Detección SDS-PAGE/Immunoblot de multímeros Aß en el tejido cortical humano homogeneizados utilizando antígeno de recuperación del epítopo

Este protocolo permite la detección de un beta malter en el tejido cortical humano. El primer tejido homogeneizado se sonica con sonda y se clarifica mediante centrifugación a baja velocidad. A continuación, las muestras se hierven reducidas en tampón SDS y se cargan en una poliacrilamida.

Las proteínas en gel se transfieren a una membrana de nitrocelulosa y la membrana se calienta con vapor en solución salina tamponada con fosfato. Finalmente, en un agitador orbital, la membrana se incuba durante la noche en anticuerpo primario, anticuerpo secundario conjugado HRP y luego reactivo de peróxido luminal antes de la exposición a la película de rayos X. Hola, soy Rebecca Rosen, del laboratorio de Larry Walker en el Departamento de Neurociencia del Centro Nacional de Investigación de Primates Yerkes de la Universidad de Emory.