November 3rd, 2023
Este artigo tem como objetivo fornecer aos pesquisadores um guia detalhado e acessível para a montagem de um modelo infantil suíno de choque hemorrágico.
O choque hemorrágico é a principal causa de morte em crianças no mundo desenvolvido. Este estudo oferece a oportunidade de comparar a resposta a diferentes terapias para choque hemorrágico. Trata-se de um modelo simples e altamente reprodutível que permite a ativação de mecanismos em resposta a hemorragias graves em um indivíduo imaturo.
Nesse protocolo, a translação dos resultados é alta, e com ajuda a identificar melhor a escolha de fluidos e repouso para ressuscitação em termos de menor efeito adverso. Esse modelo permite estudar o efeito de diferentes fluidos de ressuscitação e drogas vasoativas em vários sistemas, como microcirculação, coagulação, endotélio e glicocálice. Comece colocando o animal anestesiado em uma mesa cirúrgica com uma manta térmica.
Em seguida, meça a saturação periférica de oxigênio com um sensor preso à orelha do porco. Iniciar monitorização eletrocardiográfica contínua de três derivações. Insira um cateter venoso periférico na veia do ouvido, desinfetando a pele com pelo menos três rodadas alternadas de iodopovidona ou esfoliação de clorexidina e álcool antes.
Em seguida, coloque o animal na decúbito dorsal e inicie imediatamente a ventilação da máscara da bolsa com uma máscara para cães. Para iniciar o procedimento de intubação endotraqueal, certifique-se de que os equipamentos e ferramentas cirúrgicas necessários estejam esterilizados e prontos para uso. Puxe a língua levemente e mantenha a mandíbula aberta usando gaze de gravata colocada atrás dos dentes caninos superiores e inferiores.
Insira o laringoscópio. E uma vez que a epiglote esteja visível, pressione-a para cima em direção à língua usando a ponta do laringoscópio. Uma vez visualizadas as pregas vocais, avançar suavemente o tubo com ligeira rotação para dentro da traqueia.
Retire o estilete e use uma seringa de cinco mililitros para inflar o manguito. Para garantir o posicionamento adequado do tubo endotraqueal, observe a elevação simétrica do tórax, saturação adequada de oxigênio entre 95 e 100% e uma adequada forma de onda e leitura de dióxido de carbono expirada. Uma vez confirmada a intubação, iniciar a ventilação mecânica com frequência respiratória de 20 incursões respiratórias por minuto.
Volume título de oito mililitros por quilograma, fração inspirada de oxigênio de 40% e pressão expiratória final positiva de quatro centímetros de água. Ajuste a ventilação para atingir uma pressão parcial de dióxido de carbono entre 35 e 45 milímetros de mercúrio. Manter anestesia profunda durante todo o experimento por meio de infusão contínua de fentanil, propofol e atracúrio.
Para preparar a área femoral para o cateterismo do vaso, desinfete a área inguinal com pelo menos três rodadas alternadas de esfoliação com iodopovidona ou clorexidina, e álcool. Em seguida, avalie os vasos femorais com ultrassonografia e use a técnica de Doppler para distinguir entre a artéria e a veia. Sob visão ultrassonográfica contínua e pela técnica de Seldinger, insira uma agulha de cateter venoso central de 5,5 a 7,5 French em uma das veias femorais.
Em seguida, puncione a veia e obtenha o sangue. Retire a seringa e introduza o fio-guia na agulha. Quando o fio-guia estiver em seu lugar na veia, retire o fio-guia e introduza o cateter até atingir a veia.
Imediatamente após a colocação do cateter, conectar ao sistema transdutor para medir a pressão venosa central. Em seguida, certifique-se de que um eletrólito com uma taxa de infusão de glicose de 20 mililitros por hora esteja conectado a uma das portas da linha central. E, em seguida, o soro fisiológico de manutenção é infundido através do orifício restante para evitar a oclusão do cateter.
Em seguida, insira uma agulha de cateter arterial de 4 French na artéria femoral. Em seguida, insira o fio-guia sob orientação ultrassonográfica e, em seguida, insira o cateter. Uma vez inserido o cateter arterial, conecte o fio arterial do sistema monitor de débito cardíaco e o transdutor arterial diretamente ao orifício do monitor.
Ao mesmo tempo, conecte a unidade de medida venosa do monitor ao transdutor venoso central. Em seguida, desinfete a área do pescoço com pelo menos três rodadas alternadas de iodopovidona ou esfoliação de clorexidina e álcool. Faça uma incisão paratraqueal esquerda de 10 centímetros cortando uma linha entre o manúbrio e o ângulo da mandíbula.
Para expor a veia jugular externa, dissecar o tecido lateral ao músculo esternocleidomastoideo e isolar a veia da fáscia circundante. Em seguida, utilizar duas suturas de seda inabsorvíveis em loop ao redor da veia para fixar o vaso antes da punção. Incisar a veia com uma agulha de venflon de calibre 18.
Uma vez dentro da veia, retraia a agulha e insira o fio-guia através do tubo de venflon. Retire o tubo de venflon e insira a bainha com o introdutor de 5 French sobre o fio. Uma vez inserida a bainha, retire o introdutor e o fio.
Imediatamente após a inserção, enxaguar as bainhas com cloreto de sódio a 0,9% para evitar a formação de trombo. Em seguida, amarre a sutura proximal de seda ao redor da bainha para prendê-la no lugar. Em seguida, prenda a alça da bainha ao músculo esternocleidomastoideo e feche a pele com grampos.
Para a obtenção dos valores do índice cardíaco, infundir-se cinco mililitros de solução fisiológica a 0,9% através do cateter venoso central. Por fim, registre a média de duas medidas consecutivas. Uma vez alcançado um estado estacionário após a instrumentação e a coleta de dados basais, induzir choque hipovolêmico retirando 30 mililitros por quilograma de sangue da veia jugular durante 30 minutos.
Aguarde 30 minutos para estabilização e não faça nenhum esforço de ressuscitação durante esse período para emular o atraso na chegada das equipes médicas de emergência. Esse modelo mostrou que uma hemorragia controlada produziu alterações perceptíveis nos parâmetros hemodinâmicos, na perfusão cerebral e tecidual. Após a retirada do volume, taquicardia significativa e diminuição da pressão arterial média, índice cardíaco, índice de volume sistólico, parâmetros de volume sanguíneo e fluxo sanguíneo arterial carotídeo foram observados, enquanto o índice de resistência vascular sistêmica aumentou.
A infusão de albumina associada à solução salina hipertônica produziu expansão volêmica maior e mais longa do que a solução salina normal ou hipertônica isoladamente, com diferenças significativas na frequência cardíaca, índice de volume sistólico e variação do pulso pressórico. A infusão de fluidos também retratou a ausência de queda progressiva após expansão volêmica da pressão arterial e do índice de volume diastólico final global. Os parâmetros de perfusão sistêmica demonstraram aumento da concentração de lactato, enquanto a saturação venosa central, o índice de oxigenação cutânea e tecidual cerebral diminuíram.
A albumina hipertônica melhorou os parâmetros de perfusão com aumento do fluxo sanguíneo carotídeo e do índice de oxigenação do tecido cerebral e diminuição significativa dos níveis de lactato. Manter anestesia profunda durante todo o experimento para alcançar um estado estacionário antes da indução de choque, incluindo a temperatura corporal e manter um ritmo constante durante a coleta de sangue. O registro e posterior análise da microcirculação sublingual é muito interessante para estudar a diferença entre macro e microcirculação.
Por outro lado, esse exame escolar para avaliar a coagulação é útil para analisar o comprometimento induzido pela hemodiluição após expansão volêmica.
Este artigo fornece um guia detalhado para pesquisadores sobre o estabelecimento de um modelo de choque hemorrágico em porcos neonatos. Este modelo foi projetado para estudar os efeitos de vários fluidos de ressuscitação e terapias em um ambiente controlado.