Presentamos un protocolo para la utilización de un sistema de perfusión sanguínea normotérmica ex vivo para la administración de terapias a un aloinjerto cardíaco completo en un modelo de trasplante de corazón heterotópico porcino.
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Artículo de método
Un protocolo de trasplante de corazón heterotópico porcino para la administración de terapias a un aloinjerto cardíaco
En este artículo
Resumen
Resumen
El trasplante cardíaco es el tratamiento estándar de oro para la insuficiencia cardíaca en etapa terminal. Sin embargo, sigue estando limitado por el número de corazones de donantes disponibles y complicaciones como la disfunción primaria del injerto y el rechazo del injerto. El reciente uso clínico de un dispositivo de perfusión ex vivo en el trasplante cardíaco presenta una oportunidad única para tratar los aloinjertos cardíacos con intervenciones terapéuticas para mejorar la función y evitar respuestas perjudiciales del receptor. El establecimiento de un modelo traslacional de animales grandes para la administración terapéutica a todo el aloinjerto es esencial para probar nuevos enfoques terapéuticos en el trasplante cardíaco. El modelo de trasplante cardíaco heterotópico porcino en posición intraabdominal sirve como un excelente modelo para evaluar los efectos de las intervenciones novedosas y la inmunopatología del rechazo del injerto. Este modelo también ofrece supervivencia a largo plazo para el cerdo, dado que el injerto no es necesario para mantener la circulación del receptor. El objetivo de este protocolo es proporcionar un enfoque reproducible y robusto para lograr la administración ex vivo de una terapia a todo el aloinjerto cardíaco antes del trasplante y proporcionar detalles técnicos para realizar un trasplante heterotópico de supervivencia del corazón perfundido ex vivo .
Introducción
La insuficiencia cardíaca es una afección que afecta a un estimado de 6 millones de adultos en los Estados Unidos y se proyecta que aumentará a 8 millones de adultos para el año 20301. El trasplante cardíaco es el tratamiento estándar de oro para la insuficiencia cardíaca en etapa terminal. Sin embargo, no está exento de limitaciones y complicaciones. Sigue estando limitado por el número de corazones de donantes disponibles, la disfunción primaria del injerto, el rechazo del corazón y los efectos secundarios de la inmunosupresión a largo plazo2. Estas limitaciones son particularmente importantes en los receptores jóvenes....
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Protocolo
NOTA: Se seleccionan dos hembras de cerdo yucateco, una designada para ser la donante de injerto cardíaco y la otra como receptora. Se recomiendan cerdos de 6 a 8 meses de edad, que pesen aproximadamente 30 kg y tengan tipos de sangre compatibles. La visión general del protocolo se muestra en la Figura 1. El alojamiento y los procedimientos de tratamiento para los cerdos se realizan de acuerdo con las pautas del Comité de Cuidado y Uso de Animales del Centro Médico de la Universidad de Duke.
1. Preparación del dispositivo de perfusión ex vivo
- Prepare el dispositivo de per....
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Resultados
Este grupo ha sobrevivido con éxito a 9 cerdos entre 5 y 35 días siguiendo el protocolo presentado aquí, dependiendo del diseño del estudio. De cada 10 cerdos que se han sometido a este protocolo, solo 1 murió prematuramente por complicaciones quirúrgicas, lo que arrojó una tasa de supervivencia del 90%. En la Figura 2 se muestra un diagrama de la configuración de un corazón heterotópico trasplantado en posición intraabdominal en un cerdo. Al determinar el sitio para la anastomosis del aloin.......
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Discusión
La administración de terapias durante la perfusión ex vivo en el trasplante cardíaco ofrece una estrategia para modificar el aloinjerto y mejorar potencialmente los resultados del trasplante. El protocolo presentado aquí incorpora el almacenamiento de perfusión sanguínea normotérmica ex vivo de última generación y ofrece un potencial prometedor para probar la administración aislada de células, genes o inmunoterapias al aloinjerto 11,12,13.<.......
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Divulgaciones
Paul Lezberg es empleado de TransMedics, Inc. Carmelo Milano recibió una donación financiera de TransMedics, Inc. para financiar cirugías de trasplante de corazón heterotópico. Michelle Mendiola Pla cuenta con el apoyo de T32HL007101. Los demás autores no tienen conflictos de intereses que declarar.
Agradecimientos
Nos gustaría agradecer a Duke Large Animal Surgical Core y Duke Perfusion Services por su asistencia durante estos procedimientos. También nos gustaría agradecer a Paul Lezberg y TransMedics, Inc. por su apoyo.
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| 0 Sutura Maxon en bucle | Covidien | GMM-341L | Se utiliza para cerrar la fascia de la incisión de laparotomía |
| 0 Bridas de seda | Medtronic, Inc | S346 | |
| 18 G Angiocath | BD 381144 | Se utiliza para desairear el ventrículo izquierdo del corazón del donante después de la implantación | |
| 20 Fr LV vent | Medtronic, Inc | 12002 | |
| 2-0 Suturas de seda | Ethicon, Inc. | SA11G | |
| 2-0 Corbatas de seda | Ethicon, Inc. | SA65H | |
| 2-0 Sutura de vicryl | Ethicon, Inc. | J259H | |
| 24 Cánula venosa Fr | Medtronic, Inc | 68124 | |
| 3-0 Suturas Prolene | Ethicon, Inc. | 8522 | |
| 4-0 Sutura monocrilativa | Ethicon, Inc. | Y469G | |
| 4-0 Suturas Prolene | Ethicon, Inc. | 8521 | |
| Cortapelos de animales | Wahl | 8786-452 | |
| Pinza aórtica | V. Mueller | CH6201 | |
| Retractor de la Armada del Ejército | V. Mueller | SU3660 | |
| ATF 40, Juego desechable de ahorro de células | Fresenius Kabi | 9108494 | Inserto de dispositivo de ahorro de células |
| Retractor Balfour | V. Mueller | SU3042 | Utilizado como retractor de pared abdominal |
| C.A.T.S protector de células | Fresenius Kabi | ES0019 | Dispositivo protector de células utilizado para lavar la sangre del donante |
| Desfibrilador cardíaco | Zoll | M Series | Desfibrilador cardíaco |
| Castro portaagujas | V. Mueller | CH8589 | |
| CG4 Cartuchos iStat | Abbott | 03P85-25 | Pruebas POC |
| Cartuchos CG8 iStat | Abbott | 03P88-25 | Pruebas POC |
| Pinzas DeBakey | V. Mueller | CH5902 | |
| Lápiz desechable de electrocauterización | Covidien | E2450H | |
| Pinzas Gerald | V. Mueller | NL1451 | |
| Hemotherm 400CE Enfriador/Calefactor de doble depósito | Cincinnati Sub-Zero | 86022 | Enfriador de calefacción utilizado para regular la temperatura de perfusión en la perfusión ex vivo dispositivo |
| iSTAT 1 | Abbott | 04P75-03 dispositivo de | prueba POC |
| Abrazadera Kocher | V. Mueller | SU2790 | |
| Aplicador de clips grandes | Sklar | 50-4300 | |
| Clips grandes | Teleflex | 4200 | |
| Prendas blandas grandes | Covidien 8886867901 | ||
| Aplicador de clips mediano | Sklar | 50-4335 | |
| Pinzas medianas | Teleflex | 2200 | |
| Metzenbaum tijera | V. Mueller | CH2006-001 | |
| Nº 10 hoja de bisturí | Swann-Mortan | 301 | Utilizado para la incisión en la piel |
| Nº 11 hoja de bisturí | Kiato Plus | 18111 | Utilizado para incisión vascular |
| Dispositivo OCS con base | TransMedics, Inc. | Dispositivo de perfusión ex vivo | |
| OCS desechable | TransMedics, Inc. | Inserto de dispositivo de perfusión ex vivo con kits de perfusión | |
| Cable de estimulación | Remington Medical | FL-601-97 | |
| Catéter de cardioplejia pediátrica (4Fr) | Medtronic, Inc | 10218 | Se utiliza para administrar cardioplejia a la raíz aórtica del donante |
| Catéter Foley pediátrico | Teleflex | RSH170003080 | Colocado antes de la operación para descomprimir la vejiga del receptor |
| Tijeras Potts | V. Mueller | CH13038 | |
| Bolsa de presión x2 (1.000 mL) | Novaplus | V4010H | Se utiliza para administrar cardioplejia a una presión establecida |
| Pinza Satinsky | V. Mueller | CH7305 | Pinza vascular utilizada para crear anastomosis entre el corazón del donante y los vasos del receptor |
| Tijeras | Felco FELCO | 200A-50 | Se utiliza para realizar esternotomías |
| Pequeñas prendas | durasCovidien | 8886867701 | |
| Retractor esternal | V. Mueller | CH6950-007 | |
| Cables de estimulación cardíaca temporales | Ethicon, Inc. | TPW32 | |
| Marcapasos temporal de doble cámara | Medtronic, Inc | 5388 | Dispositivo de estimulación cardíaca |
| Kit de torniquete | Medtronic, Inc | 79005 | Torniquetes Rummel |
| Cinta umbilical | Covidien | 8886861903 | |
| Bucles de vasos | Covidien 31145686 |
Referencias
- Virani, S. S., et al. Heart disease and stroke statistics-2021 update: A report from the American Heart Association. Circulation. 143 (8), 254(2021).
- Stehlik, J., Kobashigawa, J., Hunt, S. A., Reichenspurner, H., Kirklin, J. K.
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Reimpresiones y permisos
