Las adherencias abdominales que se forman después de la cirugía son una causa importante de dolor, infertilidad y hospitalización y reintervención por obstrucción del intestino delgado. Nuestro procedimiento quirúrgico para la creación de adherencias abdominales en ratones es una herramienta fiable para estudiar los mecanismos que subyacen a la formación de adherencias.
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Artículo de método
Creación de abdominales adherencias en ratones
En este artículo
Resumen
Resumen
Las adherencias abdominales consisten en tejido fibrótico que se forma en el espacio peritoneal en respuesta a una lesión inflamatoria, generalmente cirugía o infección intraabdominal. Los mecanismos precisos que subyacen a la formación de adhesión son poco conocidos. Muchos compuestos y barreras físicas han sido probados por su capacidad para prevenir adherencias después de la cirugía con diferentes niveles de éxito. El ratón y la rata son modelos importantes para el estudio de las adherencias abdominales. En la literatura existen varias técnicas diferentes para la creación de adherencias en el ratón y la rata. Aquí describimos un protocolo que utiliza la abrasión del ciego con papel de lija y suturas colocadas en la pared lateral abdominal derecha. Se anestesia al ratón y se prepara el abdomen. Se crea una laparotomía de la línea media y se identifica el ciego. El papel de lija se utiliza para desgastar suavemente la superficie del ciego. A continuación, se colocan varias suturas en forma de ocho en el peritoneo de la pared lateral abdominal derecha. Se irriga la cavidad abdominal, se aplica una pequeña cantidad de almidón y se cierra la incisión. Hemos encontrado que esta técnica produce las adherencias más consistentes con la tasa de mortalidad más baja.
Introducción
Las adherencias abdominales son una forma de tejido cicatrizal que se forman en el abdomen, en respuesta a la inflamación, por lo general después de la cirugía o infección intraabdominal. Las adherencias son una causa importante de dolor abdominal crónico y la infertilidad, y son la causa más común de obstrucción del intestino delgado 1. La presencia de adherencias hace que la realización de una segunda operación abdominal más difícil y aumenta la probabilidad de complicaciones 2.
A pesar de años de investigación, los mecanismos que subyacen a la formación de adherencias siguen siendo poco conocidos. Se sabe que una ....
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Protocolo
El siguiente protocolo ha sido aprobado por el Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales de la Universidad de Stanford (IACUC) y cumple con todas las directrices éticas institucionales respecto al uso de los animales de investigación.
1. Creación de adherencias abdominales
- Iniciar el ratón en dieta de pienso antibiótico una semana antes del procedimiento.
- Autoclave los instrumentos quirúrgicos y de pre-calentamiento de la solución de irrigación con agua salina.
- Anestesiar al ratón usando 2% de isoflurano inhalado.
- Usando una cortadora de cabello seguido de una aplicación rápida (5-10 seg) d....
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Resultados
A los siete días después de la cirugía, el ciego y el colon ascendente, posiblemente, el hígado y asas de intestino delgado debe ser adherente a la pared abdominal del lado derecho. (Figura 8) tejido extirpado puede ser embebido y se seccionó y producirá excelentes cortes histológicos. (Figura 11, 12)
Cuando el procedimiento se realiza correctamente, 100% de los ratones debe tener adhere.......
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Discusión
Los pasos críticos en este procedimiento son: la abrasión a fondo el ciego sin causar perforación, la colocación de suturas en la pared lateral abdominal, y aplicando la cantidad correcta de almidón. Sólo aplique papel de lija para el ciego, o a una pequeña parte específica del intestino. El amplio uso de papel de lija en grandes cantidades de intestino delgado tiende a causar íleo significativa. Tenga cuidado para desgastar el ciego con la fuerza suficiente que la superficie se vuelve áspera, pero no tanto que las lágr.......
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Divulgaciones
Los autores declaran que no tienen intereses financieros en competencia.
Agradecimientos
MDL fue apoyada por el Colegio Americano de Cirujanos (AEC) Beca de Investigación Residente. MSH fue apoyado por el Instituto de Medicina Regenerativa de California (CIRM) la formación Clinical Fellow subvención TG2-01159. MSH, HPL, y MTL fueron apoyados por la Sociedad Americana de Cirujanos Maxilofaciales (ASMS) / Fundación Cirujanos Maxilofaciales (MSF) Premio Beca de investigación. HPL fue apoyado por el NIH subvención R01 GM087609 y un regalo de Ingrid Lai y Bill Shu en honor a Anthony Shu. HPL y MTL fueron apoyados por el Laboratorio Hagey Pediátrica Medicina Regenerativa y la Fundación Oak. MTL fue apoyada por el / Fondo Olivier Gunn.
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Almohadillas absorbentes Fisherbrand, 20" x 24" | Fisher Scientific | 14-206-62 | |
| Campo estéril poliforrado, 18" x 24" | Busse Hospital Desechables | 696 | Corte un agujero rectangular del tamaño apropiado |
| Isothesia isoflurano | Henry Schein | ||
| Fisherbrand Almohadilla de gasa de algodón estéril, 4" x 4" | Fisher Scientific | 22-415-469 | |
| Pomada oftálmica de vaselina Puralube, tubo de 1/8 oz | Dechra Veterinary Products | NDC 17033-211-38 | |
| Nair crema depilatoria | Church & Dwight Co. | 22339-05 | |
| Buprenex buprenorfina 0,3 mg/ml | Reckitt Benckiser Pharmaceuticals Inc. | NDC 12496-0757-5 | |
| Jeringa de insulina de 1 cc, 27 G | Becton Dickinson | 329412 | |
| Povidone Solución de preparación de yodo Medline | MDS093944H | ||
| Webcol hisopos de preparación para el alcohol | Covidien | 6818 | |
| Cinta de etiquetado de laberinto de uso general | VWR | 89097-912 | |
| Guantes quirúrgicos BioGel PI | Mö lnlycke Health Care | ALA42675Z | |
| Micro Pinzas con dientes | Roboz | RS-5150 | |
| Tijeras finas afiladas | Fine Science Tools | 14060-09 | |
| Pinzas dentadas rectas | Fine Science Tools | 11050-10 | |
| Destornillador de agujas Castro-Viejo | Fine Science Tools | 12565-14 | |
| grano 100 1/4 hoja de papel de lija | ACE Herrajes | 1010446 | Cortado en tiras |
| 4-0 sutura de seda, 30", aguja SH | Ethicon | K831 | |
| 7-0 PDS II sutura monofilamento absorbible, 30", aguja BV-1 | Ethicon | Z135 | Por lo general, viene de doble brazo. Corte la sutura en el punto medio para generar dos suturas utilizables. |
| Almidón de arroz | MP Biomedicals | 102955 | |
| cloruro de sodio al 0,9% | Baxter | BHL2F7121 | Warm hasta 37 ° C antes de usar |
| jeringa de 10 ml | Becton Dickinson | 309604 | |
| 6-0 Sutura trenzada absorbible Vicryl, 18", aguja cónica RB-1 | Ethicon | J212H | |
| 6-0 Ethilon monofilamento de nylon sutura, aguja P-3 de 18", | Ethicon | 1698G | |
| Tegaderm Película Transparente Estilo Marco, 6 cm x 7 cm | 3M | 1624W | Cortado por la mitad a lo largo |
Referencias
- Ellis, H., et al. Adhesion-related hospital readmissions after abdominal and pelvic surgery: a retrospective cohort study. Lancet. 353 (9163), 1476-1480 (1999).
- Brochhausen, C., et al. Current strategies and fut....
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Reimpresiones y permisos
