El modelo murino fractura cerrada de fémur es una poderosa plataforma para el estudio de fracturas y nuevas estrategias terapéuticas para acelerar la regeneración ósea. El objetivo de este protocolo quirúrgico es generar fracturas femorales cerradas unilaterales en ratones con una varilla intramedular de acero para estabilizar el fémur.
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Artículo de método
La generación de fracturas femorales cerradas en ratones: un modelo para el estudio del hueso curativo
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Resumen
Resumen
Fracturas óseas imponen una tremenda carga socio-económica en pacientes, además de afectar de manera significativa su calidad de vida. Estrategias terapéuticas que promueven la cicatrización ósea eficiente son inexistentes y en alta demanda. Modelos animales eficaces y reproducibles de curación de las fracturas son necesarios para entender los complejos procesos biológicos asociados a la regeneración del hueso. Muchos modelos animales de curación de fractura se han generado durante los años; sin embargo, modelos murinos fractura recientemente han surgido como poderosas herramientas para el estudio de cicatrización ósea. Se han desarrollado una variedad de modelos abiertos y cerrados, pero el modelo de fractura cerrada de fémur se caracteriza por ser un método sencillo para generar resultados rápidos y reproducibles de manera fisiológicamente relevante. El objetivo de este protocolo quirúrgico es generar fracturas femorales cerradas unilaterales en ratones y facilitar una estabilización de la fractura del fémur mediante la inserción de una varilla intramedular de acero. Aunque los dispositivos tales como un clavo o un tornillo ofrecen una mayor estabilidad axial y rotacional, el uso de una varilla intramedular proporciona una suficiente estabilización consistentes resultados curativos sin producir nuevos defectos en el tejido óseo o dañar cerca suave tejido. Proyección de imagen radiográfica se utiliza para supervisar la progresión de la formación de callo ósea Unión y posterior remodelación del callo óseo. Resultados curación ósea son típicamente asociados con la fuerza del hueso sanado y medidos con pruebas de torsión. Aún, comprender el tempranos eventos celulares y moleculares asociados con la reparación de la fractura es fundamental en el estudio de la regeneración del tejido óseo. El modelo de fractura cerrada de fémur en ratones con fijación intramedular sirve como una plataforma atractiva para estudiar hueso fractura cura y evaluar estrategias terapéuticas para acelerar la curación.
Introducción
Fracturas son las lesiones más comunes que ocurren en el sistema músculo-esquelético y se asocian con una enorme carga socioeconómica, incluyendo los costos de tratamiento que se prevé para superar los $ 25 billones al año en los Estados Unidos1, 2. Aunque la mayoría de las fracturas cura sin incidente, curación se asocia con considerable tiempo de inactividad y pérdida de productividad. Aproximadamente 5-10% de todas las fracturas de resultar en un retraso cicatrización o no sindicalizados, debido a la edad u otras condiciones crónicas de salud subyacentes, tales como osteoporosis y diabetes mellitus
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Protocolo
El procedimiento se realizó con la aprobación de la Indiana University School de medicina institucional Animal Care y el Comité uso (IACUC). Todas las cirugías de supervivencia se realizaron bajo condiciones estériles como se indica en las directrices de los NIH. Dolor y el riesgo de infecciones fueron manejados con analgésicos apropiados y antibióticos para asegurar un resultado exitoso.
1. anestesia y preparación
- Peso del ratón y anestesiar con una mezcla de ketamina (100 mg/kg) y xilacina (10 mg/kg) administrado a través de la ruta del intraperitoneal (I.P.). Coloque el ratón en una jaula vacía y vigilar hasta que está....
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Resultados
La exitosa implementación de la intervención quirúrgica fue supervisada con proyección de imagen radiográfica. Pasos clave incluyen la inserción de una aguja intramedular, la colocación de un alambre de guía, la inducción de una fractura transversal en el midshaft femoral y la estabilización adecuada con una varilla intramedular (figura 2A - 2Aiv). La progresión de la curación del callo de fractura fue supervisada con imágene.......
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Discusión
El objetivo de este procedimiento quirúrgico es generar fracturas femorales cerradas estandarizadas en ratones. Una ventaja clave de este modelo es que la fijación interna ocurre después de la generación de la fractura, evitando así una forma angular de la varilla intramedular. Quizás el aspecto más crítico de este protocolo es la generación de una fractura transversal estandarizada en el midshaft femoral, como la geometría de fractura depende de la fuerza de doblado aplicada y el posicionamiento de las extremidades. Col.......
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Divulgaciones
Los autores de este manuscrito no tienen nada que revelar. El estado más de autores que no existen restricciones sobre el acceso completo a todo el material utilizado en el estudio divulgado en este manuscrito.
Agradecimientos
Este trabajo fue financiado por donaciones desde el Departamento de defensa (DoD) nos ejército investigación médica y material comando (USAMRMC) Congreso dirigido médicos investigación programas (CDMRP) (PR121604) y los institutos Nacional de artritis y lesiones músculo-esqueléticas y piel (NIAMS), NIH R01 AR068332 a Uma Sankar.
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Recortadora Oster Minimax | Animal World Network | 78049-100 | |
| POVIDONA-YODO | Thermo Fisher Scientific | 395516 | |
| POMADA OPTHALMIC | Thermo Fisher Scientific | NC0490117 | |
| Styker T/Pump Recirculador de agua caliente | Kent Scientific Corporation | TP-700 | |
| Jeringa Sub-Q de 1 ml | Thermo Fisher Scientific | ||
| ENCORE Sensi-Touch PF | Moore Medical LLC | 30347 | Guante quirúrgico de látex, sin polvo |
| Agujas hipodérmicas PrecisionGlide 25G | Thermo Fisher Scientific | 14-826-49 | |
| Alambre de tungsteno de ultra alta temperatura, | McMaster-Carr | 3775K37 | 0.005" de diámetro, carrete de 1/16 lb, acero inoxidable 304 de 380' de largo |
| , tubo de pared delgada de 24G | Microgroup Inc | 304h24tw-5ft | |
| #15 Hojas de bisturí Herramientas | ciencia fina | 10015-00 | |
| #10 Hojas de bisturí Herramientas | ciencia fina | 10010-00 | |
| Pinzas de patrón estrecho | Herramientas de ciencia fina | 11002-12 | Dentado/Recto/12cm |
| Pinzas de iris | Herramientas de ciencia fina | 11066-07 | 1x2 dientes/rectos/7cm |
| Tijeras de disector | Fine Science Tools | 14081-09 | Hojas delgadas/Inclinadas hacia un lado/Afiladas-afiladas/10cm |
| Tijeras finas | Fine Science Tools | 14058-11 | ToughCut/Recto/Afilado-Afilado/11,5 cm |
| Portaagujas Olsen-Hegar con cortador de suturas | Fine Science Tools | 12002-12 | Recto/Dentado/12cm/con bloqueo |
| Crile Hemostat | Fine Science Tools | 13004-14 | Cortador de alambre de tungsteno dentado / recto / 14 cm |
| ACE Surgical Supply Co., Inc. | 08-051-90 | ACE #150 Cortador de alambre, puntas de carburo de tungsteno | |
| 3-0 Sutura VICRYL | Sutura Ethicon | J423H | 3-0 VICRYL SIN TEÑIR 27" FS-2 CORTE |
| piXarray 100 Sistema de radiografía digital de muestras Bioptics | , Inc | Sistema de rayos X para gabinete | |
| Einhorn Dispositivo de flexión de 3 puntos | N/A | N/A | Hecho a medida |
Referencias
- Schnell, S., Friedman, S. M., Mendelson, D. A., Bingham, K. W., Kates, S. L. The 1-Year Mortality of Patients Treated in a Hip Fracture Program for Elders. Geriatric Orthopaedic Surgery & Rehabilitation. 1 (1), 6-14 (2010).
- Burge, R., et al.
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Reimpresiones y permisos
