La microcirculación de la médula espinal juega un papel fundamental en la lesión de la médula espinal. La mayoría de los métodos no permiten la evaluación en tiempo real de la microcirculación de la médula espinal, que es esencial para el desarrollo de terapias dirigidas a la microcirculación. Aquí, proponemos un protocolo utilizando sondas Laser-Doppler-Flow Needle en un modelo animal grande de isquemia / reperfusión.
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Artículo de método
Evaluación en tiempo real de la microperfusión de la médula espinal en un modelo porcino de isquemia/reperfusión
En este artículo
Resumen
Resumen
La lesión de la médula espinal es una complicación devastadora de la reparación aórtica. A pesar de los avances para la prevención y el tratamiento de la lesión de la médula espinal, su incidencia sigue siendo considerablemente alta y, por lo tanto, influye en el resultado del paciente. La microcirculación juega un papel clave en la perfusión tisular y el suministro de oxígeno y a menudo se disocia de la macrohemodinámica. Por lo tanto, la evaluación directa de la microcirculación de la médula espinal es esencial para el desarrollo de terapias dirigidas a la microcirculación y la evaluación de los enfoques existentes con respecto a la microcirculación de la médula espinal. Sin embargo, la mayoría de los métodos no proporcionan una evaluación en tiempo real de la microcirculación de la médula espinal. El objetivo de este estudio es describir un protocolo estandarizado para la evaluación microcirculatoria de la médula espinal en tiempo real utilizando sondas de aguja Doppler con láser insertadas directamente en la médula espinal. Se utilizó un modelo porcino de isquemia/reperfusión para inducir el deterioro de la microcirculación de la médula espinal. Además, se utilizó una técnica de inyección de microesfera fluorescente. Inicialmente, los animales fueron anestesiados y ventilados mecánicamente. A partir de entonces, se realizó la inserción de la sonda de aguja Doppler con láser, seguida de la colocación del drenaje del líquido cefalorraquídeo. Se realizó una esternotomía mediana para la exposición de la aorta descendente para realizar el pinzamiento cruzado aórtico. La isquemia/reperfusión fue inducida por pinzamiento cruzado aórtico supracelíaco durante un total de 48 min, seguido de reperfusión y estabilización hemodinámica. El flujo láser-Doppler se realizó en paralelo con la evaluación macrohemodinámica. Además, se utilizó el drenaje automatizado del líquido cefalorraquídeo para mantener una presión cefalorraquídeo estable. Después de completar el protocolo, se sacrificaron animales y se recolectó la médula espinal para el análisis histopatológico y de microesferas. El protocolo revela la viabilidad de las mediciones de microperfusión de la médula espinal utilizando sondas Láser-Doppler y muestra una marcada disminución durante la isquemia, así como la recuperación después de la reperfusión. Los resultados mostraron un comportamiento comparable al de la evaluación de la microesfera fluorescente. En conclusión, este nuevo protocolo podría proporcionar un modelo animal grande útil para futuros estudios que utilicen la evaluación de microperfusión de la médula espinal en tiempo real en condiciones de isquemia / reperfusión.
Introducción
La lesión de la médula espinal inducida por isquemia/reperfusión (LME) es una de las complicaciones más devastadoras de la reparación aórtica asociada con un resultado reducido1,2,3,4. Las opciones actuales de prevención y tratamiento para la LME incluyen la optimización de los parámetros macrohemodinámicos, así como la normalización de la presión del líquido cefalorraquídeo (CSP) para mejorar la presión de perfusión de la médula espinal2,5,6,<....
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Protocolo
El estudio fue aprobado por la Comisión Gubernamental sobre el Cuidado y Uso de Animales de la Ciudad de Hamburgo (Referencia-No. 60/17). Los animales recibieron cuidados de conformidad con la 'Guía para el Cuidado y Uso de Animales de Laboratorio' (publicación de los NIH No. 86-23, revisada en 2011), así como las recomendaciones y experimentos de FELASA se llevaron a cabo de acuerdo con las pautas ARRIVE24,25. Este estudio fue un ensayo agudo, y todos los animales fueron sacrificados al final del protocolo.
NOTA: El estudio se realizó en seis cerdos machos y hembras de tres meses d....
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Resultados
Los seis animales sobrevivieron hasta la finalización del protocolo. El peso animal fue de 48,2 ± 2,9 kg; cinco animales eran machos y un animal era hembra. La inserción de la sonda de la aguja de la médula espinal, así como la medición del flujo de la médula espinal fue factible en todos los animales.
Ejemplos de registros microcirculatorios de la médula espinal en tiempo real en combinación con registros microcirculatorios cer.......
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Discusión
La LME inducida por la isquemia de la médula espinal es una complicación importante de la reparación aórtica con un tremendo impacto en el resultado del paciente1,2,3,4,10,11,12. Las terapias dirigidas a la microcirculación para prevenir y tratar la LME son las más prometedoras. El protocolo.......
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Divulgaciones
Constantin J.C. Trepte ha recibido un premio honorífico por las conferencias de Maquet. Todos los demás autores declaran no tener conflictos de intereses. Este estudio fue apoyado por la Sociedad Europea de Anestesiología Young Investigator Start-Up Grant 2018.
Agradecimientos
Los autores desean agradecer a Lena Brix, V.M.D, Instituto de Investigación Animal, Escuela de Medicina de Hannover, así como a la Sra. Jutta Dammann, Centro de Investigación de Cuidado de Animales, Centro Médico Universitario de Hamburgo-Eppendorf, Alemania, por proporcionar cuidado animal pre y perioperatorio y su asistencia técnica en el manejo de animales. Los autores desean además agradecer al Dr. Daniel Manzoni, Departamento de Cirugía Vascular, Hôpital Kirchberg, Luxemburgo, por su asistencia técnica.
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Caudalímetro CardioMed | Medistim AS, Oslo, Noruega | CM4000 | Caudalímetro para sonda de flujo Arteria femoral |
| Sonda de flujo CardioMed, 5mm | Medistim AS, Oslo, Noruega | PS100051 | Sonda de flujo Sonda de convivencia de la arteria femoral |
| , | Transonic Systems Inc., Ithaca, NY, EE. UU | . MA16PAU | Sonda de flujo Aorta |
| 16 mm liners | |||
| DIVA Sevoflurane Vapor | Drä ger Medical, Lü beck, Alemania | Línea | |
| Nivel 1 Calentador de fluidos | Smiths Medical Germany GmbH, Grasbrunn, Alemania | HL-90-DE-230 | Calentador de fluidos |
| Infinity Delta | Drä ger Medical, Lü beck, Alemania | Hardware de monitoreo básico | |
| Infinity Hemo | Drä ger Medical, Lü beck, Alemania | Hardware básico de monitorización de la presión y termodilución pulmonar LabChart | |
| Pro | ADInstruments Ltd., Oxford, Reino Unido | v8.1.16 | Láser Doppler sincrónico, presión arterial, ECG y flujo sanguíneo Software de adquisición |
| LiquoGuard 7 | Mö ller Medical GmbH, Fulda, Alemania | Sistema de drenaje de líquido cefalorraquídeo | |
| Catéter de presión Millar Micro-Tip (5F, Simple, Curvo, 120cm, PU/WD) | ADInstruments Ltd., Oxford, Reino Unido | SPR-350 | Catéter de punta de presión Páramo de aorta |
| VMS LDF páramo | Instrumentos, Devon, Reino Unido | Designado Láser-Doppler Hardware | |
| investigación VMS | moor Instruments, Devon, Reino Unido | Módulo de flujo perivascular designado por software láser-Doppler | |
| Transonic Systems Inc., Ithaca, NY, EE. UU | TS 420 | Módulo de flujo para aorta con sonda de flujo | |
| PiCCO 2, versión científica | Getinge AB, Gö teborg, Suecia | v. 6.0 | Monitorización de la presión arterial y transcardiopulmonar Hardware y software |
| PiCCO 5 Fr. 20cm | Getinge AB, Gö teborg, Suecia | Línea arterial con punta de termistor | |
| PowerLab | ADInstruments Ltd., Oxford, Reino Unido | PL 3516 | Láser Doppler sincrónico, presión arterial, ECG y flujo sanguíneo Hardware de |
| QuadBridgeAmp | ADInstruments Ltd., Oxford, Reino Unido | FE 224 | Amplificador de puente de cuatro canales para láser Doppler y presión arterial invasiva |
| Silverline Silverline | Spiegelberg, Hamburgo, Alemania | ELD33.010.02 | Drenaje |
| de líquido cefalorraquídeoPaquete de software estadístico SPSS | IBM SPSS Statistics Inc., Armonk, Nueva York, EE. UU | . v. 27 | Software estadístico |
| Twinwarm Warming System | Moeck & Moeck GmbH, Hamburgo, Alemania | 12TW921DE | Sistema de calentamiento |
| Universal II Manta térmica | Moeck & Moeck GmbH, Hamburgo, Alemania | 906 | Manta calefactora |
| VP 3 Sonda, 8 mm de longitud (fabricada individualmente) | moor Instruments, Devon, Reino Unido | Sonda Laser-Doppler | |
| Zeus | Drä ger Medical, Lü beck, Alemania | Máquina de anestesia |
Referencias
- Etz, C. D., et al. Contemporary spinal cord protection during thoracic and thoracoabdominal aortic surgery and endovascular aortic repair: a position paper of the vascular domain of the European Association for Cardio-Thoracic Surgerydagger. The European Journal of Cardio-Thoracic Surgery.
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Reimpresiones y permisos
