Uso de una inyección de trazador celular para investigar el origen de las células formadoras de neointima en un modelo de pared lateral saccular de rata

Stefan Wanderer; Basil E. Grüter; Jeannine Kümin; Gwendoline Boillat; Sivani Sivanrupan; Kristina Catalano; Michael von Gunten; Hans Rudolf Widmer; Serge Marbacher; Lukas Andereggen

doi:10.3791/63580

Artículo de método

Uso de una inyección de trazador celular para investigar el origen de las células formadoras de neointima en un modelo de pared lateral saccular de rata

1.8K vistas

⸱

DOI:

10.3791/63580

⸱

16 de marzo de 2022

Stefan Wanderer^*¹^,² , Basil E. Grüter^*¹^,² , Jeannine Kümin¹^,² , Gwendoline Boillat¹^,² , Sivani Sivanrupan² , Kristina Catalano¹^,² , Michael von Gunten³ , Hans Rudolf Widmer⁴ , Serge Marbacher¹^,²^,⁵ , Lukas Andereggen¹^,²^,⁵

¹Department of Neurosurgery, Kantonsspital Aarau, ²Cerebrovascular Research Group, Department for BioMedical Research, University of Bern, ³Institute of Pathology Laenggasse, ⁴Department of Neurosurgery, Neurocenter and Regenerative Neuroscience Cluster, Inselspital, Bern University Hospital, University of Bern, ⁵Faculty of Medicine, University of Bern

^* These authors contributed equally

En este artículo

Resumen

Realizamos una inyección lipofílica de un punto para rastrear las células endoteliales, seguida de una arteriotomía y sutura de aneurismas de la pared lateral en la aorta abdominal de la rata. La formación de neointima parecía depender de la arteria madre en los aneurismas descelularizados y fue promovida por el reclutamiento de células de la pared del aneurisma en paredes vitales ricas en células.

Resumen

El recorte microquirúrgico crea una barrera posterior del flujo sanguíneo hacia los aneurismas intracraneales, mientras que el tratamiento endovascular se basa en la formación de neoíntima y trombo. La fuente de células endoteliales que cubren la capa endoluminal de la neoíntima sigue sin estar clara. Por lo tanto, el objetivo del presente estudio fue investigar el origen de las células formadoras de neointima después de la inyección de trazador celular en el modelo de aneurisma microquirúrgico de la pared lateral de la rata de Helsinki ya bien establecido.

Los aneurismas de la pared lateral se crearon suturando bolsas arteriales descelularizadas o vitales de extremo a lado de la aorta en ratas Lewis macho. Antes de la arteriotomía con sutura de aneurisma, se realizó una inyección de trazador celular que contenía colorante CM-Dil en la aorta sujetada para etiquetar las células endoteliales en el vaso adyacente y rastrear su proliferación durante el seguimiento (FU). Tratamiento seguido de enrollamiento (n = 16) o colocación de stent (n = 15). En la FU (7 días o 21 días), todas las ratas se sometieron a angiografía por fluorescencia, seguida de recolección de aneurismas y evaluación macroscópica e histológica con recuentos de células inmunohistológicas para regiones específicas de interés.

Ninguno de los 31 aneurismas se había roto en el seguimiento. Cuatro animales murieron prematuramente. Se observó perfusión macroscópicamente residual en el 75,0% en espiral y el 7,0% de las ratas con stent. La cantidad de células positivas para trazadores celulares se elevó significativamente en los stents descelularizados en comparación con los aneurismas en espiral con respecto al trombo en el día 7 (p = 0,01) y neointima en el día 21 (p = 0,04). No se encontraron diferencias significativas en trombos o neoíntimas en aneurismas vitales.

Estos hallazgos confirman peores patrones de curación en los aneurismas en espiral en comparación con los de stent. La formación de neointima parece particularmente dependiente de la arteria madre en los aneurismas descelularizados, mientras que está respaldada por el reclutamiento de las células de la pared del aneurisma en las paredes vitales ricas en células. En términos de traducción, el tratamiento con stent podría ser más apropiado para los aneurismas altamente degenerados, mientras que el enrollamiento solo podría ser adecuado para los aneurismas con paredes de vasos en su mayoría sanas.

Introducción

La hemorragia subaracnoidea causada por la ruptura de un aneurisma intracraneal (AI) es una condición neuroquirúrgica devastadora asociada con una alta morbilidad y mortalidad 1,2,3,4. Además del recorte microquirúrgico, que proporciona contacto directo de endotelio a endotelio, los dispositivos endovasculares han ganado cada vez más importancia en las últimas décadas para tratar las IA rotas e incidentalmente descubiertas. La respuesta de curación en las EA tratadas endovascularmente depende principalmente de la formación de neoíntima y la ....