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Artículo de método

Modelo de trasplante parcial de extremidades posteriores heterotópicas en ratas

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DOI:

10.3791/62586

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9 de junio de 2021

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En este artículo

Resumen

Este trabajo presenta un protocolo de trasplante de colgajo osteomiocutáneo heterotópico parcial en ratas y sus posibles resultados en el seguimiento a medio plazo.

Resumen

Los alotrasplantes compuestos vascularizados (ACV) representan la opción de reconstrucción más avanzada para pacientes sin posibilidades quirúrgicas autólogas después de un defecto tisular complejo. Los trasplantes de cara y mano han cambiado la vida de los pacientes, dándoles un nuevo órgano social estético y funcional. A pesar de los resultados prometedores, el ACV sigue teniendo un rendimiento inferior debido a las comorbilidades de inmunosupresión de por vida y las complicaciones infecciosas. La rata es un modelo animal ideal para estudios in vivo que investigan vías inmunológicas y mecanismos de rechazo del injerto. Las ratas también se utilizan ampliamente en nuevas técnicas de preservación de injertos de tejido compuesto, incluidos los estudios de perfusión y criopreservación. Los modelos utilizados para el ACV en ratas deben ser reproducibles, fiables y eficientes con baja morbilidad y mortalidad postoperatoria. Los procedimientos de trasplante de extremidades heterotópicas cumplen con estos criterios y son más fáciles de realizar que los trasplantes de extremidades ortotópicas. Dominar los modelos microquirúrgicos de roedores requiere una sólida experiencia en microcirugía y cuidado de animales. Aquí se informa un modelo confiable y reproducible de trasplante parcial de colgajo osteomiocutáneo heterotópico en ratas, los resultados postoperatorios y los medios de prevención de posibles complicaciones.

Introducción

En las últimas dos décadas, VCA ha evolucionado como un tratamiento revolucionario para pacientes que sufren desfiguración severa, incluyendo cara1,amputaciones de miembros superiores2,pene3y otros defectos tisulares complejos4,5. Sin embargo, las consecuencias de la inmunosupresión de por vida aún dificultan una aplicación más amplia de estas complejas cirugías reconstructivas. La investigación básica es crucial para mejorar las estrategias contra el rechazo. Aumentar el tiempo de preservación de VCA también es esencial para mejorar la lo....

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Protocolo

Todos los animales recibieron atención humana de acuerdo con la Guía de los NIH para el Cuidado y Uso de Animales de Laboratorio. El Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales (protocolo IACUC 2017N000184) y la Oficina de Revisión de Cuidado y Uso de Animales (ACURO) aprobaron todos los protocolos de animales. Se utilizaron ratas Lewis macho endogámicas (250-400 g) para todos los experimentos.

1. Cirugía

  1. Anestesiar a las ratas Lewis usando inhalación de isoflurano. Inducir anestesia con isoflurano al 5% en la cámara de inducción, y mantener la anestesia con inhalación de isoflurano al 1,5-3% a través de un cono respiratorio....

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Resultados

En este estudio de operador único, se realizaron 30 trasplantes parciales de extremidades heterotópicas singénicas. El éxito se definió en el día 21 postoperatorio como la ausencia de fracaso del ACV o complicaciones que requieren eutanasia. La evolución normal del injerto se representa en la Figura 3. La duración media de la obtención parcial de la extremidad y el recuadro del injerto en el receptor fue de 35 y 105 min, respectivamente; el tiempo medio de isquemia fue de 105 min. Durante el.......

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Discusión

En la literatura se han descrito modelos de trasplante ortotópico de extremidades en roedores15,16,17; sin embargo, requieren una reparación nerviosa, reinserción muscular y una osteosíntesis perfecta del fémur, lo que puede ser un paso muy difícil. Estos modelos también se asocian con una mayor tasa de morbilidad y mortalidad en roedores14,especialmente en el seguimiento a corto plazo ya que la recuperac.......

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Divulgaciones

Los autores no tienen revelaciones.

Agradecimientos

Este trabajo fue apoyado por la Oficina del Subsecretario de Defensa para Asuntos de Salud a través del Programa de Investigación Médica Dirigida por el Congreso bajo el Premio No. W81XWH-17-1-0680. Las opiniones, interpretaciones, conclusiones y recomendaciones son las de los autores y no están necesariamente respaldadas por el Departamento de Defensa.

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
24 GA angiocatéterBD Insyte Autoguard381412
sutura 4-0 Monofilamento negro sutura no absorbibleEthicon1667Se utiliza para suturar el collar E a la nuca
4-0 sutura Recubierta Vicryl Plus AntibacterianaEthiconVCP496
Adson Pinzas para tejidos, 11 cm, 1 x 2 dientes con plataforma de atadoASSIASSI.
Cordones bipolaresASSI228000C
Poliamida Negra Monofilamento USP 10-0, 4 mm 3/8cAROSurgicalT04A10N07-13Se utiliza para realizar las anastomosis microvasculares
Buprenorfina HClPharmaceutical, Inc42023-179-01
Pinzas de dilataciónHerramientas de ciencia fina (FST)18131-12
Tijeras de disección de 15 cm, mango redondo de 8 mm de diámetro, hoja cónica recta delgada de 7 mm, patrón de LipshultzASSIASSI.
Micro Abrazaderas Dobles 5,5 x 1,5 mmHerramientas de ciencia fina (FST)18040-22
Collar isabelinoPinza Braintree ScientificEC-R1
13,5 cm de largo, Mango Plano, 9 mm de ancho Puntas rectas de 0,1 mm de diámetro (x2)ASSIASSI. JFL31
Halsey Micro Needle HolderFine science tools (FST)12500-12
Heparin Lock Flush Solution, USP, 100 unidades/mLBD PosiFlush306424
IsofluranoPatterson Veterinary14043-704-06
Pinzas Bipolares para Joyeros Antiadherente 11 cm, punta recta, diámetro de la puntaASSIASSI.
tirantes elásticos Lone StarCooperSurgical3314-8GSe utiliza para retraer el ligamento inguinal para la disección de vasos femorales
Retractores autorretenedores Lone StarCooperSurgical3301G
Micro-Mosquito Hemostats Herramientas deciencia fina (FST)13010-12Se utiliza para retraer distalmente
la almohadilla de grasa inguinalPortaagujas, mango redondo de 15 cm, 8 mm de diámetro, mordaza curvada superfina de 0,2 mm de diámetro de punta, sin bloqueoASSIASSI. B1582
Sutura de nylon Monolfilamento negro 8-0, 6,5 mm 3/8cEthilon2808GSe utiliza para ligar ramas colaterales en los vasos femorales
Alicates óseos compensadosHerramientas de ciencia fina (FST)16101-10
S& T Pinzas vasculares 5,5 x 1,5 mmHerramientas de ciencia fina (FST)00398-02
Tijeras WaltonHerramientas de ciencia fina (FST)14077-09
ATK26426SAS15RVLBPNS11223

Referencias

  1. Lanteiri, L., et al. Feasibility, reproducibility, risks and benefits of face transplantation: a prospective study of outcomes. American Journal of Transplantation. 11 (2), 367-378 (2011).
  2. Park, S. H., Eun, S. C., Kwon, S. T.

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