Monitorización del microambiente tumoral basada en PTM: un método para rastrear los cambios en la rigidez de la MEC mediante esferoides tumorales

- En la invasión tumoral, las células tumorales periféricas experimentan una transición epitelial a mesenquimal o EMT, lo que resulta en la degradación local de la matriz extracelular o MEC. Podemos estudiar in vitro la interacción de las células tumorales con la MEC.

Para estudiar estas interacciones, transfiera un esferoide preformado derivado de células tumorales pancreáticas a una placa que contenga andamio de colágeno junto con sondas trazadoras fluorescentes integradas y medios de cultivo. El esferoide tumoral libera proteasas, que degradan el colágeno y reducen la rigidez de la MEC, lo que resulta en el libre movimiento de las sondas trazadoras en la MEC.

Incube la placa durante el tiempo deseado. Observe la muestra bajo un microscopio óptico para observar la cuadrícula de puntos de muestra en el andamio de colágeno y grabar datos de video a partir de ellos. La región de la matriz cerca del esferoide muestra la máxima degradación del colágeno. Por lo tanto, ha aumentado el movimiento de la sonda. Por el contrario, el área más alejada del esferoide muestra una menor degradación del colágeno, lo que resulta en un movimiento restringido de las moléculas de la sonda.

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