El modelo experimental de hemorragia subaracnoidea (HSA) con derivación de sangre intracraneal controlada por presión en el conejo combina los procedimientos estándar: canulación de la arteria subclavia y punción transcutánea de cisterna magna, lo que permite imitar de cerca las condiciones fisiopatológicas humanas después de la HSA. Presentamos instrucciones paso a paso y discutimos los puntos quirúrgicos clave para la creación exitosa de SAH experimental.
Se requiere una suscripción a JoVE para ver este contenido. Inicie sesión o comience su prueba gratuita.
Artículo de método
El Conejo Modelo Blood-shunt para el Estudio de la aguda y secuelas tardías de Hemorragia subaracnoidea: Aspectos Técnicos
En este artículo
Resumen
Resumen
Lesión cerebral temprana y tardía vasoespasmo cerebral tanto contribuyen a resultados desfavorables después de una hemorragia subaracnoidea (HSA). Modelos animales reproducibles y controlables que simulan ambas condiciones son actualmente poco común. Por lo tanto, se necesitan nuevos modelos con el fin de imitar las condiciones fisiopatológicas humanos como resultado de la HSA.
Este informe describe los matices técnicos de un modelo SAH sangre-shunt conejo que permite el control de la presión intracerebral (ICP). Una derivación extracorpórea se coloca entre el sistema arterial y el espacio subaracnoideo, que permite SAH-examinador independiente en un cráneo cerrado. Paso a paso las instrucciones de procedimiento y el equipo necesario se describen, así como las consideraciones técnicas para producir el modelo con un mínimo de mortalidad y morbilidad. Se describen los detalles importantes que se requieren para la creación quirúrgica exitosa de esta robusta, simple y consistente modelo de conejo SAH ICP-controlado.
Introducción
La hemorragia subaracnoidea (HSA) es una de las más potencialmente mortal condiciones neuropatológicos, con frecuencia conduce a un daño neurológico permanente o la muerte 1. Las investigaciones anteriores se ha centrado en el vasoespasmo cerebral retardada (DCVS) como la etiología primaria de los déficits neurológicos asociados con SAH 2. Sin embargo, los pobres en general, los resultados clínicos de los pacientes que sufren de la HSA después del tratamiento del vasoespasmo ha llevado a una expansión del enfoque de la investigación para incluir los efectos de la lesión cerebral temprano (EBI) después de la HSA 3. Una mayor comprensió....
Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.
Protocolo
Tres meses de edad hembra conejos de Nueva Zelanda que pesan 2.5 a 3.5 kg se utilizaron para este procedimiento. El estudio se realizó de acuerdo con los Institutos Nacionales de Salud directrices para el cuidado y uso de animales de experimentación y con la aprobación del Comité de Cuidado de Animales del cantón de Berna, Suiza (aprobación N. ° 105/13). Todos los procedimientos quirúrgicos se realizaron bajo condiciones estériles en el Instituto de Cirugía Experimental del Departamento de Investigación Clínica del Hospital Universitario de Berna en Berna, Suiza. Un anestesiólogo veterinario supervisa los animales durante la cirugía y durante la recuperación.
Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.
Resultados
El modelo de derivación de sangre de conejo de SAH se describe en este informe produce EBI en el hipocampo (Figura 2A, B), la corteza basal (Figura 2A, B), y la vasculatura cerebral (Figura 2C) tan pronto como 24 horas después de la lesión y muestra una característica distribución de la sangre (Figura 2D) 8. Además, el modelo desencadena moderada a severa grados de DCVS en tres días después de la HSA de inducción (Figura 3) <.......
Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.
Discusión
El modelo de shunt produce patología similar a la observada en seres humanos después de la HSA aguda 3,8,10. Se ha sugerido que puede exacerbar EBI, mantener e incluso desencadenar DCVS 12, y como tal, este modelo puede ayudar en la investigación de las fases tempranas y tardías DCVS, incluyendo EBI y DCVS interacciones siguientes SAH. En particular, repetible en vivo DCVS técnicas de monitoreo incluyendo DSA 13, angiografía por tomografía computarizada 14 y Doppler t.......
Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.
Divulgaciones
Ninguno. Los autores no tienen ningún interés financiero o comercial en ninguno de los medicamentos, materiales o equipos utilizados. No se recibió financiación específica para este trabajo. Los autores son los únicos responsables del diseño y la realización del estudio presentado y no informan ningún conflicto de intereses con respecto a los materiales y métodos utilizados en este estudio o los hallazgos especificados en el artículo. Confirman el cumplimiento de las normas éticas. El estudio se realizó de acuerdo con las directrices de los Institutos Nacionales de Salud para el cuidado y uso de animales de experimentación y con la aprobación del Comité de Cuidado de Animales del Cantón de Berna, Suiza (aprobación #109/07 y #107/09).
Agradecimientos
Los autores agradecen a Laurie von Melchner, Hospital Universitario de Berna, Departamento de Neurocirugía, Berna, Suiza, para la revisión y edición del manuscrito y Paskus Jeremías, Hospital de Niños de Boston, Boston, MA corrección de pruebas para el proyecto inicial. Apreciamos el hábil manejo de cuidado de los animales, la anestesia, y la asistencia operativa de Daniel Mettler, DVM, Max Müller, DVM, Daniel Zalokar y Olgica Beslac, Instituto de Cirugía Experimental, Departamento de Investigación Clínica de la Universidad de Berna, Berna, Suiza. Damos las gracias a Michael Lensch, Jefe de Investigación Enfermera del Departamento de Medicina de Cuidados Intensivos d....
Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.
Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Equipo | |||
| Microscopio de operación | Zeiss, Jena, Alemania | Zeiss, OPMI-MD microscopio quirúrgico | |
| Equipo quirúrgico | B. Braun, Alemania | Pinzas médicas n.º 5; tijeras para vasos de 8 cm; microclip de 4 mm | |
| Respirador | Hugo Sachs | ||
| Cortapelos | 3M Surgical Clipper | Kit de inicio 9667A | |
| Placa caliente corporal | FHC | ||
| Analizador de gases en sangre | Radiómetro, Copenhague, Dinamarca | ABL 725 | |
| Monitorización cardíaca | Monitor multiparamétrico Camino, Integra, Plainsboro, NJ, EE. UU | AP-05 | |
| Análisis de software | BIOPAC Systems, Inc., Goleta, CA, EE. UU | Biopac MP100 y acqKnowledge software, versión 3.8.1 | |
| Análisis de software | ImagePro Discovery, MediaCybernetics, Silver Spring, MD, EE. UU. | Image-Pro Plus versión | |
| Aparato de angiografía | DFP 2000 A-Toshiba | MIIXR0001EAA | |
| monitor ICP | Camino Laboratories, San Diego, CA, EE. UU. | Monitor ICP, modelo 110-4B | |
| Monitor de flujo sanguíneo | Oxford Optronix Ltd., Oxford, Reino Unido Solución | microesferas Cal KIT | |
| Sondas de aguja fina de flujometría láser-Doppler | Oxford Optronix Ltd., Oxford, Reino Unido | MNP110XP, 0,48 mm de diámetro | |
| Tubo de presión | B. Braun, Germay | PE 1,0 mm y veces; 2,0 mm | |
| Monitor de anestesia | GE Medical Systems, Suiza | Datex S5 Monitor | |
| Material | |||
| Catéter vascular de 20 G | Smiths Medical | Jelco catéter intravenoso, REF 4057 | |
| 5.5 F catéter venoso central de tres lúmenes | Conectores, Tagelswangen, Suiza | Catéter de silicona STH-C040 | |
| aguja de 22 G x 40 mm | Emergo Group Inc., Países Bajos | ||
| Microtaladro de alta velocidad | Stryker, Solothurn, Suiza | 5400-15 | |
| Cera de hueso | Ethicon, Johnson & Johnson, NJ, EE. UU. | ETHW31G | |
| Pinzas bipolares | Aesculap, Inc., PA, EE. UU. | US349SP | |
| Ketamina | Cualquier producto genérico | ||
| Xilacina | Cualquier producto genérico | ||
| Buprenorfina | Cualquier producto genérico | ||
| Fentanilo | Cualquier producto genérico | ||
| Parches de matriz de fentanilo transdérmicos | Cualquier producto genérico | ||
| Lidocaína 1% | Cualquier producto genérico | ||
| 4% papaverin HCl | Cualquier producto genérico | ||
| Sulfato de neomicina | Research Organics Inc., OH, USA | Cualquier producto genérico | |
| Povidona yodado | Cualquier producto genérico | ||
| cloruro de sodio 0.9 | Cualquier producto genérico | ||
| Iopamidol | Abott Laboratories, Illinois, EE. UU. | Cualquier producto genérico | |
| Sutura reabsorbible 3-0 | Ethicon Inc., EE. UU | VCP824G | |
| 5-0 sutura no absorbible | Ethicon Inc., EE. UU. | 8618G | |
| 4-0 suturas de polifilamento | Ethicon Inc., EE. UU | VCP284G |
Referencias
- Taylor, T. N., et al. Lifetime cost of stroke in the United States. Stroke; a journal of cerebral circulation. 27, 1459-1466 (1996).
- Kikkawa, Y., Kameda, K., Hirano, M., Sasaki, T., Hirano, K.
Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.
Reimpresiones y permisos
Etiquetas
