JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Mikrobiologie
0 Aufrufe • 3:17 Min. • August 31st, 2026
Nehmen Sie eine Übernachtkultur eines lysogenen Bakteriums, bei dem die meisten Zellen inaktive, in das Genom integrierte Phagen-DNA enthalten.
Inokulieren Sie es in frisches Medium und inkubieren Sie es.
Einige Bakterien durchlaufen eine spontane Induktion und treten in den lytischen Zyklus ein, bei dem die Phagen-DNA ausgeschnitten, repliziert und virale Proteine produziert werden.
Neu zusammengesetzte infektiöse Phagen werden durch Zelllyse freigesetzt.
Kulturproben in definierten Zeitabständen sammeln.
Um lebensfähige nicht induzierte Lysogene zu zählen, auftragen Sie serielle Verdünnungen jeder Probe auf eine Agarplatte und inkubieren Sie diese.
Zählen Sie die Kolonien, um die koloniebildenden Einheiten (CFUs) zu berechnen.
Um infektiöse Phagen zu zählen, werden die gleichen Verdünnungen auf eine Antibiotikagarplatte aufgetragen, die zuvor mit antibiotikaresistenten Indikatorwirten besiedelt wurde. Da die Lysogene antibiotikasensitiv sind, können nur resistente Wirtszellen wachsen.
Phagen infizieren und lysieren Zellen und bilden klare Plaques.
Zählen Sie die Plaques, um die Plaque-bildenden Einheiten (PFUs) zu berechnen. Niedrigere PFUs weisen auf weniger spontane Induktionsereignisse
Sehen Sie sich das vollständige Transkript an und erhalten Sie Zugang zu Tausenden wissenschaftlicher Videos