Este estudio estableció un protocolo centrado en el perfeccionamiento técnico de un modelo murino de isquemia-reperfusión renal bilateral para la investigación de la lesión renal aguda.
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Artículo de método
Perfeccionamiento técnico de un modelo murino bilateral de isquemia renal-reperfusión para la investigación de lesiones renales agudas
En este artículo
Resumen
Resumen
El paro cardíaco representa una gran carga para la salud pública. La lesión renal aguda (LRA) es un marcador adverso en los supervivientes de paro cardíaco tras el retorno de la circulación espontánea (ROSC) tras una reanimación cardiopulmonar exitosa. Por el contrario, la recuperación de la función renal de la LRA es un predictor de resultados neurológicos favorables y alta hospitalaria. Sin embargo, no existe una intervención efectiva para prevenir el daño renal causado por el paro cardíaco después de un RCE, lo que sugiere que se requieren estrategias terapéuticas adicionales. La hipoperfusión renal y la reperfusión son dos mecanismos fisiopatológicos que causan LRA después de un paro cardíaco. Los modelos animales de LRA inducida por isquemia-reperfusión (IR-LRA) de ambos riñones son comparables con los pacientes con LRA después de un RCE en un entorno clínico. Sin embargo, la IR-LRA de ambos riñones es técnicamente difícil de analizar porque el modelo se asocia con una alta mortalidad y una amplia variación en el daño renal, lo que puede afectar el análisis. Se eligieron ratones ligeros, sometidos a anestesia general con isoflurano, sometidos a cirugía con abordaje dorsolateral y manteniendo su temperatura corporal durante la operación, reduciendo así el daño tisular y estableciendo un protocolo de investigación IR-LRA renal agudo reproducible.
Introducción
El paro cardíaco ocurre más de 80,000 veces al año en los Estados Unidos 1,2. La tasa de mortalidad del paro cardíaco es extremadamente alta 3,4,5,6. La LRA es un factor de riesgo importante asociado con una alta mortalidad y malos resultados neurológicos en pacientes con paro cardíaco después de un RCE 7,8,9,10,11,12,13.<....
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Protocolo
Todos los experimentos con animales se llevaron a cabo de acuerdo con la Guía para el Cuidado y Uso de Animales de Laboratorio, publicada por los Institutos Nacionales de Salud de los Estados Unidos (publicación de los NIH nº 85-23, revisada en 1996). El protocolo del estudio fue aprobado por el Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales de la Universidad Católica Fu-Jen y de acuerdo con las directrices del mismo. Consulte la Tabla de materiales para obtener detalles sobre todos los materiales e instrumentos utilizados en este protocolo.
1. Preparación de los ratones
- Seleccione rat....
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Resultados
La calidad de la cirugía renal bilateral IR-LRA debe evaluarse antes de realizar más análisis microscópicos o moleculares. Durante la cirugía, la isquemia renal debe confirmarse observando si el riñón ha cambiado de color de rosa a rojo oscuro poco después de que se pinza el pedículo renal con un clip microvascular (Figura 1). Después de la cirugía, el daño renal causado por la cirugía IR-LRA puede validarse aún más con unos pocos microlitros de suero a través de la extracción de sangre subm.......
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Discusión
El protocolo IR-LRA bilateral propuesto es adecuado para investigar el mecanismo de lesión por hipoperfusión y reperfusión de ambos riñones. El protocolo sugiere que los ratones ligeros, la anestesia general con isoflurano, el abordaje dorsolateral de la cirugía y el mantenimiento de la temperatura corporal durante la operación mitigan las dificultades técnicas asociadas, acortan la duración de la cirugía y aumentan la consistencia del procedimiento para la investigación de IR-LRA renal bilateral aguda.
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Divulgaciones
Los autores declaran que no existe ningún conflicto de intereses con respecto a la publicación de este artículo.
Agradecimientos
Este modelo fue desarrollado con el apoyo financiero del Ministerio de Ciencia y Tecnología de Taiwán (MOST 109-2320-B-030-006-MY3). Este manuscrito fue editado por Wallace Academic Editing.
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Sutura reabsorbible, 6-0 | Ethicon | J510G-BX | |
| Solución Betadine | Shineteh Istrument | ||
| Carprofen | Sigma | PHR1452 | |
| Ovillos | algodón Shineteh Istrument | ||
| Pinzas Graefe | Fine Science Tools | 11051-10 | |
| Almohadilla térmica | Shineteh Istrument | ||
| Isoflurano | Piramal Cuidados Críticos Inc. | 26675-46-7 | |
| Moria Abrazadera de vaso | Herramientas de ciencia fina | 18320-11 | |
| Portaagujas Olsen-Hegar | Herramientas de ciencia fina | 12002 - 12 | |
| de sano | Shineteh Istrument | ||
| Shinva | s2646 | ||
| Máquina de anestesia para animales pequeños | Sheng-Cing Instruments Co. | PASO AS-01 | |
| Tijeras de tejido | Fine Science Tools | 14072 - 10 |
Referencias
- Holmberg, M. J., et al. Annual incidence of adult and pediatric in-hospital cardiac arrest in the United States. Circulation: Cardiovascular Quality and Outcomes. 12 (7), 005580(2019).
- Benjamin, E. J., et al.
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Reimpresiones y permisos
