Modelado de los primeros pasos de cáncer de ovario Difusión en una cultura organotípicos del Peritoneal Cavity Humano

Pamela N. Peters; Elizabeth M. Schryver; Ernst Lengyel; Hilary Kenny

doi:10.3791/53541

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Artículo de método

Modelado de los primeros pasos de cáncer de ovario Difusión en una cultura organotípicos del Peritoneal Cavity Humano

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DOI:

10.3791/53541

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31 de diciembre de 2015

Pamela N. Peters¹ , Elizabeth M. Schryver¹ , Ernst Lengyel¹ , Hilary Kenny¹

¹Department of Obstetrics and Gynecology, Section of Gynecologic Oncology, University of Chicago

En este artículo

Resumen

Aquí, presentamos un protocolo para construir un modelo tridimensional in vitro del revestimiento de la cavidad peritoneal, compuesto por células mesoteliales humanas primarias y fibroblastos estratificados con matriz extracelular, como herramienta para investigar la adhesión, invasión y proliferación de las células de cáncer de ovario.

Resumen

El patrón de metástasis del cáncer de ovario es marcadamente diferente al de la mayoría de los otros tumores epiteliales, porque rara vez se disemina hematógenamente. En cambio, las células de cáncer de ovario exfoliadas del tumor primario son transportadas por el líquido peritoneal a los sitios metastásicos dentro de la cavidad peritoneal. Estos sitios, sobre todo el peritoneo abdominal y el epiplón, son órganos cubiertos por una superficie revestida de mesotelio. Para investigar los procesos de diseminación del cáncer de ovario, montamos un complejo sistema de cultivo tridimensional que reconstruye in vitro el revestimiento de la cavidad peritoneal. Se aislaron fibroblastos humanos primarios y células mesoteliales del epiplón humano. Luego, los fibroblastos se mezclaron con la matriz extracelular y se cubrieron con una capa de las células mesoteliales humanas primarias para imitar las superficies peritoneales y omentales encontradas por las células de cáncer de ovario en metástasis. Como se muestra, el modelo organotípico resultante se utiliza para examinar las etapas tempranas de la diseminación del cáncer de ovario, incluida la adhesión, invasión y proliferación de las células cancerosas. Este modelo se ha utilizado en varios estudios para investigar el papel del microambiente (celular y acelular) en la diseminación temprana del cáncer de ovario. También se ha adaptado con éxito al cribado de alto rendimiento y se ha utilizado para identificar y probar inhibidores de la metástasis del cáncer de ovario.

Introducción

El cáncer de ovario es la neoplasia maligna ginecológica más mortal¹. La mayoría de los pacientes son diagnosticados después de que el cáncer se ha diseminado por toda la cavidad peritoneal. Una vez que el cáncer se ha diseminado por toda la cavidad peritoneal, la cirugía citorreductora y la quimioterapia a menudo no son tratamiento suficiente para prevenir la recurrencia del cáncer y la quimiorresistencia, lo que resulta en una tasa de supervivencia a 5 años de menos del 30%. La metástasis del cáncer de ovario se limita predominantemente a la cavidad peritoneal, y varios otros tipos de cáncer, incluidos los cánceres gástrico, de páncreas y de colon, hacen ....