Este protocolo detalla los pasos quirúrgicos de la creación de fístula arteriovenosa ilíaca común murina. Desarrollamos este modelo para estudiar la fisiopatología de las extremidades relacionada con el acceso a la hemodiálisis.
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Artículo de método
Este protocolo detalla los pasos quirúrgicos de la creación de fístula arteriovenosa ilíaca común murina. Desarrollamos este modelo para estudiar la fisiopatología de las extremidades relacionada con el acceso a la hemodiálisis.
La enfermedad renal crónica es un importante problema de salud pública, y la prevalencia de la enfermedad renal terminal (ESRD) que requiere terapias de reemplazo renal crónicas como la hemodiálisis continúa aumentando. La colocación de fístula arteriovenosa autógena (FAV) sigue siendo una opción de acceso vascular primario para los pacientes con ESRD. Desafortunadamente, aproximadamente la mitad de los pacientes de hemodiálisis experimentan disfunción de la mano relacionada con el acceso a diálisis (ARHD), que va desde parestesia sutil hasta gangrena digital. En particular, los impulsores biológicos subyacentes responsables de la ARHD son poco conocidos, y no existe un modelo animal adecuado para dilucidar los mecanismos y / o desarrollar nuevas terapias para la prevención / tratamiento de ARHD. Aquí, describimos un nuevo modelo de ratón en el que se crea una FAV entre la arteria ilíaca común izquierda y la vena, facilitando así la evaluación de la fisiopatología de las extremidades. La microcirugía incluye aislamiento de vasos, venotomía longitudinal, creación de anastomosis arteriovenosa y reconstrucción venosa. Las cirugías simuladas incluyen todos los pasos críticos, excepto la creación de FAV. La colocación de FAV ilíaca da lugar a alteraciones clínicamente relevantes en la hemodinámica central, isquemia periférica y deficiencias en el rendimiento neuromotor de las extremidades posteriores. Este nuevo modelo preclínico de FAV proporciona una plataforma útil que recapitula las perturbaciones neuromotoras comunes informadas por los pacientes en hemodiálisis, lo que permite a los investigadores investigar los mecanismos de la fisiopatología de ARHD y probar posibles terapias.
El establecimiento y la preservación del acceso vascular funcional siguen siendo un objetivo primario importante para los pacientes con enfermedad renal terminal (ERT) que reciben terapia de reemplazo renal por hemodiálisis1. Los tratamientos repetidos de hemodiálisis son necesarios para eliminar los productos de desecho, normalizar los electrolitos y mantener el equilibrio de líquidos una vez que la función renal se vuelve inadecuada y, por lo tanto, son necesarios para la supervivencia a largo plazo2. Por lo tanto, el acceso vascular representa un "salvavidas" para los pacientes con ERT, y la colocación de fístula arte....
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Todos los procedimientos fueron aprobados por el Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales (IACUC) de la Universidad de Florida y el Centro Médico de Asuntos de Veteranos Malcom Randall.
NOTA: Los ratones machos C57BL / 6J adultos jóvenes (8-10 semanas de edad) se compraron en el Laboratorio Jackson y se alojaron en una instalación de animales controlada por luz (12 h luz: 12 h ciclo oscuro), temperatura (22 ° C ± 1 ° C) y humedad (50% ± 10%). Se permitió que cinco ratones habitaran por jaula (W: 18 cm x L: 29 cm x H: 12.5 cm) con materiales de anidación, alimentos y agua disponibles ad libitum. Después de 7 días de aclimat....
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Los animales expuestos a una dieta de adenina han reducido las tasas de filtración glomerular (control: 441,3 ± 54,2 μL/min vs. ERC: 165,1 ± 118,3 μL/min, p < 0,05) y un aumento de los niveles séricos de nitrógeno ureico en sangre (control: 20,39 ± 4,2 μL/min vs. ERC: 38,20 ± 10,65 μL/min, p < 0,05) en comparación con los animales que recibieron chow a base de caseína, confirmando la presencia de insuficiencia renal antes de la cirugía de fístula arteriovenosa.
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La prevalencia de pacientes en hemodiálisis con ARHD después de la creación de FAV ha continuado aumentando30,31. De hecho, las complicaciones sintomáticas no resueltas 4,32,33 como dolor, debilidad, parestesia y/o rango de movimiento reducido pueden afectar negativamente el bienestar del paciente 4,32,33,34,35,36 y amenaza.......
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Los autores no tienen nada que revelar.
Agradecemos sinceramente al Dr. Guanyi Lu de la División de Cirugía Vascular y Terapia Endovascular de la Universidad de Florida por el apoyo técnico en el desarrollo del modelo de FAV ilíaca, así como la capacitación quirúrgica, y a Ravi Kumar del Departamento de Fisiología Aplicada y Kinesiología de la Universidad de Florida por el apoyo técnico para obtener las imágenes microquirúrgicas en vivo.
Este trabajo fue apoyado por subvenciones de los Institutos Nacionales de Salud y Corazón Nacional, Pulmón y Sangre, números de instituto R01-HL148697 (a S.T.S.), así como el número de subvención de la Asociación Americana del Corazón POST903198 ....
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| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| 0,15% Adenina dieta | ENVIGO | TD.130899 | 20% caseína, 0,15% adenina, 0,9% P |
| 0,2% Adenina dieta | ENVIGO | TD.130900 | 20% caseína, 0,2% adenina, 0,9% P |
| 10-0 Sutura de nailon | AD quirúrgica | XXS-N1005T4 | |
| jeringas de aguja de 29 G | Exel International | 14-841-32 | |
| Jeringas de aguja de 31 G | Advocate | U-100 jeringa de insulina | |
| 4-0 sutura de seda | AD quirúrgico | S-S41813 | |
| pinza Dumont en ángulo de 45 grados | Fine Science Tools | 11253-25 | |
| 5-0 sutura PGA | AD quirúrgico | PSGU-518R13 | |
| 6-0 sutura de seda | AD quirúrgico | S-S618R13 | |
| Esponja de gelatina absorbible | ETHICON | 1975 | |
| Preparaciones con alcohol | Covidien | 5110-cs4000 | Alcohol isopropílico al 70% |
| Buprenorfina | NA NA | 0,01 g/mL | |
| C57BL6/J | ratones Jaxon | ||
| Dieta de caseína | ENVIGO | TD.130898 | 20% caseína, 0,9% P |
| Bastoncillos de algodón | CONSTIX | SC-9 | Bastoncillos de algodón redondos medianos de un solo extremo |
| Bastoncillos de algodón | CONSTIX | SC-4 | Pequeño bastoncillo de algodón duro, afilado y puntiagudo de doble punta |
| Curity esponjas no tejidas (2x2) | Covidien | 9022 | |
| Tijeras de resorte Vannas curvadas | Fine Science Tools | 15001-08 | |
| Ecografía Doppler | VisualSonics | Vevo 2100 | |
| Pinza de graefe extrafina | Fine Science Tools | 11150-10 | 2 pares |
| Eye lubricante | CLCMEDICA | Optixcare lubricante para ojos Heparina | |
| (5000 U/mL) | Lista Nacional de Códigos de Medicamentos | 63739-953-25 | 100 UI/mL |
| Esterilizador de perlas calientes | Fine Science Tools | 18000-50 | |
| Cauterización a baja temperatura | Bovie | AA04 | |
| Recortador de bolígrafos | Wahl | 5640-600 | |
| Guantes | quirúrgicos sin polvoAnsell | 7824PF | |
| Portaagujas con mango redondo | Fine Science Tools | 12076-12 | |
| Paño toalla estéril | Dynarex | DY440-MI | |
| Solución salina esterilizada al 0,9% | Códigos de Medicamentos | 46066-807-25 | |
| Pinza dumont recta | Fine Science Tools | 11253-20 | |
| Portaagujas recto | Fine Science Herramientas | FST 12001-13 | |
| Tijeras de resorte de vannas rectas | Fine Science Tools | 25001-08 | |
| TrizChLOR4 | Lista de códigos nacionales de medicamentos | 17033-279-50 |
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