El intraluminal de arteria cerebral media oclusión (MCAO) es el modelo más empleado entre los modelos experimentales de ictus isquémico. Aquí vamos a demostrar todo el modelo en detalle con la guía de la flujometría láser Doppler, y sus resultados representativos.
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Artículo de método
Intraluminal la arteria cerebral media de oclusión (MCAO) Modelo para el ictus isquémico con Orientación flujometría láser Doppler en ratones
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En este artículo
Resumen
Resumen
El accidente cerebrovascular es la tercera causa de muerte y la principal causa de discapacidad en el mundo, con un costo estimado de cerca de $ 70 mil millones en los Estados Unidos en 2009 1,2. El intraluminal de arteria cerebral media oclusión (MCAO) modelo fue desarrollado por Koizumi 4 en 1986 para simular este impactante patología humana en la rata. Una modificación del método de MCAO fue presentado más tarde por Longa 3. Ambas técnicas han sido ampliamente utilizados para identificar los mecanismos moleculares de las lesiones cerebrales derivadas de accidentes cerebrovasculares isquémicos y posibles modalidades terapéuticas 5. Este método relativamente no invasiva en ratas se ha extendido el uso de ratones para tomar ventaja de transgénicos y knock-out cepas de 6,7. El modelo de isquemia focal cerebral, una sutura intraluminal se avanza a través de la arteria carótida interna para ocluir la base del MCA. Retracción de la sutura después de un período de tiempo especificado imita reperfusión espontánea, pero la sutura también pueden ser retenidos de forma permanente. Este vídeo se demuestra los dos enfoques principales para llevar a cabo el procedimiento intraluminal MCAO en ratones en forma escalonada, además de proporcionar ideas para posibles inconvenientes y dificultades. El tejido cerebral isquémico posteriormente se tiñeron por el cloruro de 2,3,5-trifenil tetrazolio (TTC) para evaluar la extensión del infarto cerebral 8.
Protocolo
Este protocolo fue aprobado por el Comité Institucional y el empleo Comisión (IACUC) de la Universidad de Florida y está en conformidad con el "Principio de Cuidado de Animales de Laboratorio" (NIH publicación N º 86-23, revisado en 1985).
1. Materiales
- Animales: Los ratones machos C57BL / 6 (Harlan Laboratories, Indianapolis, IN, EE.UU.) con un peso 20 a 26 gramos en el momento de la cirugía.
- Anestesia:
- Máquina de anestesia: La inhalación VetEquip sistema de anestesia (VetEquip Inc., Pleasanton, CA, EE.UU.).
- Anestésicos por inhalación: El isoflurano (Farmacia Baxter, Deerfield, IL).
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Discusión
El modelo MCAO es un modelo establecido que se replica a la isquemia cerebral en especies murinas. Este modelo fue utilizado por primera vez en ratas y posteriormente adaptado a los ratones. Evitar craniectomía para eliminar la influencia de la manipulación quirúrgica de permeabilidad de la barrera sangre-cerebro y la presión intracraneal es una ventaja de esta técnica. Sin embargo, muchas variables, tales como la cepa diferencias relacionadas con la 10, el tamaño de la sutura de punta 11, la durac.......
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Divulgaciones
Los autores declaran que no tienen ningún conflicto de intereses.
Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios | |
|---|---|---|---|---|
| Nombre del reactivo | Tipo | Empresa | Número de catálogo | Comentarios (opcional) |
| Los ratones machos C57BL / 6 | Animal | Harlan Laboratories, Indianapolis, IN, EE.UU. | 20-26 grs | |
| Disección microscopio | Microscopio | Leica estereomicroscopio MZ6 | 6.3:1 captura | |
| Iluminación de fibra óptica | Iluminador | TechniQuip Corp., Livermore, California, EE.UU. | FO1-150 | |
| Isoflurano | Anestesia | Baxter Farmacia, Deerfield, IL | 1001936060 | |
| SuperCut tijera Iris, recta | Herramienta quirúrgica | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, EE.UU. | 14218 | |
| Vannas micro-tijera, rectas | Herramienta quirúrgica | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, EE.UU. | 14003 | |
| Dumont pinzas de punta fina | Herramienta quirúrgica | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, EE.UU. | 503290 | |
| Buque clip de | Herramienta quirúrgica | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, EE.UU. | 14120 | |
| Desecador Alta Frecuencia 900 | Herramienta quirúrgica | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, EE.UU. | 500397 | |
| 7-0 de nylon quirúrgico de sutura monofilamento | Sutura | Ethicon, Inc., Somerville, NJ, EE.UU. | 1647G | Sutura para la oclusión |
| 7-0 suturas de seda quirúrgica | Sutura | Ethicon, Inc., Somerville, NJ, EE.UU. | 7733G | De sutura para ligadura |
| De silicona RTV adhesivo | El caucho de silicona | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, EE.UU. | 1571 | |
| Vetbond | Adhesivo tisular | 3M Company, St. Paul, MN, EE.UU. | 70200746587 | |
| Puralube ungüento Vet | Ungüento para los ojos | Pharmaderm, Melville, NY, EE.UU. | ||
| La buprenorfina hydrochlorode | Analgésicos | Hospira Inc., Lake Forest, Illinois, EE.UU. | NDC 0409-2012-32 | |
| Unidad de cauterio térmico | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, EE.UU. | 501292 | ||
| Periflux System 5000 | TCD flujometría | Perimed, Estocolmo, Suecia | ||
| BAT-12 | Termómetro rectal | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, EE.UU. | BAT-12R | |
| T / bomba, TP600 | Manta térmica | Gaymar, NY, EE.UU. | ||
| 2,3,5-trifenil tetrazolio cloruro | Reactivo | Sigma-Aldrich Co., St Louis, MO, EE.UU. | T8877 | |
| Los ratones del cerebro matriz cortadora | Máquina de cortar el cerebro | Zivic-Miller laboratorio., Inc., Allison Park, PA, EE.UU. | BSMAS001-1 |
Referencias
- Recommendations on stroke prevention, diagnosis, and therapy. Report of the WHO Task Force on Stroke and other Cerebrovascular Disorders. Stroke; a journal of cerebral circulation. 20, 1407-1431 (1989).
- Lloyd-Jones, D.
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Reimpresiones y permisos
