En el presente protocolo, se desarrolló una inducción de estenosis uretral en ratas Wistar, seguida de una reconstrucción uretral con un injerto de mucosa bucal. Se realizó un uretrograma retrógrado y una evaluación Doppler láser, validando la reconstrucción uretral (después de la formación de estenosis) y la colocación del injerto.
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Artículo de método
Inducción de estenosis uretral seguida de uretroplastia de injerto de mucosa bucal en un modelo de rata
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Resumen
Resumen
La reconstrucción uretral es un área importante de especialización para los urólogos. La mucosa bucal se considera la mejor opción cuando es necesario un injerto uretral, aunque en algunos casos es inadecuado o necesita ser optimizado para reparar una estenosis determinada. Por lo tanto, el desarrollo de procedimientos innovadores y la evaluación de su supuesto éxito en modelos experimentales es crucial para adaptarse a la necesidad clínica. Con este objetivo, este estudio describe un protocolo en el que la estenosis uretral fue inducida por electrocauterización en ratas Wistar. La reconstrucción uretral se realizó 1 semana después con un injerto de mucosa bucal, extraído del labio inferior, y colocado en forma de incrustación ventral. Un uretrograma retrógrado mostró una mejoría significativa en el diámetro uretral después de la uretroplastia en comparación con el valor respectivo después de la inducción de estenosis. Además, la colocación del injerto se evaluó mediante análisis de perfusión sanguínea mediante láser Doppler. Como era de esperar, un área azul oscuro correspondió al injerto de mucosa bucal no vascularizada. Este procedimiento puede simular con éxito el proceso fisiopatológico normal de la lesión uretral y la modulación tisular, así como la reconstrucción uretral mediante un injerto de mucosa bucal de forma reproducible, y servir de base para futuras investigaciones basadas en ingeniería tisular o injertos uretrales.
Introducción
La reconstrucción uretral es un reto importante para los cirujanos urológicos en el manejo de la lesión uretral en el contexto de estenosis, traumatismos o defectos congénitos1. Con intención curativa, la uretroplastia es el tratamiento de elección para la mayoría de los pacientes, con defectos uretrales largos (>2 cm) y anteriores que requieren algún tipo de uretroplastia de sustitución2. Muchos tejidos se han utilizado como sustitutos uretrales, incluidos los injertos de piel de espesor completo o dividido de áreas genitales o extragenitales, la mucosa de la pared de la vejiga o la mucosa bucal generalizada
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Protocolo
Todos los procedimientos con animales se realizaron de acuerdo con la Directiva 2010/63/UE. Los procedimientos fueron aprobados por el Organismo de Bienestar Animal institucional, autorizado por DGAV, la autoridad portuguesa competente para la protección animal (número de licencia 0421/000/000/2021). Para el presente estudio se utilizaron ratas Wistar Han IGS macho (Crl:WI(Han) (400-500 g) a las 12-14 semanas de edad. Los animales se obtuvieron de una fuente comercial (ver Tabla de Materiales).
1. Preparación de soluciones
- Solución anestésica
- Llene una jeringa de 3 ml con 2,3 ml de medetomi....
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Resultados
Un total de 12 ratas Wistar macho, con un peso de 400-500 g y 12-14 semanas de edad, se utilizaron para la inducción de la estenosis uretral. Se realizó un uretrograma retrógrado (RUG1) 1 semana después8, confirmando el éxito de la técnica. El diámetro uretral se midió en milímetros a nivel de la inducción de la estenosis. Tras esto, se realizó una uretroplastia con un injerto de mucosa bucal en la cara ventral de la uretra de rata. Las mismas ratas fueron sometidas a un segundo uretrograma retróg.......
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Discusión
La uretroplastia con injertos de mucosa bucal es una piedra angular importante en la reconstrucción uretral. Sin embargo, se deben desarrollar procedimientos innovadores para optimizar los ya descritos y establecer otros nuevos, como los materiales de ingeniería tisular y los injertos biológicos, para reducir las complicaciones y la morbilidad. Se han publicado varios procedimientos para establecer modelos preclínicos y definir técnicas quirúrgicas. Souza et al.1 realizaron un estudio que incluyó .......
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Divulgaciones
Los autores no tienen nada que revelar.
Agradecimientos
Agradecemos a João Leitão, jefe del departamento de Radiología del Centro Hospitalario Universitario Lisboa Norte, y a Catia Fernandes, técnica del servicio de Radiología del Centro Hospitalario Universitario Lisboa Norte, por su cooperación en la realización de uretrogramas.
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Atipamezole | OrionPharma | El antisedán (atipamezol) está indicado para revertir los efectos sedantes y analgésicos. | |
| Buprenorfina | RichterPharma | La buprenorfina es un derivado del alcaloide teabaino, que es un analgésico más potente (25-40 veces) y de mayor duración que la morfina. | |
| Carl Zeiss Opmi-1 FC Microscopio Quirúrgico Estereoscópico | Carl Zeiss Microscopy, Alemania | OPMI 1 FC de ZEISS simboliza calidad, precisión y fiabilidad. El sistema manual es fácil de usar y ofrece imágenes de alta fidelidad gracias a la legendaria óptica ZEISS. | |
| Carprofeno | Zoetis | El carprofeno es un fármaco antiinflamatorio (AINE) no esteroideo de la clase del ácido propiónico. | |
| Catéter 22 G. x 1'' | B Braun | Seguridad en Introcan | Catéter IV de etileno propileno fluorado (FEP) con construcción más firme para acceso arterial. |
| Enrofloxacina | Bayer | La enrofloxicina es un antibiótico fluoroquinolona. | |
| Fentanilo | Braun | 3644960 | El fentanilo es un potente analgésico opioide sintético. |
| Flumazenil | Fresenius Kabi | El antagonista de las benzodiacepínicas se utiliza para la reversión total o parcial de los efectos sedantes causados por las benzodiacepinas. | |
| Cauterización a altas temperaturas | Fiab | F7244 | Cauterización desechable, estéril, alta temperatura (1200 ºC; C), punta fina de 28 mm. |
| Gel Instillagel | Farco-pharma | Lubricante a base de celulosa con propiedades anestésicas locales y desinfectantes. | |
| Iopromida | Bayer | Medio de contraste inyectable no iónico, con yodo. | |
| Sistema de imagen láser Doppler (imagen de perfusión moorLDI2-HIR y software dedicado) | MoorLDI-V6.0, Moor Instruments Ltd, Axminster, Reino Unido | 5710 | Los modelos de angiogénesis utilizan imágenes Doppler láser para evaluar la perfusión sanguínea en las extremidades posteriores, una de las cuales se liga quirúrgicamente. Un software dedicado a la medición y comparación permite definir las regiones de interés para la evaluación del flujo sanguíneo en el miembro isquémico frente al no isquémico para establecer una "relación de reperfusión" que puede evaluarse tantas veces como sea necesario y durante varios días sobre el mismo sujeto. |
| Gel Lubrithal para los ojos | Dechra | Gel ocular utilizado en animales para prevenir la sequedad ocular durante la anestesia. Acción lubricante e hidratante sobre córnea y conjuntiva. | |
| Ratas Wistar Han Han (Crl:WI(Han) | Laboratorios Charles River, España | De doce a catorce semanas | |
| Metedomidina | Virbac | 037/01/07RFVPT | La medetomidina es un fármaco sintético utilizado como anestésico quirúrgico. |
| Midazolam | Labesfal | La medicación con benzodiacepinas se utiliza para anestesia y sedación procedimental. | |
| Sistema de Angiografía Monoplan | Philips Sistemas Médicos | Azurion 7 M20 | Un sistema fijo de rayos X fluoroscópicos diagnósticos diseñado específicamente para optimizar la capacidad de los usuarios para evaluar visual y cuantitativamente la anatomía y función de los vasos sanguíneos del corazón, el cerebro y otros órganos, así como el sistema linfático. |
| Pinzas para mosquitos | Henry Schein | 102-4346 | Pinza hemostática Hartman-Mosquito de acero inoxidable curvado de 3-1/2" |
| Portaagujas | Henry Schein | 100-2570 | Portaagujas Mayo-Hegar, acero inoxidable, 14 cm |
| Soporte para agujas oftálmicas | Asico | AE-6143 | Portaagujas de barranquer, más delicado sin bloqueo |
| Pentobarbital sódico | Ecupar | El pentobarbital sodio es la sal sódica del pentobarbital utilizada para la eutanasia. | |
| Pinzas puntiagudas | Esculap | BD335R | Microfórceps, punta de 0,30 mm |
| Polysorb 6.0 | Medtronic (Covidien) | UL-101 | Sutura sintética absorbible recubierta tenía como objetivo reducir la reacción inflamatoria en los tejidos, seguida de una encapsulación gradual de la sutura mediante tejido conectivo fibroso. |
| Providona-yodo | Mylan | Povidona-yodo 10% es un fármaco antiséptico, que se utiliza como desinfectante antes y después de la cirugía. | |
| Bisturí nº 11 | B Braun | BB511 | Acero al carbono, estéril |
| Tijeras de primavera | Henry Schein | 600-4826 | Tijeras quirúrgicas 31 castroviejo |
| Pinzas quirúrgicas | Esculap | BD33R | Microfórceps, punta de 0,20 mm |
| Tijeras Quirúrgicas | Esculap | MA873R | Micro Iris Scissor, puntas curvas para fragmentos |
| SurgiPro 7.0 | Medtronic (Coviden) | VP-702-X | Sutura de polipropileno monofilamento no absorbible indicada para su uso en ligaduras generales de tejidos blandos. |
Referencias
- Souza, G. F., Calado, A. A., Delcelo, R., Ortiz, V., Macedo, A. Histopathological evaluation of urethroplasty with dorsal buccal mucosa: an experimental study in rabbits. International Brazilian Journal of Urology. 34 (3), 345-354 (2008).
- Andrich, D. E., Mundy, A. R.
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Reimpresiones y permisos
