Name: Evaluación del equilibrio del motor y la coordinación en ratones utilizando la barra de equilibrio (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-03-10T15:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 3 s
Description: Aprende a evaluar el equilibrio y la coordinación motora en ratones mediante la prueba de la barra de equilibrio. Este método sensible detecta déficits sutiles en modelos de enfermedades neurológicas y evalúa tratamientos farmacológicos.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Ámbar Southwell La instalación del equipo y entrenó a los autores en su uso. El financiamiento fue proporcionado por una beca del NINDS a Paul Patterson.

1. Este protocolo se basa en las de Southwell et. al. (2009) y Carter et. al. (2001). <ol><li> El aparato consiste en un haz de rayos metros con una superficie plana de 12 mm o 6 mm de ancho) en reposo 50 cm por encima de la mesa en dos polos. Un cuadro negro se coloca en el extremo de la viga en el punto de llegada. (Madera contrachapada y otros tipos de madera para las vigas, postes, y la caja se puede encontrar en cualquier ferretería). El material de nidificación de las jaulas en casa se coloca en la caja de negro para atraer el ratón al punto final. Una lámpara (con una bombilla de 60 vatios) se utiliza para brillar la luz por encima del punto de inicio y sirve como un estímulo aversivo. El tiempo para cruzar el centro de 80 cm se mide por dos detectores de movimiento (fabricado por Visopia): una a 0 cm que se inicia un temporizador y una de 80 cm que se detiene el cronómetro. Una hamaca de nylon (que se puede obtener de una tienda de telas local) se extiende por debajo de la viga, ~ 7.5 cm por encima de la mesa, para amortiguar cualquier caída. Una cámara de video se encuentra en un trípode para grabar el espectáculo. El aparato utilizado en esta demostración fue construido en el sitio. </li><li> Una cohorte de al menos 10 ratones para cada condición, se recomienda para esta prueba. Los ratones se encuentran en grupos, siempre que sea posible, en un 12 horas de luz (7am-7pm) / oscuridad ciclo y se aclimataron a las jaulas en las instalaciones de comportamiento por lo menos 2 semanas antes del comienzo de la prueba. Aproximadamente 10 minutos antes del entrenamiento / prueba, los ratones pueden ser transportados a la sala que contiene el aparato de la viga. </li><li> Los días de entrenamiento, cada ratón cruza el haz de 12 mm 3 veces y luego los tiempos de haz 6 mm 3. Vigas de mayor ancho (es decir, 28 mm) se puede utilizar para los ratones que no son capaces de atravesar los estrechos o grandes ratones. Los ratones se colocan en un extremo de una viga y el tiempo requerido para cruzar a la caja de escape en el otro extremo (80 cm) se mide por los detectores de movimiento. El temporizador se inicia por la nariz del ratón entre el centro de 80 cm, y se detuvo cuando el animal llega al final de los 80 cm. Los ratones reposar durante 10 min en sus jaulas en casa entre sesiones de entrenamiento en los dos haces. Durante este período, entre ensayos, otro 3-4 ratones pueden ser entrenados para hacer un uso eficiente del tiempo. Ratones C57BL / 6 suelen cruzar la viga con una cantidad mínima de parar o detener. Sin embargo, cuando lo hacen puesto, oler o mirar a su alrededor, sin proceder hacia adelante, el investigador debe fomentar el ratón para seguir avanzando por la insistencia, picar, o empujando desde atrás con los dedos enguantados. Una vez que los ratones se encuentran en la caja de seguridad, se les permite un tiempo (menos de 15 segundos) para descansar antes de la próxima prueba. Después de cada sesión de entrenamiento, los ratones son devueltos directamente a sus jaulas y llevado de vuelta a su habitación de la vivienda. Es de destacar que los ratones pueden detenerse más si tienen más capacitados y tener demasiada familiaridad con la tarea y el aparato. Por otro lado, la formación se puede continuar por días adicionales si los ratones todavía no atraviesan toda la viga con éxito después de dos días de entrenamiento. Si los tratamientos se aplican a los ratones, una medida de referencia sobre el rendimiento debe ser obtenido antes del tratamiento. </li><li> En el día de la prueba, los tiempos para cruzar cada haz se registran. Dos ensayos con éxito en el que el ratón no puesto en la viga se promedian. Las grabaciones de vídeo se puede utilizar para el análisis más fino de deslizamiento y otros déficits motores observables. Una forma alternativa de evaluar a pie del haz es de un 1,2 de puntuación el sistema neurológico, que las tasas de la imposibilidad de cruzar el rayo como una puntuación de "1" y la capacidad de atravesar el haz normalmente con las dos patas sobre la superficie de la viga y menos de dos se desliza el pie como un "7". Un deslizamiento se define como el pie viene de la parte superior de la viga. En este sistema de indexación, una puntuación de "3" corresponden a cruzar la viga arrastrando extremidades. Un animal que los resultados de una en dos ensayos no una nueva prueba. Descripción del desempeño en la viga en relación con otros resultados se pueden encontrar en Feeney et al., (1982) y Carter et al., (2001). </li><li> Las vigas y el cuadro se limpian los excrementos de ratón y se limpió con una toalla empapada con el 70% de etanol y agua antes de la siguiente viga se coloca sobre el aparato. </li></ol> 2. Los resultados representativos: <img src="/files/ftp_upload/2376/2376fig1.jpg" alt="Figura 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figura 1"> Figura 1. Tiempos de cruz de C57BL6 hombres y mujeres en las vigas de 6 mm y 12 mm. Una cohorte de 9 a 11 semanas de edad, los ratones C57BL/6-NCRL PESO fueron probados en los dos haces después de 2 días de entrenamiento. Los tiempos promedio para el cruce de la viga de 12 mm fueron 4,6 ± 0,4 segundos para los hombres (n = 14) y 3,3 ± 0,3 segundos para las mujeres (n = 11). Veces en la barra de 6 mm fueron 6,8 ± 0,7 segundos para los hombres (n = 13) y 5,9 ± 0,5 segundos para las mujeres (n = 10) (los errores se presentan como SEM).

<ol><li>Feeney, D. M., Gonzalez, A., Law, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Amphetamine%2C+haloperidol%2C+and+experience+interact+to+affect+rate+of+recovery+after+motor+cortex+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Amphetamine, haloperidol, and experience interact to affect rate of recovery after motor cortex injury.</a> Science. 217, 855-857 (1982).</li>
<li>Carter, R. J., Morton, J., Dunnett, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Motor+coordination+and+balance+in+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Protoc+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Motor coordination and balance in rodents.</a> Curr Protoc Neurosci. Chapter 8, (2001).</li>
<li>Wallace, J. E., Krauter, E. E., Campbell, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Motor+and+reflexive+behavior+in+the+aging+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J+Gerontol%22%5BJournal%5D)">Motor and reflexive behavior in the aging rat.</a> J Gerontol. 35, 364-370 (1980).</li>
<li>Brooks, S. P., Dunnett, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tests+to+assess+motor+phenotype+in+mice%3A+a+user%27s+guide%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Tests to assess motor phenotype in mice: a user's guide.</a> Nat Rev Neurosci. 10, 519-529 (2009).</li>
<li>Fox, G. B., Fan, L., Levasseur, R. A., Faden, A. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sustained+sensory%2Fmotor+and+cognitive+deficits+with+neuronal+apoptosis+following+controlled+cortical+impact+brain+injury+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Sustained sensory/motor and cognitive deficits with neuronal apoptosis following controlled cortical impact brain injury in the mouse.</a> J Neurotrauma. 15, 599-614 (1998).</li>
<li>Buccafusco, J. J. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBuccafusco%2C+JJ+%22Methods+of+behavioral+analysis+in+neuroscience%22">Methods of behavioral analysis in neuroscience</a>. , 2nd edn, CRC Press. (2009).</li>
<li>Southwell, A. L., Ko, J., Patterson, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intrabody+gene+therapy+ameliorates+motor%2C+cognitive%2C+and+neuropathological+symptoms+in+multiple+mouse+models+of+Huntington%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Intrabody gene therapy ameliorates motor, cognitive, and neuropathological symptoms in multiple mouse models of Huntington's disease.</a> J Neurosci. 29, 13589-13602 (2009).</li>
<li>Carter, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+progressive+motor+deficits+in+mice+transgenic+for+the+human+Huntington%27s+disease+mutation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Characterization of progressive motor deficits in mice transgenic for the human Huntington's disease mutation.</a> J Neurosci. 19, 3248-3257 (1999).</li>
<li>Gulinello, M., Chen, F., Dobrenis, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+deficits+in+motor+coordination+and+cognitive+dysfunction+in+a+mouse+model+of+the+neurodegenerative+lysosomal+storage+disorder%2C+Sandhoff+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Early deficits in motor coordination and cognitive dysfunction in a mouse model of the neurodegenerative lysosomal storage disorder, Sandhoff disease.</a> Behav Brain Res. 193, 315-319 (2008).</li>
<li>Stanley, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+mouse+beam+walking+assay+offers+improved+sensitivity+over+the+mouse+rotarod+in+determining+motor+coordination+deficits+induced+by+benzodiazepines%5BTitle%5D)+AND+%22J+Psychopharmacol%22%5BJournal%5D)">The mouse beam walking assay offers improved sensitivity over the mouse rotarod in determining motor coordination deficits induced by benzodiazepines.</a> J Psychopharmacol. 19, 221-227 (2005).</li>
</ol>

Los experimentos con animales se realizaron de acuerdo con las directrices y normas establecidas por el Cuidado de Animales Caltech institucional y el empleo (IACUC).

El rendimiento en la barra de equilibrio es una medida útil de la coordinación fina y el equilibrio y ha sido validado por el trabajo anterior. Haz la prueba puede detectar déficits motores debido a la edad, lesiones nerviosas centrales Syst `, y la manipulación genética y farmacológica de los roedores jóvenes y mayores 2,3,4. Los ratones con lesiones corticales impacto a menudo exhiben contralateral caer en la viga de 5,6. Haz la prueba también se ha utilizado para diferenciar las habilidades moto...

<ul><li> Vigas: 1-m listones de madera lisa con cuadrados pequeños, medianos y grandes (es decir, 6, 12 y 28 mm de ancho) secciones transversales </li><li> Soporte de pie para sostener la sección de inicio de la viga elevada (alrededor de 1,5 cm de sección y 50 cm de alto) </li><li> Caja de la meta (20 cm a cada lado), montado sobre un soporte (3 cm de sección y 50 cm de alto) </li><li> Hamaca-~ 7,5 cm por encima de mesa </li><li> De 60 vatios (W) lámpara de escritorio </li><li> Cámara de vídeo, trípode, y las cintas vírgenes de vídeo </li><li> Etanol, toallas de papel, materiales de limpieza </li></ul>

evaluación del equilibrio del motor y la coordinación en ratones utilizando la barra de equilibrio

Assessment of Motor Balance and Coordination in Mice using the Balance Beam

Lesión cerebral, las manipulaciones genéticas, y los tratamientos farmacológicos pueden resultar en alteraciones de las habilidades motoras en ratones. La coordinación motora fina y el equilibrio puede ser evaluado mediante el ensayo de caminar viga. El objetivo de esta prueba es para el ratón para mantenerse en pie y caminar a través de un haz estrecho elevado a una plataforma segura. Esta prueba se lleva a cabo durante 3 días consecutivos: 2 días de entrenamiento y un día de la prueba. Desempeño en la viga se cuantifica mediante la medición del tiempo que tarda el ratón para atravesar el haz y el número de hojas de la pata que se producen en el proceso. Aquí se presenta el protocolo utilizado en nuestro laboratorio, y los resultados de representante de un grupo de ratones C57BL / 6. Esta tarea es particularmente útil para la detección de los déficits en las habilidades motoras sutiles y el equilibrio que no puede ser detectado por las pruebas de motor, tales como la rotarod.

Los déficits en la coordinación motora fina puede ser evaluada con la prueba de barra de equilibrio. Desempeño en la viga se cuantifica mediante la velocidad a la que se recorre la viga y el número de veces que el ratón se desliza sobre la viga.

Evaluación del equilibrio del motor y la coordinación en ratones utilizando la barra de equilibrio

Las lesiones cerebrales, las manipulaciones genéticas y los tratamientos farmacológicos pueden provocar alteraciones de las habilidades motoras en ratones. La coordinación motora fina y...

El objetivo general de este procedimiento es evaluar la coordinación motora y el equilibrio en ratones. El primer paso consiste en armar una barra de equilibrio con la posición del detector de movimiento para registrar la latencia del cruce por la barra, comenzando el entrenamiento con el animal colocado en el punto de partida de la barra de equilibrio y permitiéndole cruzar hacia una plataforma segura. A veces es necesario animar al animal a lo largo de la barra hacia el punto final.Después de un intervalo interensayo de 10 minutos, los animales fueron entrenados en una viga más estrecha para permitir una mayor sensibilidad. El paso final del procedimiento consiste en probar a los animales entrenados en vigas de diferentes anchos. En última instancia, se pueden obtener resultados que muestren déficits en la coordinación motora y el equilibrio.Hola, soy Tim Luong y soy candidato a MD PhD en el departamento de biología del Instituto de Tecnología de California. Soy Holly Carlisle y soy investigadora posdoctoral en el departamento de biología del Instituto de Tecnología de California, y hoy les mostraremos cómo evaluar el equilibrio y la coordinación motora en ratones utilizando la p

assessment-motor-balance-coordination-mice-using-balance

Research

Investigación

JoVE Journal

Neuroscience

Neurociencia

Los protocolos se presentan establecidas dos tareas de coordinación motora, la barra de rodillo giratorio horizontal y la aceleración, también dos pruebas desarrolladas en Oxford recientemente, las barras estáticas y barras paralelas. Estas pruebas pueden detectar deficiencias motoras potencialmente de interés en su propio derecho, así como que son posibles variables en las pruebas de otras áreas de la conducta.

Medición de Coordinación motora en ratones

En este video, describimos el procedimiento de prueba de pisada y el análisis relacionado para evaluar la marcha y la coordinación motora en ratones.

Evaluación de la marcha mediante el análisis de la huella: un método para probar la coordinación motora en ratones

En las enfermedades y trastornos del movimiento de Parkinson en general, los ensayos de comportamiento sensibles y fiables son esenciales para probar nuevas terapias potenciales. A continuación, describimos una batería manejable de pruebas sensoriomotoras de ratones que son sensibles a los diferentes grados de lesión en el sistema nigroestriatal y útil para los estudios preclínicos.

Evaluación de la función sensoriomotora en modelos de ratón de la enfermedad de Parkinson

Control del motor y el rendimiento balanza se conocen a deteriorarse con la edad. Este artículo presenta una serie de pruebas de comportamiento no invasivas estándar con la adición de un estímulo rotatorio sencillo para desafiar al sistema y mostrar los cambios en el rendimiento vestibulares equilibrio en un modelo murino de envejecimiento.

Evaluación del Comportamiento del Envejecimiento Ratón Sistema Vestibular

Pruebas de comportamiento se utilizan en ensayos pre-clínicos para evaluar los efectos fenotípicos de una enfermedad o tratamiento sobre el bienestar de los animales. Para evaluar globalmente el funcionamiento motor, seleccionamos pruebas de locomoción general, fuerza muscular y coordinación: prueba de campo abierto, la malla y la prueba del rotarod, respectivamente.

Batería de comportamiento pruebas evaluación General locomoción, fuerza Muscular y la coordinación en ratones

Se presentan protocolos para evaluar los efectos autónomos y conductuales del movimiento pasivo en roedores utilizando el movimiento vertical del ascensor y la rotación de la noria.

Evaluación de los efectos autónomos y conductuales del movimiento pasivo en ratas mediante el movimiento vertical del ascensor y la rotación de la noria

Se proporciona una tubería experimental para describir cuantitativamente el patrón locomotor de ratones que caminan libremente utilizando la caja de herramientas MouseWalker (MW), que va desde grabaciones de video iniciales y seguimiento hasta análisis posteriores a la cuantificación. Se emplea un modelo de lesión por contusión de la médula espinal en ratones para demostrar la utilidad del sistema MW.

Uso del MouseWalker para cuantificar la disfunción locomotora en un modelo de ratón de lesión de la médula espinal

Aquí presentamos un protocolo para una prueba de comportamiento versátil desarrollada recientemente, la prueba de la viga de escalera. Esta prueba tiene la ventaja de detectar la ataxia cerebelosa sutil causada por un defecto de la acción de la hormona tiroidea en el sistema nervioso central sobre las pruebas de comportamiento convencionales que evalúan el rendimiento motor.

Un método versátil y conductual para investigar los efectos de la hormona tiroidea en la función cerebelosa

Este artículo presenta un protocolo para ejecutar el concepto de unidad de accidente cerebrovascular (mSU) altamente traslacional y probado de forma independiente en ratones de gran carrera. También proporciona un protocolo estandarizado para la ejecución de la escala focal experimental de ictus en ratones, que evalúa los déficits focales de ictus detectados incluso a largo plazo.

El protocolo de la Unidad de Accidente Cerebrovascular del Ratón con puntuación neurológica estandarizada para estudios traslacionales de accidente cerebrovascular del ratón

Se describe un protocolo para examinar el desarrollo de la hiperalgesia y la tolerancia en ratones inducida por opioides. Sobre la base de la medición de las respuestas nociceptivas térmicas y mecánicas de los animales no tratados previamente y tratados con morfina, que permite cuantificar el aumento en la sensibilidad al dolor (hiperalgesia) y disminuir en la analgesia (tolerancia) asociada con la administración de opiáceos crónica.

Evaluación de la hiperalgesia inducida por la morfina y analgésicos Tolerancia en ratones utilizando térmicas y mecánicas Modalidades nociceptivos

Aprende a evaluar el equilibrio y la coordinación motora en ratones mediante la prueba de la barra de equilibrio. Este método sensible detecta déficits sutiles en modelos de enfermedades neurológicas y evalúa tratamientos farmacológicos.

Evaluación del equilibrio del motor y la coordinación en ratones utilizando la barra de equilibrio

Explorar más videos