Para desarrollar nuevas intervenciones terapéuticas para la prevención y el tratamiento del dolor de espalda, se requieren modelos animales para examinar los mecanismos y la efectividad de estas terapias desde una perspectiva traslacional. El presente protocolo describe la prueba BMS, un método estandarizado para evaluar la sensibilidad mecánica de la espalda en la rata.
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Artículo de método
Evaluación de la sensibilidad mecánica de la espalda en la rata para la investigación mecanicista del dolor de espalda crónico
En este artículo
Resumen
Resumen
El dolor lumbar es la principal causa de discapacidad en todo el mundo, con consecuencias personales, económicas y sociales dramáticas. Para desarrollar nuevas terapias, se necesitan modelos animales para examinar los mecanismos y la efectividad de las nuevas terapias desde una perspectiva traslacional. Varios modelos de roedores de dolor de espalda se utilizan en las investigaciones actuales. Sorprendentemente, sin embargo, no se validó ninguna prueba de comportamiento estandarizada para evaluar la sensibilidad mecánica en modelos de dolor de espalda. Esto es crítico para confirmar que los animales con presunto dolor de espalda presentan hipersensibilidad local a los estímulos nociceptivos, y para monitorear la sensibilidad durante las intervenciones diseñadas para aliviar el dolor de espalda. El objetivo de este estudio es establecer una prueba simple y accesible para evaluar la sensibilidad mecánica en la espalda de ratas. Se fabricó una jaula de prueba específicamente para este método; largo x ancho x alto: 50 x 20 x 7 cm, con una malla de acero inoxidable en la parte superior. Esta jaula de prueba permite la aplicación de estímulos mecánicos a la espalda. Para realizar la prueba, se afeita la espalda del animal en la región de interés, y se marca el área de prueba para repetir la prueba en diferentes días, según sea necesario. El umbral mecánico se determina con filamentos de Von Frey aplicados a los músculos paraespinales, utilizando el método arriba-abajo descrito anteriormente. Las respuestas positivas incluyen (1) espasmos musculares, (2) arqueamiento (extensión de la espalda), (3) rotación del cuello (4) rascarse o lamer la espalda, y (5) escapar. Esta prueba conductual (Back Mechanical Sensitivity (BMS)) es útil para la investigación mecanicista con modelos roedores de dolor de espalda para el desarrollo de intervenciones terapéuticas para la prevención y el manejo del dolor de espalda.
Introducción
El dolor lumbar (DL) es la principal causa de discapacidad en todo el mundo, lo que tiene consecuencias personales, económicas y sociales dramáticas 1,2,3,4. Cada año, aproximadamente el 37% de la población se ve afectada por LBP5. El dolor lumbar generalmente se resuelve en unas pocas semanas, pero recurre en el 24% -33% de los individuos, volviéndose crónico en el 5% -10% de los casos2. Para comprender los mecanismos e impactos del dolor lumbar, así como los efectos de diferentes intervencion....
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Protocolo
El protocolo experimental fue aprobado por el comité de cuidado animal de la Université du Québec à Trois-Rivières y se ajustó a las Directrices del Consejo Canadiense de Cuidado de los Animales y las Directrices del Comité de Investigación y Cuestiones Éticas de la Asociación Internacional para el Estudio del Dolor (IASP). El presente estudio utilizó seis ratas Wistar macho (peso corporal: 320-450 g; edad: 18-22 semanas). Los animales fueron obtenidos de una fuente comercial (ver Tabla de Materiales). Los datos de estas ratas provienen de la muestra más grande de un estudio previo30.
1. Prepar....
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Resultados
El método fue utilizado en un estudio previo, en el que se presentaron datos completos y estadísticas para comparar la sensibilidad mecánica de la espalda entre CFA y ratas control30. Los datos individuales representativos (media de los umbrales izquierdo y derecho) de seis ratas incluidas en el estudio anterior se presentan en la Figura 3 y la Tabla 1. Al inicio del estudio, la sensibilidad mecánica fue similar entre los grupos. La inyección intramus.......
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Discusión
Pasos críticos
La prueba BMS es un método simple para evaluar la sensibilidad mecánica en la espalda de ratas, ya sea en un momento dado o repetidamente durante días o semanas, cuando se espera que ocurran cambios (modelos de dolor) o después de una intervención farmacológica o no farmacológica. Los problemas críticos del método incluyen la jaula de prueba, cuyas dimensiones deben garantizar que la rata esté cómoda pero no se mueva demasiado. La espalda del animal debe permanecer accesible a través de.......
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Divulgaciones
Los autores declaran que no hay intereses o relaciones en conflicto que puedan conducir a conflictos de intereses.
Agradecimientos
Este trabajo fue apoyado por una subvención de la Fondation Chiropratique du Québec y el Consejo de Investigación de Ciencias Naturales e Ingeniería de Canadá (MP: subvención #06659). La contribución de HK fue apoyada por la Université du Québec à Trois-Rivières (programa PAIR). La contribución de BP fue apoyada por el Fonds de recherche du Québec en Santé (FRQS) y la Fondation Chiropratique du Québec. La contribución de TP fue apoyada por el Consejo de Investigación de Ciencias Naturales e Ingeniería de Canadá. La contribución de NE y EK fue apoyada por la Fondation Chiropratique du Québec. La contribución de MP fue apoyada por el FRQS.
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Aerrane (isoflurano, USP) - Solo para uso veterinario | Baxter | NDC 10019-773-60 | Anestésico inhalatorio ; DIN 02225875, para inducir la anestesia |
| Adyuvante Completo de Freund (CFA) | Fisher Scientific | #77140 | Emulsión de agua en aceite de Coadyuvante Completo de Freund (CFA) con células muertas de Mycobacterium butyricum. |
| Peso corporal de las ratas Wistar macho Charles | River Laboratories | 320– 450 g; Edad: 18-22 semanas. | |
| Penlon Sigma Delta Vaporizador | Penlon | 990-VI5K-SVEEK | Penlon Sigma Delta Vaporizador utilizado para la anestesia |
| Sharpie Marcador Permanente Sharpie | BC23636 | Sharpie Permanente, Punta Fina, Negro | |
| Jaula de prueba | a | Ancho: 20 cm; Longitud: 50 cm; Altura de abajo hacia arriba: 40 cm; Altura desde la malla inferior hasta la parte superior de la jaula: 7 cm; Espesor de la pared: 5 mm; Malla: alambre de 1 mm con una distancia entre hilos de 8 mm | |
| Von Frey | Filaments Aesthesio, Evaluador Sensorial Táctil Preciso | 514000-20C | Filamentos de 0,07 g a 26 g |
| Wahl Professional Animal, ARCO Cortadora de mascotas inalámbrica, Recortadora de aseo | Wahl | Kit #8786-1201 | Recortadora de pelo de animal, para afeitar, sin cuchillas |
Referencias
- Hartvigsen, J., et al. What low back pain is and why we need to pay attention. Lancet. 391 (10137), 2356-2367 (2018).
- Manchikanti, L., Singh, V., Falco, F. J., Benyamin, R. M., Hirsch, J. A. Epidemiology of low back pain in adults. Neuromodulation. 17, Suppl 2 3-10 (2014).
- Urits....
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Reimpresiones y permisos
