Name: Trennung und differentielle Charakterisierung von mikrobiellen extrazellulären Vesikeln im Darm bei salzempfindlichen Ratten unter salzreichen Ernährungsbedingungen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-06-06T15:45:00.000+00:00
Duration: 7 min 21 s
Description: Erfahren Sie die Isolierung mikrobieller extrazellulärer Vesikel aus dem Darm salzempfindlicher Ratten unter salzreicher Ernährung. Diese Methode ermöglicht die Charakterisierung von Größe, Morphologie und Zusammensetzung für Hypertonie-Forschung.

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</ol>

<table><tbody><tr><td>Essential supplies</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Zentrifugalfilter (10nkDa 2 mL)</td><td>Millipore</td><td>UFC903096</td><td></td></tr><tr><td>Zentrifuge Tude(50 mL)</td><td>BKMAN</td><td>20220404</td><td></td></tr><tr><td>Zentrifuge Tudes</td><td>BECKMAN SCCHAR</td><td>Z30815SCA</td><td></td></tr><tr><td>Vakuumfiltrationssystem</td><td>Biosharp</td><td>24902581</td><td></td></tr><tr><td>Reagenzien</td>Chromogenes LAL-Endotoxin-Assay-Kit <td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td>Beyotime</td><td>022124240705</td><td></td></tr><tr><td>Coomassie Blue Schnellfärbelösung</td><td>Beyotime</td><td>Z972241010</td><td></td></tr><tr><td>EDTA</td><td>Damas-beta</td><td>P3117308</td><td></td></tr><tr><td>Enhanced BCA-Protein-Assay-Kit</td><td>Beyotime</td><td>A006241112</td><td></td></tr><tr><td>Ethanol</td><td>KESH</td><td></td><td></td></tr><tr><td>HCl</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>OptiPrep (60% wt/vol, Iodixanol)</td><td>Serumwerk</td><td>00124</td><td></td></tr><tr><td>PBS</td><td>Labshark</td><td>130114005</td><td></td></tr><tr><td>Phosphotungssäure</td><td>RUIXIN</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Saccharose</td><td>Damas-beta</td><td>P1917057</td><td></td></tr><tr><td>Tris (VWR)</td><td>Damas-beta</td><td>P3061764</td><td></td></tr><tr><td>Trypanblau-Färbelösung (0,4%)</td><td>Beyotime</td><td>BD07242904</td><td></td></tr><tr><td>Equipment</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Absorbance Microplate Reader</td><td>SpectraMax</td><td>ABP01690</td><td></td></tr><tr><td>Biomicroscope</td><td>Motic</td><td>BA210Digital</td><td></td></tr><tr><td>Desk Zentrifuge</td><td>Cence</td><td>CHT210R</td><td></td></tr><tr><td>Desktop Hochgeschwindigkeits-Mikrozentrifuge</td><td>DLAB</td><td>D3024</td><td></td></tr><tr><td>Aluminiumrotor mit festem Winkel + 500 mL Zentrifugalbecher</td><td>Cence</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Hochpräzise elektronische Waage</td><td>SKR</td><td>BN-200</td><td></td></tr><tr><td>Laminar-Flow-Schrank</td><td>Nantong Hunan Scientific Instrument Co., Ltd.</td><td>SW-CJ-2FDS</td><td></td></tr><tr><td>SW 32.1 Ti Schwenkschaufel turn+ SW 32.1 Ti Rotorschaufel</td><td>BECKMAN COULTER</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Transmissionselektronenmikroskop</td><td>JEOL</td><td>JEM-1400FLASH</td><td></td></tr><tr><td>Rohrrotator</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Ultrazentrifuge</td><td>BECKMAN SCCHAR</td><td>Optima XE-100</td><td></td></tr><tr><td>Reinstwassersystem</td><td>ULPHW</td><td>UPR-II-15TNZ</td><td></td></tr><tr><td>Multifunktions-Vakuumpumpe für Wasserzirkulation</td><td>Qiang Qiang</td><td>SHZ-D(III)</td><td></td></tr></tbody></table>

trennung und differentielle charakterisierung von mikrobiellen extrazellulären vesikeln im darm bei salzempfindlichen ratten unter salzreichen ernährungsbedingungen

Separation and Differential Characterization of Gut Microbial Extracellular Vesicles in Salt-Sensitive Rats under High-Salt Diet Conditions

Die EV-Konzentrationen wurden in verschiedenen Fraktionen bestimmt (Abbildung 2A). Die experimentellen Ergebnisse zeigten, dass die Konzentration der EVs in einer Reihe von Dichtegradientenlösungen ein typisches Normalverteilungsmuster aufwies (Abbildung 2B). Insbesondere in Fraktion 9 erreichte die Konzentration von EVs ihren höchsten Punkt (3,85 x 109), was darauf hindeutet, dass der Hauptverteilungsanteil von EVs 936 betrage...

Trennung und differentielle Charakterisierung von mikrobiellen extrazellulären Vesikeln im Darm bei salzempfindlichen Ratten unter salzreichen Ernährungsbedingungen

High salt intake is a major risk factor for hypertension, and its underlying mechanism may be closely linked to extracellular vesicles (EVs) secreted by ...

separation-differential-characterization-gut-microbial-extracellular

Research

Forschung

JoVE Journal

Biochemistry

Biochemie

Quelle: Cian, M. B. et. al., Trennung der Zellhülle für gramnegative Bakterien in innere und äußere Membranfraktionen mit technischen Anpassungen für Acinetobacter baumannii. J. Vis. Exp. (2020)Dieses Video zeigt die Trennung der inneren und äußeren Membranfraktionen von gramnegativen Bakterien mittels Saccharosegradienten-Ultrazentrifugation. Die Membranfraktionen werden gereinigt und bei niedrigen Temperaturen gelagert, um membranspezifische Komponenten gezielt zu analysieren.

Trennung von inneren und äußeren Membranfraktionen von gramnegativen Bakterien

Quelle: Watson, D. C., et.al. Skalierbare Isolierung und Reinigung von extrazellulären Vesikeln aus Escherichia coli und anderen Bakterien. J. Vis. Exp. (2021)Dieses Video zeigt die Isolierung und Konzentration von extrazellulären Vesikeln (EVs), die aus der äußeren Membran von gentechnisch veränderten Bakterien gewonnen werden. Der Prozess umfasst die Kultivierung der Bakterien, um EVs freizusetzen, gefolgt von sequenziellen Zentrifugations- und Filtrationsschritten, um Zellen und Ablagerungen...

Isolierung und Anreicherung von extrazellulären Vesikeln aus der äußeren Membran aus Bakterien

Mycobacterium tuberculosis zeigt eine erhöhte Produktion und Freisetzung von extrazellulären Vesikeln als Reaktion auf niedrige Eisenbedingungen. Diese Arbeit beschreibt ein Protokoll zur Erzeugung niedriger Eisenbedingungen und Methoden zur Reinigung und Charakterisierung mykobakterieller extrazellulärer Vesikel, die als Reaktion auf Eisenmangel freigesetzt werden.

Isolierung und Charakterisierung von extrazellulären Vesikeln, die von eisenbegrenzten Mykobakterien hergestellt werden

Bakterielle Vesikel spielen eine wichtige Rolle bei der Pathogenese und haben vielversprechende biotechnologische Anwendungen. Die Heterogenität der Vesikel erschwert die Analyse und Verwendung; Daher ist eine einfache, reproduzierbare Methode zur Trennung unterschiedlicher Größen von Vesikeln erforderlich. Hier demonstrieren wir die Verwendung der Größenausschlusschromatographie zur Trennung heterogener Vesikel, die von Aggregatibacter actinomycetemcomitansproduziert werden.

Größenausschlusschromatographie zur Analyse der Heterogenität bakterieller äußerer Membranvesikel

Bakterien sezernieren nanometergroße extrazelluläre Vesikel (EVs), die bioaktive biologische Moleküle tragen. Die EV-Forschung konzentriert sich auf das Verständnis ihrer Biogenese, ihrer Rolle bei Mikroben-Mikroben- und Wirt-Mikroben-Interaktionen und Krankheiten sowie ihrer potenziellen therapeutischen Anwendungen. Ein Workflow für die skalierbare Isolierung von EVs aus verschiedenen Bakterien wird vorgestellt, um die Standardisierung der EV-Forschung zu erleichtern.

Skalierbare Isolierung und Reinigung extrazellulärer Vesikel aus Escherichia coli und anderen Bakterien

Das vorliegende Protokoll enthält detaillierte Beschreibungen für die Isolierung, Konzentration und Charakterisierung extrazellulärer Vesikel aus Cyanobakterienkulturen. Ansätze zur Reinigung von Vesikeln aus Kulturen auf verschiedenen Skalen, Kompromisse zwischen den Methoden und Überlegungen zur Arbeit mit Feldproben werden ebenfalls diskutiert.

Isolierung und Charakterisierung von zyanobakteriellen extrazellulären Vesikeln

Ziel ist es, ein Protokoll zu skizzieren, um die Mechanismen der Dysbiose bei Herz-Kreislauf-Erkrankungen zu untersuchen. In diesem Artikel wird erörtert, wie man aseptisch Stuhlproben von Mäusen sammelt und transplantiert, Darm isoliert und die "Swiss-Roll"-Methode anwendet, gefolgt von Immunfärbetechniken, um Veränderungen im Magen-Darm-Trakt zu untersuchen.

Fäkalisolierung der Maus und Mikrobiota-Transplantation

Diese Studie beschreibt eine Methode zur Isolierung und Reinigung bakterieller extrazellulärer Vesikel (BEVs), die aus menschlichen Fäkalien mittels Dichtegradientenzentrifugation (DGC) angereichert wurden, identifiziert die physikalischen Eigenschaften von BEVs anhand von Morphologie, Partikelgröße und Konzentration und diskutiert die potenziellen Anwendungen des DGC-Ansatzes in der klinischen und wissenschaftlichen Forschung.

Isolierung und Aufreinigung bakterieller extrazellulärer Vesikel aus menschlichen Fäkalien mittels Dichtegradientenzentrifugation

Dieser Artikel beschreibt: (1) die orale Abgabe von Testmolekülen an Neugeborenenmäuse bereits ab DOL 6; und (2) ex-vivo-Bewertung der Funktion der Colonepithelbarriere in Biopsien von DOL 10 bis zum Abstillen (DOL 20) Jungen durch Bewertung der parazellulären und transzellulären Permeabilität mit Ussing-Kammern.

Orale Gavage bei neonatalen Mauswelpen und funktionelle Beurteilung der Integrität der Darmbarriere mittels Ussing-Kammern

Darm-Host-Mikroben-Interaktionen wurden bewertet, mit einem neuartigen Ansatz kombiniert eine synthetische mündliche Gemeinschaft, in-vitro- Magen-Darm-Verdauung und ein Modell der Dünndarm Epithel. Wir präsentieren Ihnen eine Methode, die auszuwertende ZELLINVASION von Krankheitserregern und Multi-Spezies-Biofilmen oder sogar probiotischen Formulierungen Überlebensfähigkeit getestet angepasst werden kann.

Beurteilung der Lebensfähigkeit eines synthetischen bakterielle Konsortiums auf der In-vitro- Darm Host-Mikrobe Oberfläche

Erfahren Sie die Isolierung mikrobieller extrazellulärer Vesikel aus dem Darm salzempfindlicher Ratten unter salzreicher Ernährung. Diese Methode ermöglicht die Charakterisierung von Größe, Morphologie und Zusammensetzung für Hypertonie-Forschung.

Trennung und differentielle Charakterisierung von mikrobiellen extrazellulären Vesikeln im Darm bei salzempfindlichen Ratten unter salzreichen Ernährungsbedingungen (Video) | JoVE Journal

Trennung und differentielle Charakterisierung von mikrobiellen extrazellulären Vesikeln im Darm bei salzempfindlichen Ratten unter salzreichen Ernährungsbedingungen

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