DNA virale genomische RNA, die sich repliziert und nichtcodierende RNAs sowie virale Proteine exprimiert.
Die nichtkodierende RNA bindet an die Ziel-pflanzlichen Mikro-RNAs und verhindert deren Bindung an die jeweiligen Ziel-mRNAs, wodurch Entwicklungsdefekte ausgelöst werden.
Unterdessen bilden die viralen genomischen RNAs Ribonukleoprotein-Komplexe, die systemisch über Plasmodesmata wandern, um die Mikro-RNA-Silenzierung in der gesamten Pflanze zu ermöglichen.
Blatabnormitäten, einschließlich ektopischer Auswüchse und trompetenförmiger Blätt
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