Beurteilung der mitochondrialen Funktion in zerebralen vaskulären Endothelzellen

Beginnen Sie mit zerebralen vaskulären Endothel- oder CVE-Zellen in Kulturmedien.

CVE-Zellen sind Zellen mit hohem Energiebedarf, die die Blutgefäße des Gehirns auskleiden und für die Physiologie des Gehirns unerlässlich sind.

Legen Sie die Zellen in eine extrazelluläre Flussmittel-Zellkulturplatte. Inkubieren für die Zelladhäsion.

Ersetzen Sie das Nährmedium durch extrazelluläre Flussmittel-Assay-Medien mit dem gewünschten pH-Wert.

Inkubieren Sie ohne Kohlendioxid, um den pH-Wert aufrechtzuerhalten.

Nehmen Sie als Nächstes eine extrazelluläre Flusssensorpatrone, die Sensoren und eine Bodenplatte enthält.

Geben Sie eine Kalibrierlösung auf die Platte und inkubieren Sie ohne Kohlendioxid, um die Sensoren zu hydratisieren.

Diese Sensoren können die Veränderungen der Sauerstoffkonzentration in der extrazellulären Umgebung messen, die auf die mitochondriale Aktivität hinweisen.

Laden Sie dann die Kartusche in ein Bioanalysegerät und kalibrieren Sie die Sensoren.

Ersetzen Sie die untere Platte durch die Platte, die die Zellen enthält.

Messen Sie die mitochondriale Funktion von CVE-Zellen.

Nach der entsprechenden Anzahl von Subkulturen säen Sie 1,6 x 10⁴ Zellen in 80 Mikrolitern vollstän