Se introduce un método quirúrgico para inducir experimental de isquemia / reperfusión (I / R) lesión para simular el infarto de miocardio (MI) en modelos de ratón que permite una mayor claridad en el posicionamiento de la ligadura en la arteria descendente anterior izquierda (LAD) para aumentar la reproducibilidad de experimentos en ratones MI.
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Artículo de método
Un modelo murino de isquemia-reperfusión miocárdica lesión a través de la ligadura de la arteria descendente anterior
En este artículo
Resumen
Resumen
Infarto agudo de miocardio o crónica (MI) son los eventos cardiovasculares que resulta en una alta morbilidad y mortalidad. El establecimiento de los mecanismos patológicos en el trabajo durante MI y el desarrollo de enfoques terapéuticos eficaces requiere una metodología para simular de forma reproducible la incidencia clínica y reflejar los cambios fisiopatológicos asociados a MI. Aquí, se describe un método quirúrgico para inducir infarto de miocardio en modelos de ratón que se puede utilizar para corto plazo isquemia-reperfusión (I / R) lesión, así como la ligadura permanente. La principal ventaja de este método es para facilitar la localización de la arteria descendente anterior izquierda (LAD) para permitir la ligadura exacta de esta arteria para inducir isquemia en el ventrículo izquierdo del corazón de ratón. La colocación exacta de la ligadura de la LAD aumenta la reproducibilidad del tamaño del infarto y por lo tanto produce resultados más fiables. Una mayor precisión en la colocación de la ligadura mejorará los enfoques quirúrgicos estándar para simular MI en ratones, tHus reducir el número de animales de experimentación necesarios para los estudios estadísticamente relevantes y mejorar nuestra comprensión de los mecanismos que producen la disfunción cardiaca después de infarto de miocardio. Este modelo de ratón de MI también es útil para el ensayo preclínico de tratamientos dirigidos daño miocárdico después de un IM.
Introducción
Los modelos animales de infarto de miocardio (IM) son importantes en la investigación de la compleja fisiopatología de la cardiopatía isquémica 1. La isquemia-reperfusión (I / R) lesión es un importante contribuyente al daño miocárdico generado durante la MI. La lesión por isquemia inicial producida por la oclusión de la circulación coronaria puede ser minimizado en pacientes con IM mediante el uso de angioplastia para restaurar la perfusión de una manera oportuna. Si bien esta intervención ha reducido considerablemente el número de muertes por infarto agudo de miocardio, la restauración del flujo sanguíneo en los resultados de la zona isquémica en la lesi....
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Protocolo
Este protocolo fue aprobado por los animales y está en conformidad con las directrices y normas establecidas por el Cuidado de Animales y el empleo Comisión Institucional (IACUC) de la Universidad Estatal de Ohio. Todas las políticas desarrolladas por el IACUC locales están en conformidad con la Guía de Experimentación Animal desarrollado por la Oficina de Laboratorio Animal Welfare, de los Institutos Nacionales de Salud.
1. Anestesia y la intubación endotraqueal
- Autoclave todos los instrumentos y suministros quirúrgicos antes de su uso. Desgaste, de un solo uso guantes quirúrgicos estériles durante todo el procedimiento. Mante....
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Resultados
Después de 24 horas de reperfusión, el análisis del tamaño del infarto y el área en riesgo (AAR), por ftalo colorante azul y cloruro de trifenil tetrazolio (TTC), la ligadura de la LAD puede ser confirmada mediante la observación de escaldado de tejido miocárdico distal a la sutura así como la disfunción de la pared anterior. La reperfusión puede ser verificada por la vuelta del color rojo con el tejido miocárdico y la demostración de una cierta recuperación del movimiento de la pared anterior.
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Discusión
Modelos de isquemia-reperfusión del miocardio de ratón son un método eficaz para la investigación cardiovascular para simular la enfermedad cardíaca aguda o crónica clínica 13,14. Un esfuerzo importante se ha aplicado para desarrollar y refinar los métodos quirúrgicos que producen los eventos isquémicos y daño de reperfusión en los corazones de varios tipos diferentes de animales. Mientras que hay ventajas particulares a la utilización de diferentes sistemas de animales, el ratón tiene las características que.......
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Divulgaciones
Dr. Noah Weisleder es un fundador y responsable científico de TRIM-edicina, Inc.
Agradecimientos
Las investigaciones realizadas en esta publicación fue apoyada por el Instituto Nacional de Artritis y Enfermedades Musculoesqueléticas y de la Piel, parte de los Institutos Nacionales de Salud, en virtud de Premio Número R01-AR063084. El contenido es de exclusiva responsabilidad de sus autores y no representa necesariamente las opiniones oficiales de los Institutos Nacionales de Salud.
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| PhysioSuite con RightTemp Calentamiento homeotérmico | Kent Scientific Corp | PS-RT | |
| Fuente de luz | Zeiss | KL 1500 | |
| Mouse Heart Slicer Matrix | Zivic Miller | HSMS001-1 | |
| Micro Bandeja - Base, Tapa y Tapete (6.0 x 10 x 0.75) | Fine Science Tools | 6100A | |
| Hospira | NDC 0409-1163-01 | ||
| Isoflurano | Abbott | NDC 5260-04-05 | |
| Betadine Soultion | Purdue Pharma | 25655-41-8 | |
| Troponina cardíaca de ratón T (cTnT) ELISA | Kamiya Biomedical Company | KT-58997 | |
| Tijeras finas | Herramientas de ciencia fina | 14040-10 | |
| Dumont #5 Pinzas | Herramientas de ciencia fina | 11251-30 | |
| Dumont #3 Pinzas | Herramientas de ciencia fina | 11231-30 | |
| Castroviejo Micro Portaagujas | Fine Science Tools | 12060-01 | |
| Portaagujas delgado y alargado | Fine Science Tools | 12005-15 | |
| Portaagujas con mango redondo | Fine Science Tools | 12075-12 | |
| Omano Estereoscopio trinocular | Microscope.com | OM99-V6 | |
| SB2 Soporte de brazo con brazo universal | Microscope.com | ||
| , 0,5 mm, 1/16 pulgadas Kent | Scientific Corp | RSP05T16 | |
| Sistemas de anestesia para roedores y animales pequeños | VetEquip, Inc | 901807 | |
| 4-0 sutura cónica de seda | Sharpoint™ Productos | DC-2515N | |
| 6-0 sutura cónica de seda | Sharpoint™ Productos | DC-2150N |
Referencias
- Abarbanell, A. M., et al. Animal models of myocardial and vascular injury. J Surg Res. 162, 239-249 (2010).
- Gao, E., et al. A novel and efficient model of coronary artery ligation and myocardial infarction in the mouse. Circ Res. 107,....
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Reimpresiones y permisos
