Summary
Здесь мы описываем метод создания модели искусственной децидуализации с использованием овариэктомизированной мыши, классический эксперимент по децидуализации эндометрия в области исследований децидуализации эндометрия.
Abstract
Децидуализация эндометрия – это уникальный процесс дифференцировки эндометрия, тесно связанный с менструацией и беременностью. Нарушение децидуализации приводит к различным нарушениям эндометрия, таким как бесплодие, привычное невынашивание беременности и преждевременные роды. Разработка и использование модели децидуализации эндометрия в репродуктивных исследованиях долгое время были основным событием для исследователей-репродуктологов. Мышь широко использовалась при изучении размножения и децидуализации. Существует три хорошо зарекомендовавших себя мышиных модели децидуализации, а именно естественная децидуализация беременности (NPD), искусственная децидуализация (AD) и децидуализация in vitro (IVD). Среди них AD считается надежной моделью децидуализации мыши, которая проста в реализации и близка к NPD. В данной статье основное внимание уделяется модифицированному методу создания и применения модели искусственной децидуализации мышей с овариэктомией для предотвращения эффектов яичников, что позволяет получить высоковоспроизводимые результаты с небольшими внутригрупповыми дисперсиями. Этот метод обеспечивает хорошую и надежную животную модель для изучения децидуализации эндометрия.
Introduction
С развитием репродуктивных технологий с помощью человека текущая частота клинической беременности экстракорпорального оплодотворения и переноса эмбрионов (ЭКО-ЭТ) достигла или даже превысила частоту естественной беременности. Несмотря на это, многие пациентки в клинической практике вспомогательной репродукции по-прежнему подвергаются многократному переносу эмбрионов, но не могут достичь желаемой беременности. Однако его специфический молекулярный механизм до сих пор неясен, поэтому клиническое вмешательство неэффективно, что является одной из существенных проблем, стоящих перед репродуктивной медициной 1,2.
Эндометриоидные факторы составляют около двух третей причин неудачиЭКО3. Имплантация эмбриона человека делится на три этапа: позиционирование, адгезия и инвазия 4,5,6. Материнский эндометрий претерпевает ряд изменений, чтобы соответствовать прибытию эмбриона. Формирование имплантационного «оконного периода» обеспечивает благоприятные условия для имплантации эмбриона 7,8.
У большинства млекопитающих после прилипания бластоцисты к просветному эпителию матки стромальные клетки, окружающие бластоцисту, быстро начинают размножаться и дифференцироваться, а быстрое ремоделирование мезенхимы меняет ее форму и функцию, что приводит к имплантации эмбриона 5,9,10. Быстрое увеличение объема и веса участка позволяет бластоцисте внедряться в строму матки, процесс, известный как децидуализация11. Строма эндометрия дифференцируется и ремоделируется при подготовке к беременности, в то время как переход стромальных клеток обеспечивает пространство и новые сигнальные связи для децидуальных клеток для выполнения своих функций12,13. Стромальные клетки превращаются в децидуальные клетки и секретируют многие знаковые факторы, такие как пролактин (PRL), инсулиноподобный белок, связывающий фактор роста 1 (Igfbp1), и так далее. Исследования показали, что аномальная децидуализация является одной из ключевых причин неудачной имплантации эмбриона, но причина аномальной децидуализации до сих пор неясна и нуждается в дальнейшем выяснении 1,14.
Модель искусственной децидуализации мыши имеет важное значение для изучения физиологических процессов и молекулярных механизмов, лежащих в основе децидуализации. Искусственная децидуализация (АД) в основном относится к процессу децидуализации эндометрия, установленному искусственными методами для имитации беременности или менструального цикла. С точки зрения морфологии, общая разница между децидуализацией беременности и искусственной децидуализациейневелика 15,16. Маточные железы существуют в эндометрии до формирования децидуа и исчезают после децидуализации. Что касается экспрессии генов, то выявлено лишь небольшое различие между естественной децидуализацией беременности (NPD) и AD15. Следовательно, модель искусственной децидуализации у мышей может имитировать децидуализацию беременности для изучения неизвестного патогенеза и нового лечения репродуктивных заболеваний человека.
NPD, AD и децидуализация in vitro (IVD) — это три метода достижения децидуализации мыши. Модель NPD зависит от естественной беременности и наиболее близка к физиологическому состоянию матери, включая эффекты от эмбрионов. Сравнение различий между имплантационными и неимплантационными участками является более физиологичным и удобным подходом для изучения децидуализации. Модель AD была разработана с использованием внутриматочной инъекции кунжутного масла в качестве стимулятора, чтобы вызвать децидуализацию у псевдобеременной самки мыши, спаренной с вазэктомией самцов, чтобы избежать воздействия эмбрионов. Модели НРЛ и БА играют важную роль в различных исследовательских целях, но они не могут избежать сбоев спаривания и внутригрупповых различий, вызванных различной активностью метаболизма материнских гормонов. IVD - это метод, зависящий от лечения комбинированным эстрогеном и прогестероном на клеточном уровне, который требует более строгих экспериментальных условий и работоспособности. Однако модель in vitro не может полностью имитировать децидуальный ответ в физиологических условиях15. Поэтому мы предлагаем простой и улучшенный метод индукции, модифицированный по сравнению с традиционным БА, чтобы уменьшить влияние эндогенных гормонов на децидуализацию. Исходя из обеспечения успешности индукции децидуализации, она ближе к физиологическому состоянию и больше подходит для экспериментов, требующих исключения эмбриональных факторов.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Все описанные эксперименты на животных были одобрены Комитетом по использованию и уходу за животными Медицинской школы Нанкинского университета (No 20171202). Все операции проводятся в соответствии с соответствующими рекомендациями агентства по уходу за животными и их использования, а также национальными рекомендациями.
ПРИМЕЧАНИЕ: Мыши были выращены в среде, свободной от патогенов (SPF), с температурой 22 °C ± 1 °C, относительной влажностью 50% ± 1%, циклом свет/темнота 12 ч/12 ч и свободным доступом к пище и воде.
1. Овариэктомия мыши
- Стерилизуйте хирургические инструменты с помощью высокотемпературного стерилизатора и стерилизатора высокого давления за 1 день до операции.
- Взвесьте 8-недельных мышей C57BL / 6 и внутрибрюшинно (внутривенно) введите 1% пентобарбитала натрия соответственно, чтобы обезболить мышей. Используемая доза составляет 40 мг / кг17. Эта доза обеспечивает 40-60 минут седации, что соответствует требованиям овариэктомии. Для предоперационной анальгезии вводите мышам 5 мг / кг мелоксикама (/к).
ПРИМЕЧАНИЕ: Об успешном обезболивании у мышей может свидетельствовать исчезновение глубоких мышечных рефлексов и ровное дыхание. Признаки успешной анестезии включают отсутствие моргания при прикосновении к внутреннему кантусу, отсутствие глотания при вытягивании языка, отсутствие сгибания ног при защемлении кожи между пальцами ног и отсутствие подпрыгивания при уколе хвоста. - Нанесите защитную глазную мазь на глазные яблоки, чтобы предотвратить сухость во время анестезии.
- Начинайте операцию, когда мыши полностью обезболиваются. Поместите и зафиксируйте мышей в положении лежа на рабочей поверхности, а волосы на спине сбритье, предварительно намочив их мыльным раствором. Продезинфицируйте кожу 70% этанолом после бритья.
- Найдите место разреза на 0,5 см (или на 1,0 см ниже ребра) на верхнем крае корня бедра обеих задних конечностей параллельно позвоночнику (рис. 1А).
ПРИМЕЧАНИЕ: Правильное расположение разреза необходимо для быстрой локализации яичника. - Возьмите место разреза в качестве центра и продезинфицируйте область разреза йодофором 3x, затем наденьте хирургическую простыню вокруг области разреза.
- Сделайте продольный надрез около 0,5-1,0 см с помощью ножниц. Разрежьте фасцию и пассивно разделите мышцы пинцетом.
- Найдите кусочек белого жирового мешка в поле разреза рядом с нижним полюсом почки через тонкий мышечный слой (рис. 1B).
ПРИМЕЧАНИЕ: Белая жировая подушка является наиболее очевидным индикатором расположения яичника. - Зажмите жировую массу кровоостанавливающими зажимами, а яичник, обернутый жировой подушкой, вытащите из разреза.
- Зажмите соединение яичника и маточной трубы изогнутым пинцетом, а ножницами удалите яичник вдоль ножки яичника. Остановите кровотечение с помощью шприц-ручки для электрокоагуляции или иглы шприца объемом 1 мл, нагретой на спиртовой лампе.
ПРИМЕЧАНИЕ: Обязательно сохраняют маточную трубу, которая является анатомическим ориентиром для последующего введения кунжутного масла в рога матки. - Промойте хирургический разрез обычным физиологическим раствором, чтобы предотвратить слипание тканей, используйте шов 4-0, чтобы сшить мышцу и кожу соответственно, и снова продезинфицируйте хирургический разрез йодофором.
- Поместите мышей в положение лежа в клетке и реанимируйте их в инкубаторе с температурой 25 °C, оснащенном источником света и системой вентиляции, примерно на 2 часа.
- Обратите внимание на мышей после операции, поместите их обратно в исходное место кормления в одиночестве, пока они полностью не выздоровеют, и дайте им достаточно воды и еды.
2. Послеоперационный покой и состав эстрогена и прогестерона
- Убедитесь, что мыши отдыхают в течение 2 недель после овариэктомии.
- В ультрачистом шкафу добавьте эстроген (2 нг/мкл) и прогестерон (0,2 нг/мкл) в кунжутное масло в центрифужных пробирках без РНК-ферментов.
- Поместите центрифужные пробирки в термостатическую водяную баню при температуре 37 ° C и непрерывно встряхивайте пробирки для ускорения растворения.
- После полного растворения разделите раствор кунжутного масла на аликуты по 100 мкл для удобного использования. Приготовленные растворы эстрогена и прогестерона хранить в холодильнике при температуре 4 °C.
3. Модель индуцированной искусственной децидуализации
- Подкожно (/к) вводят 100 нг эстрогена в 50 мкл кунжутного масла каждой мыши в течение 3 дней, а затем 2 дня отдыха15.
ПРИМЕЧАНИЕ: Убедитесь, что эстроген и прогестерон были сформулированы и размещены в разных местах. Любое загрязнение эстрогена прогестероном может привести к неудаче. - Вводите (/к) 1 мг прогестерона и 10 нг эстрогена в 50 мкл кунжутного масла каждой мыши в течение еще 3 дней15.
- Оперируют мышей для индуцирования модели искусственной децидуализации через15 через 6 ч после третьей комбинированной инъекции эстроген-прогестерон.
- Найдите рог матки на нижнем конце фаллопиевых труб и медленно введите 20 мкл кунжутного масла вместе с рогом матки, отодвинуте ткань назад, зашите разрез и дайте мышке восстановиться. Подход к операции такой же, как и при овариэктомиимыши 15.
ПРИМЕЧАНИЕ: Приступайте ко второй операции только в случае успешной овариэктомии (разрез кожи хорошо заживает, яичник полностью иссечен, а остаточный конец фаллопиевой трубы не прилипает к окружающим тканям).
ПРИМЕЧАНИЕ: Для индуцирования модели AD достаточно 20 мкл кунжутного масла; более 20 мкл кунжутного масла легко проникнет на другую сторону. - Введите (/к) 50 мкл кунжутного масла, содержащего 1 мг прогестерона и 10 нг эстрогена (H.), в течение еще 4 дней. Подробнее см. на рисунке 215,18.
4. Сбор образцов
- Усыпьте мышей (n = 6) путем удушья углекислым газом и соберите матку. Понаблюдайте за формой двусторонней матки, сделайте фотографии и взвесьте рога матки (рис. 3А, Б).
- Зафиксируйте 3-5 мм ткани матки 10% формалином, всадите в парафин и разрезайте их. Окрашивают срезы гематоксилином и эозином, чтобы наблюдать морфологические изменения19 (рис. 4А).
- Поместите еще 3-5 мм ткани матки в смесь с оптимальной температурой резки (OCT), заморозьте в жидком азоте и храните в холодильнике с температурой -80 °C. Замораживают срез ткани до 10 мкм и определяют активность щелочной фосфатазы в ткани матки методомазосвязывания 20 (рис. 4Б).
ПРИМЕЧАНИЕ: Удовлетворительные результаты могут быть получены с использованием замороженных срезов для определения содержания ALP, а не срезов парафина. - Извлеките общее количество РНК матки с помощью реагента тризола и выполните количественную ПЦР в реальном времени (кПЦР) на системе ПЦР в реальном времени (Таблица материалов) с мастер-миксом кПЦР (Таблица материалов) для обнаружения относительной экспрессии мРНК члена подсемейства 2 семейства пролактина 8 (Prl8a2), щелочной фосфатазы печени/костей/почек (Alpl) и инсулиноподобного белка, связывающего фактор роста 1 (Igfbp1)15 путем нормализации до уровней мРНК 18S (рис. 4C-E ). Соблюдайте условия ПЦР: стадия 1, 95 °C в течение 30 с; Стадия 2, 95 °C в течение 10 с и 60 °C в течение 30 с; Повторите цикл 40 раз. Полный список последовательностей праймеров приведен в таблице 1.
- Анализируйте данные кПЦР с помощью метода 2-ΔΔCT и метода t-критерия для статистического анализа в соответствующем программном обеспечении. В данном исследовании p < 0,05 считался статистически значимым.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Индексы модели децидуализации мыши включают общую морфологию матки, соотношение массы децидуализированной и недецидуализированной матки, гистологическую морфологию эндометрия и уровень экспрессии молекул маркера децидуализации. Общая морфология искусственной децидуализированной матки мышей, индуцированной нефтью, ближе к таковой матки во время беременности. Тело матки становится толстым, а полость матки становится меньше неиндуцированной стороны. Объем и масса индуцированного рога матки значительно выше, чем у неиндуцированной стороны (рис. 3А, Б). ОФ-окрашивание тканей матки показало, что железы исчезают, а стромальные клетки эндометрия на индуцированном роге дифференцируются в большие, круглые, цитоплазматические и многоядерные децидуальные клетки с нечеткими границами клеток. Неиндуцированные боковые срезы показывают морфологию ткани эндометрия в нормальном физиологическом состоянии (рис. 4А). Результат метода азосвязи показал, что содержание щелочной фосфатазы на маслоиндуцированной стороне было значительно выше, чем на неиндуцированной стороне (рис. 4B). Результаты кПЦР показали, что экспрессия мРНК Prl8a2, Alpl и Igfbp1 в индуцированном роге была значительно выше, чем в неиндуцированном, что позволяет предположить, что масло может индуцировать искусственную децидуализацию у мышей (рис. 4C-E).
Рисунок 1: Оперативный разрез овариэктомии мыши. (A) Положение овариэктомии мыши. (B) Положение яичника мыши во время овариэктомии. (C) Место яичника во время овариэктомии. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.
Рисунок 2: Порядок проведения операции. Вся процедура включает овариэктомию, послеоперационный покой, индукцию модели искусственной децидуализации и фенотипическую валидацию. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.
Рисунок 3: Генерация модели искусственной децидуализации мыши. (А) Репрезентативная картина искусственной децидуализации, вызванной нефтью. В правую матку не вводили масло, называемое маслом (-). В левую матку вводили масло, называемое маслом (+). (B) Вес матки, вводимой с маслом или без него. < 0,001. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.
Рисунок 4: Валидация модели искусственной децидуализации мыши. (A) Репрезентативная картина HE искусственной децидуализации, индуцированной нефтью. Шкала = 1 мм и 100 мкм. (B) Метод азосвязи определил активность щелочной фосфатазы искусственной дециды. Масштабные линейки = 200 мкм и 50 мкм. (C) Уровень экспрессии мРНК Prl8a2 был определен с помощью кПЦР. * p < 0,05. (D) Уровень экспрессии мРНК Alpl. **< 0,01. (E) Уровень экспрессии мРНК Igfbp1. **< 0,01. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.
| Мышь Igfbp1 qPCR-F | GCCCAACAGAAAGCAGGAGATG |
| Мышь Igfbp2 qPCR-R | GTAGACACCAGCAGAGTCCA |
| Prl8a2 Мышь qPCR-F | ACCAACCCATTCTCAGCTGG |
| Prl8a2 Мышь qPCR-R | TGTTCAGGTCCATGAGCTGGTG |
| Alpl Mouse qPCR-F | CCAGAAAGACACCTTGACTGTGG |
| Мышь Alpl qPCR-R | TCTTGTCCGTGTCGCTCACCAT |
| 18-секундная мышь qPCR-F | ATGGCCGTTCTTAGTTGGTG |
| Мышь 18s qPCR-R | CGGACATCTAAGGGCATCAC |
Таблица 1: Список последовательностей праймеров.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Децидуализация у мышей — это спонтанный процесс, зависящий от наличия эмбрионов, который отличается от человеческого. Однако было обнаружено, что искусственная стимуляция, такая как инъекция стеклянных шариков в матку и разрыв матки, может вызвать децидуализацию эндометрия вместо эмбрионов. Кроме того, исследователи обнаружили, что многие факторы могут индуцировать децидуал или участвовать в децидуализации, такие как инъекция стероидных гормонов, простагландинов и факторов ингибирования роста в полостьматки 21. По сравнению с приведенными выше методами моделирования, мышиная модель, подробно описанная здесь с овариэктомией, с использованием кунжутного масла в качестве стимулятора, может исключить эффекты эндогенно вырабатываемых эстрогена и прогестерона. Поэтому он экономичен и прост в эксплуатации.
Яичники должны быть удалены чисто, чтобы предотвратить остаточную ткань яичника, которая повлияет на последующую индукцию децидуализации. Этот шаг направлен на уменьшение воздействия эндогенного эстрогена и прогестерона, вырабатываемых яичниками. Следует избегать повреждения фаллопиевой трубы, потому что это может быть использовано в качестве знака для поиска матки при введении кунжутного масла в полость матки. Если происходит спайка брюшной полости или удаление маточных труб, оператор должен обратить внимание на то, чтобы отличить матку от кишечника.
Подтекание масла легко происходит в процессе подкожного введения. Следует выбирать кожу живота в качестве места подкожной инъекции и избегать сосков. Необходимо ввести масло и медленно вытащить иглу. Если иглу нельзя вытащить, когда мышь активна, это легко приведет к утечке. Следует на мгновение надавить на место иглы ватным тампоном, чтобы предотвратить утечку. В этой операции использовались инъекции экзогенного эстрогена и прогестерона, чтобы поддерживать стабильный уровень гормонов у мышей перед индуцирующей операцией децидуализации. Этот метод инъекции имитировал гормональные изменения в периимплантационном периоде мышей. Здесь мы индуцировали децидуализацию после второго пика эстрогена.
Ключом к успеху этой операции является количество введенного кунжутного масла. Слишком большое количество кунжутного масла проникнет в полость другого рога матки. Недостаточное количество кунжутного масла приведет к снижению реакции децидуализации или неравномерной децидуализации вдоль матки, что приведет к неожиданным экспериментальным различиям. Во время операции следует ввести иглу шприца в полость матки при введении кунжутного масла и осторожно потянуть вперед и назад, чтобы убедиться, что игла находится в полости матки. Часть полости матки может быть прозрачной при успешном введении. Следует аккуратно зажать пинцетом булавочный укол примерно на 10 секунд, чтобы убедиться, что он закрыт, что может предотвратить утечку кунжутного масла после вытаскивания иглы. При этом аккуратно надавите иглой на тело матки вниз, чтобы кунжутное масло равномерно распределилось в полости матки.
Послеоперационное лечение и реанимация являются другими ключами к успеху этой модели. Во-первых, важно поддерживать стерильную среду для разреза во время операции. Перед реанимацией мышей продезинфицируйте операционный разрез йодофором и накройте его куском медицинской марли, чтобы снизить заболеваемость инфекцией. После операции мышам необходимо метаболизировать анестетики в течение 2-3 ч для восстановления. В течение этого периода мышей необходимо поместить в инкубатор с температурой 25 °C, чтобы быстрее восстановиться и избежать переохлаждения, вызванного дезинфекцией 70% спиртом и йодофором. Следует обратить внимание на заживление в течение нескольких дней после операции и вовремя справиться с различными оперативными осложнениями, такими как растрескивание разрезов, отек, изъязвление и так далее.
Prl8a2 и Alpl являются наиболее классическими маркерами децидуализации. Igfbp1 также является основным белком в децидуализированных клетках у мышей и считается специфическим маркером децидуализации у мышей. Уровни экспрессии мРНК Prl8a2, Alpl и Igfbp1 в маточном роге, индуцированном маслом, значительно повышены по сравнению с контрольной стороной без инъекции масла. Более того, активность щелочной фосфатазы на маслоиндуцированной стороне значительно выше, чем на контрольной. Все эти результаты указывают на успех модели15 искусственной децидуализации.
Модель искусственной децидуализации мыши может быть использована для проверки молекул патогенного бесплодия и обеспечения хорошей модели валидации для диагностики и лечения бесплодия, связанного с аномальной децидуализацией эндометрия. Эта модель полезна для изучения репродуктивных заболеваний, таких как повторные аборты и повторные неудачи имплантации. Он используется для изучения роли материнских факторов в имплантации и инвазии эмбриона. Эта модель AD имеет хорошую безопасность, высокий уровень успеха и решает проблему влияния эндогенных гормонов. Однако это трудоемкий и очень требовательный процесс. Мы будем и дальше оптимизировать наши экспериментальные методы, чтобы облегчить исследования.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Авторам раскрывать нечего.
Acknowledgments
Авторы выражают благодарность за поддержку со стороны Национального фонда естественных наук Китая (82001629, XQS), Молодежной программы Фонда естественных наук провинции Цзянсу (BK20200116, XQS) и Финансирования постдокторских исследований провинции Цзянсу (2021K277B, XQS).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Estrogen | Sigma | E2758 | Hormone supplement |
| Progesterone | Sigma | P0130 | Hormone supplement |
| Sesame oil | Sigma | S3547 | Hormone supplement |
| Sodium pentobarbital | Dainippon Sumitomo Pharma Co.,Ltd. | Anaesthesia | |
| Meloxicam injection | Qilu Animal Health Products Co., Ltd | Analgesia | |
| Alkaline phophatase stain kit(kaplow's/azo coupling method) | Solarbio | G1480 | Alkaline phophatase stain |
| Eosin | Servicebio | G1005-2 | HE stain |
| Hematoxylin | Servicebio | G1005-1 | HE stain |
| ChamQ Universal SYBR qPCR Master Mix | Vazyme | Q711-02 | qPCR |
| 70% ethanol | Lircon | ZH1120090 | Disinfect |
| Iodophor | Runzekang | RZK-DF | Disinfect |
| Erythromycin Eye Ointment | Guangzhou Baiyunshan | Mice eyeball protect | |
| 4-0 suture | Ethicon | W329 | Incision suture |
| 10% formalin | Yulu | L25010118 | Tissue fix |
| Optimal cutting temperature compound | Sakura | 4583 | Ssection |
| Trizol reagent | Ambion | 15596018 | qPCR |
References
- Carson, S. A., Kallen, A. N. Diagnosis and management of infertility: A review. JAMA. 326 (1), 65-76 (2021).
- Yatsenko, S. A., Rajkovic, A. Genetics of human female infertility dagger. Biology of Reproduction. 101 (3), 549-566 (2019).
- Sang, Y., Li, Y., Xu, L., Li, D., Du, M. Regulatory mechanisms of endometrial decidualization and pregnancy-related diseases. Acta Biochimica et Biophysica Sinica. 52 (2), 105-115 (2020).
- Ng, S. W., et al. Endometrial decidualization: The primary driver of pregnancy health. International Journal of Molecular Sciences. 21 (11), 4092 (2020).
- Birgit, G., Brosens, J. J. Cyclic decidualization of the human endometrium in reproductive health and failure. Endocrine Reviews. 35 (6), 851-905 (2014).
- Owusu-Akyaw, A., Krishnamoorthy, K., Goldsmith, L. T., Morelli, S. S. The role of mesenchymal-epithelial transition in endometrial function. Human Reproduction Update. 25 (1), 114-133 (2019).
- Paulson, E. E., Comizzoli, P. Endometrial receptivity and embryo implantation in carnivores-commonalities and differences with other mammalian species. Biology of Reproduction. 104 (4), 771-783 (2021).
- Kelleher, A. M., Milano-Foster, J., Behura, S. K., Spencer, T. E. Uterine glands coordinate on-time embryo implantation and impact endometrial decidualization for pregnancy success. Nature Communications. 9 (1), 2435 (2018).
- Tian, J., et al. Attenuated monoamine oxidase a impairs endometrial receptivity in women with adenomyosis via downregulation of FOXO1dagger. Biology of Reproduction. 105 (6), 1443-1457 (2021).
- Large, M. J., DeMayo, F. J. The regulation of embryo implantation and endometrial decidualization by progesterone receptor signaling. Molecular and Cellular Endocrinology. 358 (2), 155-165 (2012).
- Dunn, C. L., Kelly, R. W., Critchley, H. O. Decidualization of the human endometrial stromal cell: an enigmatic transformation. Reproductive BioMedicine Online. 7 (2), 151-161 (2003).
- Zhu, H., Hou, C. C., Luo, L. F., Hu, Y. J., Yang, W. X. Endometrial stromal cells and decidualized stromal cells: Origins, transformation and functions. Gene. 551 (1), 1-14 (2014).
- Jose, R. M., et al. Endometrial and decidual stromal precursors show a different decidualization capacity. Reproduction. 160 (1), 83-91 (2020).
- Pan-Castillo, B., et al. Morphophysical dynamics of human endometrial cells during decidualization. Nanomedicine. 14 (7), 2235-2245 (2018).
- Wang, C., et al. Comparative analysis of mouse decidualization models at the molecular level. Genes. 11 (8), 935 (2020).
- De Clercq, K., Hennes, A., Vriens, J. Isolation of mouse endometrial epithelial and stromal cells for in vitro decidualization. Journal of Visualized Experiments. (121), e55168 (2017).
- Kerger, H., et al. Microvascular oxygen delivery and interstitial oxygenation during sodium pentobarbital anesthesia. Anesthesiology. 86 (2), 372-386 (1997).
- Filant, J., Spencer, T. E. Endometrial glands are essential for blastocyst implantation and decidualization in the mouse uterus. Biology of Reproduction. 88 (4), 93 (2013).
- Sheng, X., et al. The mitochondrial protease LONP1 maintains oocyte development and survival by suppressing nuclear translocation of AIFM1 in mammals. EBioMedicine. 75, 103790 (2022).
- Grogg, E., Pearse, A. G. Coupling azo dye methods for histochemical demonstration of alkaline phosphatase. Nature. 170 (4327), 578-579 (1952).
- Labarta, E., et al. Analysis of serum and endometrial progesterone in determining endometrial receptivity. Human Reproduction. 36 (11), 2861-2870 (2021).
