El objetivo de este protocolo es mostrar una técnica eficaz para aislar el núcleo vítreo entero e intacto y la corteza de ojos porcinos enucleados post mortem.
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Artículo de método
Todo el humor vítreo Disección de Análisis Vitreodynamic
En este artículo
Resumen
Resumen
Los autores proponen una técnica eficaz para aislar el núcleo vítreo entero e intacto y la corteza de los ojos porcinos enucleados post mortem. Si bien estudios anteriores han mostrado los resultados de tales disecciones, los pasos detallados no se han descrito, lo que impide que los investigadores fuera del campo repliquen sus métodos. Otros estudios recolectan vítreo ya sea por aspiración, que no mantiene la anatomía de la estructura vítrea, o mediante disección parcial, que solo aísla el núcleo vítreo. El método propuesto aísla todo el cuerpo vítreo, con el núcleo vítreo y la corteza intactos, manteniendo la anatomía vítrea y la integridad estructural. En este método, primero se crea un colgajo escleral de espesor completo en un ojo porcino enucleado y, a través de este, se puede separar el tejido coroideo de la esclerótica. A continuación, el colgajo escleral se expande y la coroides se separa completamente de la esclerótica. Finalmente, el tejido coroideo-retina se despega del vítreo para dejar un cuerpo vítreo intacto aislado. La técnica de disección vítrea propuesta se puede utilizar para estudiar las propiedades físicas del humor vítreo. En particular, este método tiene importancia para los estudios experimentales que involucran la administración de fármacos, el transporte de oxígeno vítreo-retiniano y la convección intraocular.
Introducción
El objetivo de este método es al detalle una técnica para aislar todo un cuerpo vítreo, intacta, con el núcleo vítreo y la corteza intacta, a partir de un ojo de cadáver, para los fines de análisis vitreodynamic. A medida que el campo de la fisiología del vítreo ha crecido, investigadores multidisciplinarios, como la mecánica de fluidos investigadores, están investigando las propiedades físicas y biomecánicas del vítreo 1. Para ello, es esencial al detalle una técnica para aislar todo el cuerpo vítreo intacta para ayudar a los investigadores multidisciplinarios.
Sebag et al. 2 y otros 3 elegantes ....
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Protocolo
Todos los ojos enucleados se obtuvieron de un matadero y todos los experimentos se realizaron de acuerdo con las leyes de bioseguridad institucionales.
- Asegure ojo enucleado abajo sobre una superficie. Para ello, la colocación de pasadores de tejido a través del exceso de tejido alrededor de los ojos y la obtención abajo en un tablero de espuma de poliestireno.
- Diseccionar y separar la conjuntiva del ojo perilimbal.
- Utilice unas pinzas finas (0,3 fórceps) y micro tijeras (tijeras Westcott) para incidir la conjuntiva en el limbo y sin rodeos diseccionarlo de la esclerótica. Cortar la conjuntiva a lo largo del limbo como la disección rom....
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Resultados
Siguiendo el protocolo dará lugar a una disección vítreo éxito con el núcleo y la corteza (Figura 3) intacta. Esto es evidente a partir de las piezas residuales de retina adheridas a la corteza vítreo. Intacto humor vítreo conjunto se puede utilizar de varias maneras para experimentos vitreodynamic específicos. En nuestro caso, el índice de difusión del oxígeno en humor vítreo intacto y TI de constante de tiempo correspondiente se estudió (Figura 2). Vítreo que se disecó (núcleo y la co.......
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Discusión
Existen dos pasos críticos que se deben realizar con cuidado durante la disección vítreo. Paso 3, la creación de un colgajo escleral de grosor completo, es crucial para toda la disección. Se debe tener cuidado para no cortar en la coroides cuando se crea el colgajo escleral de grosor completo. El otro paso fundamental está diseccionando de distancia de la esclerótica de la coroides. Este paso debe hacerse con cuidado para evitar la creación de múltiples orificios de la coroides de la que el humor vítreo puede derramarse.......
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Divulgaciones
Los autores no tienen nada que revelar.
Agradecimientos
Los autores agradecen las siguientes fuentes de financiación, Fundación Whittier, Fundación Harrington, Institutos Nacionales de Salud e Investigación para Prevenir la Ceguera.
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Pinzas 0.3 | Storz Opthalmics | E1793 | |
| Westcott Tijeras de tenotomía curvadas a la derecha | Storz Opthalmics | E3320 R | |
| Mango de bisturí n.º 3 | VWR | 25607-947 | |
| hoja de bisturí, #11, para mango #3 | VWR | 470174-844 |
Referencias
- Siggers, J. H., Ethier, C. R. Fluid Mechanics of the Eye. Annual Review of Fluid Mechanics. 44 (1), 347-372 (2012).
- Sebag, J. Age-related changes in human vitreous structure. Graefes Arch Clin Exp Ophthalmol. 225 (2), 89-93 (1987).
- Grignolo, A.
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Reimpresiones y permisos
