Se describe el protocolo para llevar a cabo una prueba de estrés cardíaco inducido por la dobutamina y monitoreado por cateterismo cardíaco en ratones normales. También se muestra su aplicación a desenmascarar la enfermedad cardíaca subclínica en altos de grasa inducida por dieta ratones obesos.
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Artículo de método
Prueba de esfuerzo cardíaco inducida por dobutamina y supervisado por cateterismo cardíaco en ratones
En este artículo
Resumen
Resumen
La dobutamina es un agonista β-adrenérgico con una mayor afinidad por el receptor que se expresa en el corazón (β 1) que para los receptores expresados en las arterias (β 2). Cuando la administración sistémica, aumenta la demanda cardiaca. Por lo tanto, la dobutamina desenmascara ritmo anormal o áreas isquémicas potencialmente en riesgo de infarto.
Monitorización de la función cardíaca durante una prueba de esfuerzo cardiaco puede ser realizada por ecocardiografía o cateterismo cardíaco. Esta última es una técnica invasiva pero más preciso e informativo que el primero.
Prueba de estrés cardíaco inducido por la dobutamina y monitoreado por cateterismo cardíaco lograrse como se describe aquí permite, en un solo experimento, la medición de los siguientes parámetros hemodinámicos: frecuencia cardiaca (HR), la presión sistólica, presión diastólica, la presión diastólica final, la presión positiva máxima desarrollo (dP / dtmax) y pulse negativo máximoure desarrollo (dP / dt min), en condiciones basales y bajo dosis crecientes de dobutamina.
Como era de esperar, en ratones normales se observó una dobutamina aumento dosis-dependiente en HR, dP / dt max y min dP / dt. Además, en la dosis más alta probada (12 ng / g / min), la descompensación cardíaca de alto contenido de grasa inducida por dieta ratones obesos fue desenmascarado.
Protocolo
Protocolo fue aprobado por el Comité de Ética de la Facultad de Medicina Clínica Alemana-Desarrollo Universidad del.
I. Preparación de la infusión de dobutamina
- Disolver 10 mg de dobutamina en 20 ml de agua destilada estéril, con el fin de obtener una solución madre de 500 mg / ml dobutamina. Dividir en partes alícuotas y se almacena a -20 ° C. Esta solución se puede utilizar por lo menos durante 3 meses.
- Descongelar una alícuota de la solución madre de la dobutamina a temperatura ambiente.
- Diluir solución madre estéril dobutamina en 0,9% de NaCl, con el fin de obtener la solución de trabajo dobutamina, que ....
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Resultados
La señal de presión arterial se define por la presión sistólica y diastólica. Cuando el sensor de presión está dentro del ventrículo izquierdo, su presión (LVP) de forma de onda se caracteriza por una caída a cero de la presión diastólica y la aparición de la contracción de la aurícula izquierda antes de la contracción del ventrículo (Figura 1). En su estado básico, ketamina-xilazina ratones normales anestesiados tenía HR de 280 ± 24, P max de 107 ± 8, P min de 5 ± 1, EDP de 14 ± 2.......
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Discusión
Prueba de esfuerzo cardíaco inducido por la dobutamina y supervisado por cateterismo cardíaco es laborioso. Sin embargo, siguiendo el protocolo aquí describir y con un corto tiempo de formación, es posible evaluar seis parámetros hemodinámicos en un solo experimento que dura aproximadamente una hora.
Los pasos críticos del protocolo presentado aquí son los canulaciones de los vasos sanguíneos. En cuanto a la canulación de la arteria carótida, la incisión realizada debe ser lo suficientemente.......
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Divulgaciones
No hay conflictos de interés declarado.
Agradecimientos
Agradecemos al Dr. Helio Salgado, Lataro Renata y Mauro de Oliveira, Facultad de Medicina de Ribeirão Preto de la Universidad de Sao Paulo y el Dr. Ben Janssen, Instituto de Investigación Cardiovascular de Maastricht, Maastricht University, por la generosa ayuda durante el proceso de configuración.
Este trabajo fue financiado por FONDECYT N º 11090114 de subvención para la COSUDE
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Reactivos | |||
| PE-50/10 | Warner Instruments | 64-0752 | |
| Hilo de seda 6/0 HR17 | Tagum | SN0713K | |
| Xylacin 20 mg / ml | Laboratorio Centrovet | ||
| La ketamina 100 mg / ml | Drag Pharma | ||
| Cloruro de sodio 0,9% | Laboratorio Sanderson SA | ||
| El clorhidrato de dobutamina | Sigma-Aldrich | D0676 | |
| Jeringa de insulina U-100 29G x ½ " | Terumo Medical Co. | ||
| Pinzas de disección micro 11,5 cm Estilo 7 | LawtonMedizintechnik | 09-0959 | |
| Graefe Pinza Cvd 0.7mm 7cm | Lawton Medizintechnik | 62-0263 | |
| Clamps bulldog Dieffenbach Cl Str. 38 mm | Lawton Medizintechnik | 60-010 | |
| Tijeras Vannas 8 cm Str. Fh | Lawton Medizintechnik | 63-1400 | |
| Equipo | |||
| SPR-671 Mikro-Tip catéter de presión | Millar Instruments | 840-6719 | |
| PCU-2000 Unidad de Control de Presión | Millar Instruments | 880-0129 | |
| PowerLab 4/30 | ADInstruments Pty Ltd. | ML866 | |
| LabChartPro 7 | ADInstruments Pty Ltd. | MLU260 / 7 | |
| Legato200 Bomba de Infusión | KdScientific | KD-KDS210P | |
| TCAT-2LV Controlador de temperatura y la placa de calentamiento isotérmico | Physitemp instrumentos Inc. | ||
| El suministro de oxígeno médico | Indura | ||
| Sonda rectal | ADInstruments Pty Ltd. | MLT1404 | |
| Microscopio trinocular, iluminación axial | LW Scientific | Z2B-TRI-Etne, ILP-1502-LTS1, ILP-1502-DGGF |
Referencias
- Hart, C. Y., Burnett, J. C., Redfield, M. M. Effects of avertin versus xylazine-ketamine anesthesia on cardiac function in normal mice. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 281, H1938-H1945 (2001).
- Janssen, B. J., et al.
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Reimpresiones y permisos
