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Artículo de método

Un modelo murino de disfunción de la mano relacionada con el acceso a la hemodiálisis

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DOI:

10.3791/63892

31 de mayo de 2022

En este artículo

Resumen

Este protocolo detalla los pasos quirúrgicos de la creación de fístula arteriovenosa ilíaca común murina. Desarrollamos este modelo para estudiar la fisiopatología de las extremidades relacionada con el acceso a la hemodiálisis.

Resumen

La enfermedad renal crónica es un importante problema de salud pública, y la prevalencia de la enfermedad renal terminal (ESRD) que requiere terapias de reemplazo renal crónicas como la hemodiálisis continúa aumentando. La colocación de fístula arteriovenosa autógena (FAV) sigue siendo una opción de acceso vascular primario para los pacientes con ESRD. Desafortunadamente, aproximadamente la mitad de los pacientes de hemodiálisis experimentan disfunción de la mano relacionada con el acceso a diálisis (ARHD), que va desde parestesia sutil hasta gangrena digital. En particular, los impulsores biológicos subyacentes responsables de la ARHD son poco conocidos, y no existe un modelo animal adecuado para dilucidar los mecanismos y / o desarrollar nuevas terapias para la prevención / tratamiento de ARHD. Aquí, describimos un nuevo modelo de ratón en el que se crea una FAV entre la arteria ilíaca común izquierda y la vena, facilitando así la evaluación de la fisiopatología de las extremidades. La microcirugía incluye aislamiento de vasos, venotomía longitudinal, creación de anastomosis arteriovenosa y reconstrucción venosa. Las cirugías simuladas incluyen todos los pasos críticos, excepto la creación de FAV. La colocación de FAV ilíaca da lugar a alteraciones clínicamente relevantes en la hemodinámica central, isquemia periférica y deficiencias en el rendimiento neuromotor de las extremidades posteriores. Este nuevo modelo preclínico de FAV proporciona una plataforma útil que recapitula las perturbaciones neuromotoras comunes informadas por los pacientes en hemodiálisis, lo que permite a los investigadores investigar los mecanismos de la fisiopatología de ARHD y probar posibles terapias.

Introducción

El establecimiento y la preservación del acceso vascular funcional siguen siendo un objetivo primario importante para los pacientes con enfermedad renal terminal (ERT) que reciben terapia de reemplazo renal por hemodiálisis1. Los tratamientos repetidos de hemodiálisis son necesarios para eliminar los productos de desecho, normalizar los electrolitos y mantener el equilibrio de líquidos una vez que la función renal se vuelve inadecuada y, por lo tanto, son necesarios para la supervivencia a largo plazo2. Por lo tanto, el acceso vascular representa un "salvavidas" para los pacientes con ERT, y la colocación de fístula arte....

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Protocolo

Todos los procedimientos fueron aprobados por el Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales (IACUC) de la Universidad de Florida y el Centro Médico de Asuntos de Veteranos Malcom Randall.

NOTA: Los ratones machos C57BL / 6J adultos jóvenes (8-10 semanas de edad) se compraron en el Laboratorio Jackson y se alojaron en una instalación de animales controlada por luz (12 h luz: 12 h ciclo oscuro), temperatura (22 ° C ± 1 ° C) y humedad (50% ± 10%). Se permitió que cinco ratones habitaran por jaula (W: 18 cm x L: 29 cm x H: 12.5 cm) con materiales de anidación, alimentos y agua disponibles ad libitum. Después de 7 días de aclimat....

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Resultados

Los animales expuestos a una dieta de adenina han reducido las tasas de filtración glomerular (control: 441,3 ± 54,2 μL/min vs. ERC: 165,1 ± 118,3 μL/min, p < 0,05) y un aumento de los niveles séricos de nitrógeno ureico en sangre (control: 20,39 ± 4,2 μL/min vs. ERC: 38,20 ± 10,65 μL/min, p < 0,05) en comparación con los animales que recibieron chow a base de caseína, confirmando la presencia de insuficiencia renal antes de la cirugía de fístula arteriovenosa.

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Discusión

La prevalencia de pacientes en hemodiálisis con ARHD después de la creación de FAV ha continuado aumentando30,31. De hecho, las complicaciones sintomáticas no resueltas 4,32,33 como dolor, debilidad, parestesia y/o rango de movimiento reducido pueden afectar negativamente el bienestar del paciente 4,32,33,34,35,36 y amenaza.......

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Divulgaciones

Los autores no tienen nada que revelar.

Agradecimientos

Agradecemos sinceramente al Dr. Guanyi Lu de la División de Cirugía Vascular y Terapia Endovascular de la Universidad de Florida por el apoyo técnico en el desarrollo del modelo de FAV ilíaca, así como la capacitación quirúrgica, y a Ravi Kumar del Departamento de Fisiología Aplicada y Kinesiología de la Universidad de Florida por el apoyo técnico para obtener las imágenes microquirúrgicas en vivo.

Este trabajo fue apoyado por subvenciones de los Institutos Nacionales de Salud y Corazón Nacional, Pulmón y Sangre, números de instituto R01-HL148697 (a S.T.S.), así como el número de subvención de la Asociación Americana del Corazón POST903198 ....

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
0,15% Adenina dietaENVIGOTD.13089920% caseína, 0,15% adenina, 0,9% P
0,2% Adenina dietaENVIGOTD.13090020% caseína, 0,2% adenina, 0,9% P
10-0 Sutura de nailonAD quirúrgicaXXS-N1005T4
jeringas de aguja de 29 GExel International14-841-32
Jeringas de aguja de 31 GAdvocateU-100 jeringa de insulina
4-0 sutura de sedaAD quirúrgicoS-S41813
pinza Dumont en ángulo de 45 gradosFine Science Tools11253-25
5-0 sutura PGAAD quirúrgicoPSGU-518R13
6-0 sutura de sedaAD quirúrgicoS-S618R13
Esponja de gelatina absorbibleETHICON1975
Preparaciones con alcoholCovidien5110-cs4000Alcohol isopropílico al 70%
BuprenorfinaNA NA0,01 g/mL
C57BL6/Jratones Jaxon
Dieta de caseínaENVIGOTD.13089820% caseína, 0,9% P
Bastoncillos de algodónCONSTIXSC-9Bastoncillos de algodón redondos medianos de un solo extremo
Bastoncillos de algodónCONSTIXSC-4Pequeño bastoncillo de algodón duro, afilado y puntiagudo de doble punta
Curity esponjas no tejidas (2x2)Covidien9022
Tijeras de resorte Vannas curvadasFine Science Tools15001-08
Ecografía DopplerVisualSonicsVevo 2100
Pinza de graefe extrafinaFine Science Tools11150-102 pares
Eye lubricanteCLCMEDICAOptixcare lubricante para ojos Heparina
(5000 U/mL)Lista Nacional de Códigos de Medicamentos63739-953-25100 UI/mL
Esterilizador de perlas calientesFine Science Tools18000-50
Cauterización a baja temperaturaBovieAA04
Recortador de bolígrafosWahl5640-600
Guantesquirúrgicos sin polvoAnsell7824PF
Portaagujas con mango redondoFine Science Tools12076-12
Paño toalla estérilDynarexDY440-MI
Solución salina esterilizada al 0,9%Códigos de Medicamentos46066-807-25
Pinza dumont rectaFine Science Tools11253-20
Portaagujas rectoFine Science HerramientasFST 12001-13
Tijeras de resorte de vannas rectasFine Science Tools25001-08
TrizChLOR4Lista de códigos nacionales de medicamentos17033-279-50
Laboratorio Lista Nacional de

Referencias

  1. Gameiro, J., Ibeas, J. Factors affecting arteriovenous fistula dysfunction: a narrative review. The Journal of Vascular Access. 21 (2), 134-147 (2020).
  2. Culleton, B. F., Asola, M. R. The impact of short daily an....

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