Celulares corrientes inducidas por Puff aplicación de GABA en rebanadas de cerebro

Yangjian Feng; Binliang Tang; Ming Chen; Li Yang

doi:10.3791/56387

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Artículo de método

Celulares corrientes inducidas por Puff aplicación de GABA en rebanadas de cerebro

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DOI:

10.3791/56387

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12 de octubre de 2017

Yangjian Feng^*¹^,² , Binliang Tang^*¹^,² , Ming Chen² , Li Yang¹^,³^,⁴^,⁵

¹School of Psychology, South China Normal University, ²School of Life Sciences, South China Normal University, ³Brain Science Institute, South China Normal University, ⁴Center for Studies of Psychological Application, South China Normal University, ⁵Guangdong Key Laboratory of Mental Health and Cognitive Science, South China Normal University

^* These authors contributed equally

En este artículo

Resumen

Describimos la técnica de soplo, que reactivos farmacológicos pueden ser administrados durante la grabación de la abrazadera del remiendo de célula entera y resaltar diversos aspectos de las características que son cruciales para su éxito.

Resumen

Administración farmacológica es de uso general cuando se realizan células completas-abrazadera del remiendo en rebanadas de cerebro. Uno de los mejores métodos de aplicación de la droga durante la grabación electrofisiológica es la técnica de soplo, que puede utilizarse para estudiar el efecto de reactivos farmacológicos en actividades neuronales en rebanadas de cerebro. La mayor ventaja del uso del hojaldre es que la concentración del fármaco en el sitio de grabación aumenta rápidamente, evitando así la desensibilización de receptores de membrana. Exitosa aplicación del soplo implica especial atención a los siguientes elementos: la concentración del fármaco, los parámetros de la micropipeta de hojaldre, la distancia entre la punta de una micropipeta de hojaldre y la neurona registrada y la duración y presión conduce el soplo (libras por pulgada cuadrada, psi). Este artículo describe un procedimiento paso a paso para registrar celulares corrientes inducidas por ácido gamma - aminobutírico (GABA) en una neurona de un segmento cortical prefrontal de soplar. En particular, el mismo procedimiento se puede aplicar con pequeñas modificaciones a otras áreas del cerebro como el hipocampo y el striatum y a diferentes preparaciones, tales como los cultivos celulares.

Introducción

La técnica de patch-clamp, una herramienta primaria para la investigación de las señales eléctricas en las neuronas, se desarrolló en la década de 1970¹^,². Una gran ventaja de esta técnica es que proporciona conocimiento sobre tratamientos específicos cómo (por ejemplo, farmacológicas) pueden alterar las funciones neuronales o canales en tiempo real³. Evaluación farmacológica de la función neuronal durante la grabación en una rebanada del cerebro de células completas requiere la aplicación de fármacos, como agonistas o antagonistas de receptores específicos, las neuronas se registran. E....