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Artículo de método

Medidas de seguridad y procedimientos de operación en una (A) BSL-4 de laboratorio: 3. Aerobiología

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DOI:

10.3791/53602

3 de octubre de 2016

En este artículo

Resumen

Dado que los patógenos de altas consecuencias pueden infectar potencialmente a los sujetos a través de partículas en el aire, la aerobiología se ha aplicado cada vez más en la investigación de la patogénesis y el desarrollo de contramedidas médicas. Presentamos una demostración visual detallada de los procedimientos aerobiológicos durante un desafío de aerosoles en primates no humanos en un entorno de máxima contención de nivel 4 de bioseguridad animal.

Resumen

Los estudios de aerosoles o inhalación de patógenos de alta consecuencia han aumentado recientemente en número debido a la amenaza percibida de liberaciones intencionales de aerosoles o transmisión natural inesperada de aerosoles. Los laboratorios específicos diseñados para realizar estos experimentos requieren enormes controles de ingeniería para proporcionar un entorno de trabajo seguro y un mantenimiento constante de los sistemas para mantener la funcionalidad. Los gabinetes de bioseguridad de clase III, también conocidos como guanteras, son recintos herméticos al gas con ventanas que no se abren. Estos gabinetes se mantienen bajo presión negativa mediante sistemas de escape dobles con filtro de aire particulado de alta eficiencia (HEPA) y son la contención primaria ideal para albergar equipos de aerosolización. Un componente crucial para el éxito de la experimentación es un flujo de trabajo bien planificado entre los miembros del personal dentro de una alta contención, por ejemplo, un laboratorio de trajes de bioseguridad animal de nivel 4 (ABSL-4) hasta el laboratorio de gabinete ABSL-4. Para una ejecución fluida del estudio, el establecimiento de una red de comunicación, el traslado de equipos y materias, y la instalación y colocación de equipos, requieren que los miembros del personal planifiquen meticulosamente los procedimientos antes del inicio del estudio. Aquí, proporcionamos una descripción general y una representación visual de cómo se lleva a cabo la investigación aerobiológica en el Centro de Investigación Integrada del Instituto Nacional de Alergias y Enfermedades Infecciosas de los Institutos Nacionales de Salud en Fort Detrick, Maryland, EE. UU., dentro de un entorno ABSL-4.

Introducción

La transmisión del virus se produce generalmente por contacto directo o enfermedades físicas, pero muchos importantes virales (por ejemplo, sarampión, varicela, influenza) son causadas por patógenos que se transmiten por aerosoles o gotitas respiratorias. Tales patógenos tienen el potencial de causar una pandemia con consecuencias que van desde enfermedad leve generalizada asociado con la pérdida de trabajo (por ejemplo, resfriado común) para más rara enfermedad grave con alta letalidad (por ejemplo, la viruela). Patógenos de alto riesgo que se propagan de forma natural por aerosol o por la liberación intencional de aerosol (armas biológica....

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Protocolo

Este protocolo se adhiere a las siguientes pautas para el cuidado de los animales. Los animales fueron alojados en una instalación acreditada por la Asociación para la Evaluación y Acreditación de Laboratorio Animal Care International. Todos los procedimientos experimentales fueron aprobados por el Instituto Nacional de Alergia y Enfermedades Infecciosas, División de Investigación Clínica, Cuidado de Animales y el empleo y estaban en conformidad con los reglamentos de la Ley de Bienestar Animal, la política del Servicio de Salud Pública, y la Guía para el Cuidado y Uso de recomendaciones Animales de laboratorio.

1. Aerobio....

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Resultados

La cabina de bioseguridad de clase III (BSC) es un gabinete de acero inoxidable herméticamente sellada que contiene un entorno ABSL-4 bajo presión negativa dentro de un laboratorio gabinete ABSL-4 (Figura 1). Los materiales pueden ser introducidos en el BSC por el personal que trabaja en el laboratorio del gabinete ABSL-4 a través de un tanque de acero inoxidable montado debajo de los armarios (comúnmente conocida como un "tanque de agua" en ABSL-4 o BSL-4 ajus.......

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Discusión

Describimos los procedimientos de aerobiología utilizados en el IRF-Frederick para trabajar con altamente peligrosos (4) Grupo de Riesgo patógenos. Uno de los propósitos de la visualización de los procedimientos de bioaerosoles es hacer hincapié en la seguridad del personal cuando se utiliza un BSC Clase III durante la experimentación con estos patógenos para evitar las infecciones adquiridas en el laboratorio. BSC de clase III mantienen un flujo de aire direccional hacia el interior que agota en filtros HEPA dobles par.......

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Divulgaciones

Los autores no tienen nada que revelar.

Agradecimientos

El contenido de esta publicación no refleja necesariamente los puntos de vista o las políticas del Departamento de Salud y Servicios Humanos de los Estados Unidos (DHHS) o de las instituciones y empresas afiliadas a los autores. Este trabajo fue financiado en parte a través del contrato principal del Battelle Memorial Institute con el Instituto Nacional de Alergias y Enfermedades Infecciosas de los Estados Unidos (NIAID) bajo el Contrato No. HHSN272200700016I. J.K.B., K.J., M.R.H., D.P., L.B. y J.W. realizaron este trabajo como empleados del Battelle Memorial Institute. Los subcontratistas del Battelle Memorial Institute que realizaron este trabajo son: J.H.K., un emp....

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
Micro-Chem PlusLaboratorios Químicos Nacionales255
Etanol Pescador 
ParaformaldehídoSigma-Aldrich441244
Clase III BSCGermfreeDGB-10
Guantes BSC integradosPiercan10UY2032-9
Plataforma de Gestión de Aerosoles (AeroMP)Biaera TechnologiesNA
Pletismografía de cabeza Buxco/Data Sciences InternationalNA
Pletismografía inductiva respritoriaSciences InternationalNA
Generador de aerosoles tangencial de flujo centrado (CenTAG)CH TechnologiesNA
Nebulizador CollisonBGI Inc. CN25
AutoclaveGetingeGEB 2404 AMB-2
Sperian Traje de presión positivaHoneywell Safety ProductsBSL 4-2
Guantes de traje exterior (látex, Ansell Canners and Handlers)Fisher19-019-601
Guantes de traje exterior (nitrilo/caucho, MAPA)Fisher2MYU1
ScrubsCintas60975/60976
CalcetinesCintas944
Cinta adhesivaPack-N-Tape51131069695
ToallasCintas2720
juntas tóricastórica almacénAS568-343
CubrezapatosAmazonB0034KZE22
Lubricante ZipAmazonB000GKBEJA
BP2818500 Data Junta

Referencias

  1. Alibek, K., Handelman, S. The chilling true story of the largest covert biological weapons program in the world-told from inside by the man who ran it. , Random House. New York, NY. (1999).
  2. Roy, C. J., Pitt, L. M. Infectious disease aerobiology: aerosol challenge methods. Biodefens....

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Reimpresiones y permisos

Etiquetas

Laboratorio ABSL 4Cabina de Seguridad Biol gica Clase IIIInvestigaci n en Aerobiolog aExposici n de Primates No HumanosFuncionalidad del Puerto de Transferencia R pidaDescontaminaci n mediante Tanque de Inmersi nPletismograf a Inductiva RespiratoriaFuncionamiento del Generador de AerosolesMedios de Recolecci n del BiosamplerMantenimiento de la Presi n Negativa