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Befestigen Sie eine anästhesierte Ratte mit einem rasierten Rückenrumpf in einem stereotaktischen Rahmen.
Desinfizieren Sie die rasierte Stelle und decken Sie die Ratte mit einem Tuch ab.
Machen Sie einen Schnitt und ziehen Sie die Haut und das Unterhautfettgewebe über die Brustwirbel T6 bis T10 zurück.
Trennen Sie die paravertebralen Muskeln, um die Wirbel T7 bis T9 freizulegen.
Schneiden Sie die Facettengelenke an den Wirbeln T7 und T8 beidseitig ab.
Oberflächlich das dorsale Bindegewebe zwischen den Wirbeln T8 und T9 durchtrennen.
Entfernen Sie den T8-Dornfortsatz und drehen Sie die Lamina leicht.
Schneiden Sie die Lamina auf beiden Seiten ab und legen Sie das Rückenmark frei.
Wenden Sie ein Anästhetikum an und entfernen Sie die Dura, die das Wirbelsäulensegment T8 bedeckt.
Identifizieren Sie die Mittellinie des Rückenmarks und schneiden Sie sie zur Seite hin, ohne die vordere Spinalarterie zu beschädigen.
Bei dieser Hemisektion werden die Nervenbahnen auf einer Seite gestört.
Legen Sie einen mit Kochsalzlösung getränkten saugfähigen Schwamm auf, um die Blutung zu kontrollieren.
Nähen Sie den Schnitt und lassen Sie die Ratte sich erholen.
Nachdem Sie bestätigt haben, dass bei einer anästhesierten erwachsenen Ratte keine Reaktion auf das Einklemmen der Zehen aufgetreten ist, machen Sie einen 2,5 Zentimeter langen Schnitt in der rasierten Haut über den Wirbeln T6 bis T10 und ziehen Sie mit einer stumpfen Schere die Haut und das oberflächliche Fett zurück. Verwenden Sie eine stumpfe Präparierschere und einen selbsthaltenden Retraktor, um die paravertebralen Muskeln zu trennen, indem Sie die wirbelnde Seite der Wirbel T7 bis T9 einsetzen, und verwenden Sie eine feine Pinzette und Applikatoren mit Wattespitze, um das restliche Gewebe zu entfernen und zu reinigen, um die Dornfortsätze und die Wirbellamina freizulegen.
Legen Sie die Ratte unter ein Stereomikroskop und schneiden Sie mit feinen Knochentrimmern vorsichtig beidseitig die Facetten an den Wirbeln T7 und T8. Machen Sie mit einem Skalpell einen 1 Millimeter großen oberflächlichen Schnitt in das dorsale Bindegewebe zwischen den Wirbelschichten T8 und T9, wobei Sie darauf achten, dass der darunter liegende Rückenmark nicht verletzt wird, und entfernen Sie mit Knochentrimmern den Dornfortsatz des T8-Wirbels.
Drehen Sie mit einer gebogenen hämostatischen Pinzette, die vorsichtig auf den T7-Dornfortsatz geklemmt wird, das kaudale Ende der T8-Laminae leicht rostral um etwa 20 Grad und führen Sie die Knochentrimmer unter die T8-Lamina ein. Machen Sie einen Schnitt in der Mittellinie, der sich entlang der Lamina erstreckt, und setzen Sie die Laminektomie fort, indem Sie die Schnitte auf der linken und rechten Seite der Wirbellamina, medial zu den Querfortsätzen, wiederholen, um das Rückenmark freizulegen.
Tropfen Sie 100 Mikroliter 2% Lidocain in den freiliegenden Wirbelkanal und entfernen Sie mit einer feinen Pinzette und einer Iridektomieschere die Dura, die das T8-Wirbelsäulensegment überlagert. Wiederholen Sie die Verabreichung von Lidocain an den freiliegenden Rückenmark und identifizieren Sie die Mittellinie des Rückenmarks, indem Sie eine Mittellinie visualisieren, die zwischen den Dornfortsätzen gebildet wurde, die sich zwischen dem freiliegenden Wirbel T7 bis T9 erstreckt.
Verwenden Sie einefeine Pinzette, um das Rückenmark zu stabilisieren, und verwenden Sie ein Präpariermesser, um das Rückenmark von der Mittellinie zu einer Seite des Tieres zu hemisieren, wobei Sie darauf achten, dass die vordere Spinalarterie auf der ventralen Seite nicht durchtrennt wird. Schneiden Sie mit einer Iridektomieschere vorsichtig durch das verbleibende Gewebe auf der Läsionsseite des Rückenmarks, um sicherzustellen, dass der ventrolaterale Quadrant richtig durchtrennt ist, und legen Sie einen sterilen, etwa 6 x 2 Millimeter großen, mit Kochsalzlösung getränkten hämostatischen Schwamm in die freiliegende Höhle über dem Rückenmark.
Verwenden Sie dann 4-0 Polyglactin 910-Nähte, um die Muskelschichten und die Haut um die Inzisionsstelle herum zu schließen, und setzen Sie die Ratte in einer warmen Umgebung unter eine Wärmelampe mit Überwachung, bis sie sich vollständig erholt hat.
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