Modellierung von repetitiven Kopfverletzungen im Mausmodell

Beginnen Sie damit, die Schlagspitze und die Sondenspitze an einem Schlaggerät anzubringen.

Als nächstes befestigen Sie eine betäubte Maus in einem stereotaktischen Rahmen.

Positionieren Sie die Schlagspitze zwischen der interfrontalen und der lambdoiden Naht, vertikal ausgerichtet mit einer imaginären horizontalen Linie zwischen den Ohren.

Nullen Sie die X- und Y-Kanäle auf dem stereotaktischen Bedienfeld, um eine Verschiebung des Impact-Centers beim Umschalten der Spitzen zu verhindern.

Bewegen Sie die Sondenspitze manuell in die Aufprallmitte und senken Sie sie ab, um die Aufprallstelle zu berühren. Befestigen Sie einen Kontaktsensor an der Rückseite der Maus.

Setze den Z-Kanal auf Null und positioniere dann die Schlagspitze neu, bis X und Y Null sind und Z minus vier anzeigt.

Wenden Sie den Aufprall mit einer bestimmten Geschwindigkeit an.

Messen Sie die Apnoe – die Zeit vom Aufprall bis zum ersten Atemzug der Maus – um die Schwere der Verletzung zu bestimmen.

Lassen Sie die Maus wiederherstellen.

Wiederholen Sie den Aufprall in bestimmten Intervallen. Wiederholte Stöße reißen die Blutgefäße im Gehirn auf, verursachen Mikroblutungen und lösen die Aktivierung von Astrozyten aus, wodurch eine leichte, menschenähnliche Gehirnerschütterung nachgeahmt wird.

Beginnen Sie damit, eine speziell angefertigte, mit Silikonkautschuk beschichtete Metallspitze an einem elektromagnetischen stereotaktischen Schlaggerät anzubringen. Achten Sie darauf, dass die flache Unterseite der beschichteten Spitze parallel zur Oberfläche der Sondenspitze des Schlaggeräts verläuft. Platzieren Sie als Nächstes eine betäubte Maus in Bauchlage auf einem Heizkissen und bestätigen Sie, dass sie nicht auf das Einklemmen der Zehen reagiert.

Verwenden Sie dann einen Haarschneider, um den Kopf vollständig zu rasieren, und tragen Sie Salbe auf die Augen des Tieres auf. Wenn das Tier bereit ist, stellen Sie die Geschwindigkeit des Aufprallgeräts auf dem Schaltkasten auf 4 Meter pro Sekunde und die Verweilzeit auf 240 Millisekunden ein. Legen Sie ein weiches Heizkissen unter den Körper des Tieres, um die Körpertemperatur bei 39 Grad Celsius zu halten.

Verwenden Sie dann die Ohrbügel am stumpfen Ende, um die Maus in den stereotaktischen Rahmen in Bauchlage zu montieren. Verwenden Sie den Z-Treiber, um die Aufprallspitze in der Nähe des Mauskopfes abzusenken. Bewegen Sie die x- und y-Treiber in der Mitte der Zielkoordinaten über die sagittale Naht, um die flache Schlagspitze mit einem Durchmesser von 9 Millimetern anzupassen.

Es ist darauf zu achten, dass eine Kante der Aufprallspitze vertikal parallel zu einer imaginären horizontalen Linie verläuft, die zwischen den beiden Ohren gezogen wird. Um die Schlagtiefe korrekt einzustellen, stellen Sie zunächst die x- und y-Kanäle auf dem digitalen stereotaktischen Bedienfeld auf Null, um sicherzustellen, dass sich das Schlagzentrum nach dem Umschalten der Spitzen nicht verschiebt.

Bewegen Sie dann die zusätzliche Sondenspitze an die Einschlagstelle des Mausgehirns. Stellen Sie die x- und y-Treiber manuell ein, um die Sondenspitze in die Mitte des Aufprallbereichs zu bewegen, und befestigen Sie einen Kontaktsensor am Heck. Bewegen Sie den Impaktor mit dem Z-Treiber nach unten, bis die Sondenspitze die Oberfläche der Aufprallstelle berührt, und stellen Sie den Z-Kanal auf dem stereotaktischen Bedienfeld auf Null ein.

Verwenden Sie dann die X- und Y-Treiber, um die Aufprallspitze manuell zurück in den Aufprallbereich zu bewegen, bis die X- und Y-Treiber Null sind. Bewegen Sie dann den Z-Antrieb nach unten, bis das Bedienfeld, auf dem der Z-Treiber angezeigt wird, -4,00 anzeigt. Bewegen Sie den Rückzugsschalter an der Steuerbox, um den Aktuator einzufahren.

Klicken Sie nun auf den Aufprallschalter in der Steuerbox, um einen Aufprall mit einer Verformungstiefe von 4 Millimetern auszulösen, und verwenden Sie einen Timer, um die Zeit vom Aufprall bis zum ersten Atemzug der Maus zu messen. Bringen Sie das Tier dann auf ein warmes Pad und überwachen Sie, bis es sich vollständig erholt hat.