Este protocolo describe la implantación de stents coronarios humanos en la aorta abdominal de ratas con un apoE-/- fondo usando un acceso transporte-femoral. En comparación con otros modelos animales, los modelos murinos tienen las ventajas de un alto rendimiento, reproducibilidad, facilidad de manejo y alojamiento, y una amplia disponibilidad de marcadores moleculares.
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Artículo de método
Implantación De Stents Coronarios De Tamaño Humano En La Aorta Abdominal De Rata Usando Un Acceso Trans-Femoral
* These authors contributed equally
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Resumen
Resumen
La intervención coronaria percutánea (ICP), combinada con el despliegue de un stent coronario, representa el patrón oro en el tratamiento intervencionista de la enfermedad arterial coronaria. La reestenosis en stent (ISR) está determinada por una proliferación excesiva de tejido neointimal dentro del stent y limita el éxito a largo plazo de los stents. Una variedad de modelos animales se han utilizado para aclarar los procesos fisiopatológicos subyacentes a la reestenosis en stent (ISR), siendo los modelos porcinos coronarios y de la arteria ilíaca del conejo los más frecuentemente utilizados. Los modelos murinos proporcionan las ventajas de un alto rendimiento, facilidad de manejo y alojamiento, reproducibilidad y una amplia disponibilidad de marcadores moleculares. El modelo de ratón deficiente en apolipoproteína E (apoE-/-) ha sido ampliamente utilizado para estudiar enfermedades cardiovasculares. Sin embargo, los stents deben ser miniaturizados para ser implantados en ratones, lo que implica cambios importantes de sus propiedades mecánicas y (potencialmente) biológicas. El uso de apoE-/- las ratas pueden superar estas deficiencias como apoE-/- las ratas permiten la evaluación de stents coronarios de tamaño humano mientras que al mismo tiempo proporcionan un fenotipo atherogenic. Esto los convierte en un modelo excelente y confiable para investigar la ISR después de la implantación del stent. Aquí, describimos, detalladamente, la implantación de stents coronarios humanos disponibles en el comercio en la aorta abdominal de ratas con un apoE-/- fondo usando un acceso transporte-femoral.
Introducción
La intervención coronaria percutánea (ICP), combinada con el despliegue de un stent coronario, representa el patrón oro en el tratamiento intervencionista de la enfermedad arterial coronaria1. El éxito a largo plazo de los stents, sin embargo, puede verse limitado por la aparición de reestenosis en stent (ISR) que está determinada por una proliferación excesiva de tejido neointimal dentro del stent2,3. La ISR puede requerir una reintervención con revascularización coronaria o re-ICP. Se han sugerido una variedad de modelos animales para el estudio de la ISR, cada uno de ellos con ventaj....
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Protocolo
Los experimentos se realizaron de conformidad con la ley alemana de bienestar animal (TSchG) y la Directiva 2010/63/UE relativa a la protección de los animales utilizados con fines científicos. La aprobación oficial para este estudio fue otorgada por el Comité Gubernamental de Cuidado y Uso de Animales (Protocolo No.: AZ 87-51.04.2010.A065; Landesamt für Natur, Umwelt und Verbraucherschutz Nordrhein-Westfalen, Recklinghausen, Alemania). El protocolo de estudio cumplió con la Guía para el Cuidado y Uso de Animales de Laboratorio. El tratamiento del dolor postoperatorio se basa en las recomendaciones de la Sociedad Alemana para la Ciencia de Animales de Laboratorio (GV-....
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Resultados
Este protocolo describe la implantación de stent en la aorta abdominal de ratas utilizando una vía de acceso transfemoral (Figura 1). El primer punto central de este modelo animal es que permite el despliegue de stents coronarios de tamaño humano. Un stent coronario engarzado y montado en el globo disponible en el comercio se puede colocar en la aorta abdominal de ratas. Así, además, se puede aplicar el mismo principio de despliegue de stent que en humanos. Otra ventaja del uso de ratas es l.......
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Discusión
Este protocolo describe la implantación de stents coronarios de tamaño humano en la aorta abdominal de las ratas del apoE-/-. Vale la pena destacar varios aspectos técnicos. En primer lugar, se debe evitar un desajuste entre el tamaño del stent y el tamaño de la aorta. La colocación de un stent demasiado pequeño puede llevar a la malaposición del stent, mientras que la implantación de un stent que es demasiado grande para la aorta puede causar estiramiento excesivo, desgarro y lesión del vaso. Por lo tanto, re.......
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Divulgaciones
Los autores no tienen nada que revelar.
Agradecimientos
Nos gustaría dar las gracias a la Sra. Angela Freund por su inestimable asistencia técnica con la incrustación y la producción de diapositivas. También nos gustaría agradecer al Sr. Tadeusz Stopinski en el Instituto de Ciencia de Animales de Laboratorio y Cirugía Experimental por su perspicaz ayuda con el trabajo veterinario.
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Materiales
Equipo para la implantación de stents
Microscopio de disección Leica MZ9 Almohadilla térmica con control de
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Diet | |||
| SNIFF Dieta alta en grasas + Clopidogrel (15 mg/kg) | SNIFF Spezialdiä ten GmbH, Soest | preparado a medida | Western Diet |
| Drugs and Anesthetics | |||
| Buprenorphine | Essex Pharma | 997.00.00 | |
| ISOFLO (Vapor de isoflurano) vaporizador | Eickemeyer | 4802885 | |
| Isoflurano | Forene Abbott | B 506 | |
| Solución isotónica (0,9%) de NaCl | DeltaSelect GmbH | PZN 00765145 | |
| Solución de lactato de Ringer | Baxter Deutschland GmbH | 3775380 | |
| (S)-ketamina | CEVA Alemania | ||
| Xilacina | Medistar Alemania | ||
| Suministros consumibles | |||
| Jeringas de 10 mL | BD Plastipak | 4606108V | |
| Jeringas de 2 mL | BD Plastipak | 4606027V | |
| 6-0 sutura de prolene | ETHICON | N-2719K | |
| 4-0 sutura de seda | Seraflex | IC 158000 | |
| Bepanthen Pomada para ojos y nariz | Bayer Vital GmbH | 6029009.00.00 | |
| Bastoncillos de gasa de algodón | Fuhrmann GmbH | 32014 | |
| Cinta de seda Durapore | 3M | 1538-1 | |
| Solución de desinfección cutánea con polialcohol | Antiseptica GmbH | 72PAH200 | |
| Aguja estéril 18 G | B. Braun | 304622 | |
| Aguja estéril 27 3/4 G | B.Braun | 4657705 | |
| Papel tisú | disponible | en el mercado | |
| Surgical instrument | |||
| Graefe fórceps curvos x1 | Fine Science Tools Inc. | 11151-10 | |
| Pinzas Graefe rectas | Fine Science Tools Inc. | 11050-10 | |
| Portaagujas Mathieu | Fine Science Tools Inc. | 12010-14 | |
| Tijeras | Fine Science Tools Inc. | 14074-11 | |
| Pinzas Semken | Fine Science Tools Inc. | 11008-13 | |
| Tijeras quirúrgicas pequeñas curvadas | Fine Science Tools Inc. | 14029-10 | |
| Tijeras quirúrgicas pequeñas rectas | Fine Science Tools Inc. | 14028-10 | |
| Pinzas de patrón estándar | Fine Science Tools Inc. | 11000-12 | |
| Tijeras de resorte Vannas | Fine Science Tools Inc. | 15000-08 | |
| Equipment | |||
| temperatura | Sygonix | 26857617 | |
| Stent liberador de fármacos Xience 2,25mm x 8mm | Abbott Vascular USA | 1009544-18 | |
| Alambre guía Fielder XT Alambre guía PTCA: 0.014" x 300cm | ASAHI INTECC CO., LTD Japón | AGP140302 | |
| Sistema de jeringa de inflado | Abbott 20/30 Priority Pack | 1000186 | |
| Procesamiento y análisis de tejidos | |||
| 30% H2O2 | Roth | 9681 | Histología |
| Etanol Roth | K928.1 | Histología | |
| Giemsas Azur-Eosin-Methylenblau | Merck | 109204 | Histología |
| Tableta de dibujo gráfico | WACOM Europe GmbH | CTL-6100WLK-S | |
| Roti Histofix, Formaldehído tamponado al 4% | Roth | P087 | Histología |
| Technovit 9100 | Morphisto | 12225.K1000 | Histología |
Referencias
- Patel, M. R., et al.
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Reimpresiones y permisos
